HIV-1广谱中和活性样本膜蛋白基因序列特征分析

目的分析广谱中和活性感染者不同时间点HIV-1膜蛋白基因的序列特征。方法应用单拷贝基因组扩增技术(Single genome amplification,SGA)扩增获得不同时间点样本的全长膜蛋白(Env)基因,分析Env基因可变区序列长度、糖基化位点数目、细胞嗜性及中和表位关键氨基酸的变异。结果系统进化分析显示在5个不同时间点获得的98条全长Env基因为HIV-1 B’亚型毒株;毒株序列随时间推移基因距离增加,V1V2区序列长度变化大于V4区,V3区与V5区序列长度保持恒定;Env基因共享序列有27个潜在糖基化位点(PNGS),V1V2区的糖基化位点数目变化较大,MPER区次之,V3区数目恒定;部分毒株嗜性随时间推移发生了从CCR5到CXCR4的转变;Env基因与广谱中和活性相关的特征氨基酸位点的突变率在4.76%~100.00%间。结论广谱中和活性感染者不同时间点的Env基因序列差异随时间推移而增加,中和单抗识别的关键位点氨基酸存在不同类型和不同程度的突变,表明广谱中和活性感染者体内毒株在免疫压力下持续进化。     

HIV-1广谱中和活性感染者假病毒的中和表型分析

目的分析HIV-1广谱中和活性感染者基于膜蛋白基因(env)的假病毒对自体血浆和代表性广谱单克隆中和抗体(bm NAbs)的中和表型。方法单基因组扩增(SGA)广谱中和活性感染者第0月血浆的env基因并克隆至pc D-NA~(TM)3.1 Directional TOPO表达载体,将env表达质粒与HIV-1骨架质粒p SG3△env共转染293T/17细胞制备假病毒,用假病毒分别与自体连续时间点血浆和代表性bm NAbs进行中和实验分析中和表型。结果共获得11株功能性假病毒,假病毒对8个连续时间点自体血浆的中和敏感性呈现先升高(第0~15月),后下降(第16~32月),之后再上升(第33~45月)的波动。所有假病毒对10E8、PGT121和VRC01中和敏感(IC_(50)6μg/m L);各有18.2%(2株)的假病毒对12A21和2G12高度敏感(IC_(50)1μg/m L);所有病毒均对PGT135呈中和抗性。结论假病毒对当前时间点血浆的中和敏感性低,对之后时间点血浆中和敏感性增强,提示感染者体内病毒与中和抗体的动态进化过程。同一时间点假病毒对特定bm-NAbs的敏感性差异明显,提示感染者准种毒株间中和表型的复杂性。     

DMBA所致SD大鼠乳腺癌的醛缩酶同工酶的实验研究

作者对 DMBA(7.12dimethylbenz[α]ant-hracene)所致 SD(Sprague-Dawley)大鼠乳腺癌中醛缩酶同工酶进行了实验研究,比较了体外培养的乳腺癌细胞和乳腺癌组织,正常大鼠血清和致癌大鼠血清醛缩酶同工酶谱,为进一步研究乳腺癌与醛缩酶谱变化奠定基础。     

昆明市静脉吸毒感染者HIV-1env基因C2-V4区序列特征分析

目的 分析昆明市静脉吸毒（intravenous drug user,IDU）感染者艾滋病病毒1型（human immunodeficiency virus type 1,HIV-1） env基因C2-V4区序列特征及代表性广谱单克隆中和抗体（broadly monoclonal neutralizing antibodies,bmNAbs）的表位变异。方法 在昆明市收集165份IDUHIV-1感染者血浆样品,提取RNA,通过逆转录得到cDNA,巢式聚合酶链反应（nested-polymerase chain reaction,nested-PCR）扩增HIV-1膜蛋白基因C2-V4区,应用BioEdit和MEGA等生物信息软件分析所获得序列的特征,并分析2G12、PGT135、PGT128、b12和VRC01等bmNAbs的表位变异。结果 165条序列主要为CRF08_BC （74.55%）和CRF07_BC （23.03%）重组毒株,各可变环变异程度由小到大为V3区 < C3区 < V4区,并且CRF08_BC样本的C2-C4、V3区、C3区和V4区基因离散率分别大于CRF_07BC的相应区域;V3环顶端四肽存在5种类型:GPGQ （95.76%）、GPGR （1.82%）、GPRQ （1.21%）、GPGL （0.61%）和RPGQ （0.61%）;辅助受体主要为CCR5（97.58%）。90%以上的CRF08_BC和CRF07_BC重组毒株存在与2G12识别相关的糖基化位点的缺失;而b12、VRC01、PGT135和PGT128等抗体识别的位点在CRF08_BC和CRF07_BC重组毒株中的变异率低。结论 CRF08_BC和CRF07_BC为昆明市IDU感染者的主要流行毒株;CRF08_BC基因离散率高于CRF07_BC毒株;V3区序列变异程度小于C3区及V4区;2G12、PGT135、PGT128、b12和VRC01等代表性bmNAbs表位在CRF08_BC和CRF07_BC毒株存在不同程度的变异。     

艾滋病生物医学预防策略现状及挑战

近年来,包皮环切术、暴露前/后预防、杀微生物剂、治疗性预防等艾滋病生物医学预防策略的研究取得重要进展,探索及选择适合我国国情和艾滋病流行情况的预防策略必要而迫切。本文拟从研究现状、发展趋势以及在我国推广的机遇和挑战等方面简要介绍近年人类"抗艾"道路上重要的生物医学预防策略。     

LncRNA在喉癌患者血清与癌组织中的表达及其与预后的关系

【摘要】 目的 探讨长链非编码RNA（LncRNA）在喉癌患者血清、癌组织中的表达及其与预后的关系。 方法 选取本院2013年1月～2018年1月确诊的喉癌患者100例为观察组,选取年龄、性别与观察组匹配的健康体检者60例为对照组,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定两组血清LncRNA H19表达水平;癌组织、配对癌旁组织经手术切除获取,检测患者血清及癌组织、配对癌旁组织LncRNA H19表达水平,根据癌组织、癌旁组织及血清LncRNAH19表达水平将观察组分为高表达组（55例）与低表达组（45例）,并分析癌组织LncRNA H19表达水平与患者病理特征及预后的关系。 结果 观察组血清LncRNA H19相对表达水平显著高于对照组（P＜0.05）;癌组织LncRNA H19相对表达水平显著高于配对癌旁组织（P＜0.05）;观察组血清与癌组织LncRNA H19相对表达水平显著正相关（P＜0.05）;LncRNA H19高表达组TNM分期III期、低分化、淋巴结转移比例均显著高于低表达组（P＜0.05）;LncRNA H19高表达组患者总生存时间、无进展生存时间均显著短于低表达组（P＜0.05）。 结论 喉癌患者血清、癌组织LncRNA H19表达均上调,LncRNA可能参与喉癌发生、进展过程,可作为喉癌患者预后评估的有效指标。     

具有广谱中和活性的HIV感染者血浆病毒膜蛋白基因及中和特征分析

目的 分析一例具有广谱中和活性的慢性HIV感染者病毒膜蛋白（Env）基因序列特征及中和特征。方法 使用单拷贝基因组扩增（SGA）方法从患者两个随访时间点血浆样本扩增env基因,测序后进行序列比对和进化树构建,分析env基因特征;将env基因克隆至pcDNA^TM3.1载体上,env质粒和骨架质粒pSG3△env共转染293T细胞制备假病毒,使用假病毒分别和两个时间点的自体血浆及6种不同的广谱中和抗体进行中和试验,分析Env蛋白的中和特征。结果 从两个时间点血浆样本中共获得50个全长env基因,进化分析显示两个时间点序列各自聚集成簇,第1个时间点膜蛋白序列有较短的V1区和较少的V1区糖基化位点数目,第2个时间点膜蛋白序列有更高的基因多样性。自体血浆不能中和同时期的假病毒,但能中和前期的假病毒;两个时间点的假病毒对PGT121、PGT135、2G12和10E8抗体均高度敏感,但对VRC01及12A21抗体呈现中和抗性。结论 该具有广谱中和活性的慢性HIV感染者病毒膜蛋白基因持续进化;感染者体内存在CD4bs类中和抗体的免疫压力。     

多肽IMB-P1的理性设计及活性评价

目的 通过对多肽IMB-P1进行截短设计并进行体内和体外抗肿瘤活性评价,确定多肽IMB-P1的最小功能片段.方法 分别从N端和C端对多肽IMB-P1进行截短,经固相合成法制备目标多肽.测定这些多肽对PD-1/PD-L1结合的抑制活性,在荷B16黑色素瘤小鼠模型中评价它们的体内抗肿瘤活性,并测定活性好的多肽在血浆中的稳定...     

乙型肝炎HBV～DNA与e系统关系的探讨

采用聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附(EusA)两法，对143例乙型肝炎患进行了血清HBV-DNA及乙肝病毒标志物检测，以探讨HBV-DNA与e系统的相关性，现将结果报告如下。     

医学生手机依赖与儿童期性虐待的相关关系

随着无线网络技术的发展,继网络成瘾之后,青少年手机依赖成为一个引人关注的心理问题.手机依赖症(mobile phone dependence)是指个体因为使用手机行为失控,导致生理、心理和社会功能明显受损的痴迷状态,主要表现为在没有手机时会出现失落感、抑郁、孤独感增加和焦躁感等不良情绪[1-2].一项研究显示国内大学生手机依赖发生率为17.0%[3].手机依赖者与网络成瘾者具有相似的心理特征,如抑郁[4]、孤独[5]以及消极的应付方式[6].研究表明,网络成瘾和儿童期虐待经历有关联[7-8].据此,手机依赖可能也与儿童期虐待有关,故本次研究旨在探讨医学生儿童期虐待和其手机依赖行为间相关关系.