体外培养恒河猴外周血单核巨噬细胞的研究

目的：建立一种简单、经济、高效地培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法。方法：用肝素钠抗凝管采集健康成年中国恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CELLBIND Surface的96孔（0.8×106个细胞/孔）或48孔培养板（3×106个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7天后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIVmac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果：在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（>85%）猴单核细胞能在24h内贴壁,体外分化5-7天后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度（4%,8%或10%）猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论：含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

家族性阿耳茨海默病SORL1基因SNP位点的筛选

目的:研究在家族性阿耳茨海默病(FAD)和无家族史健康人群中枢载脂蛋白E受体(SORL1)基因单核苷酸多态性(SNP)位点的筛选。方法:收集武汉地区具有家族史的阿耳茨海默病(AD)血样品41例,无家族史的健康人群50例,利用SNaPshot分型系统,针对SORL1基因5'端中8,9,10( rs668387,rs689...     

应用PCR—SSCP银染法检测结肠癌组织中P53基因突变

应用ＰＣＲ－单链构象多态分析银染技术分析了２１例结肠癌和正常结肠粘膜组织Ｐ５３基因第５－第八外显子。发现了９例的结肠癌组织出现了反映Ｐ５３基因突变的异常条带。     

板蓝根多糖对小鼠抗流感病毒感染的作用

目的研究板蓝根多糖对小鼠抗流感病毒感染能力的影响。方法将板蓝根多糖溶液腹腔注入流感病毒感染的模型小鼠,观察小鼠的生存时间,计算肺指数,测定小鼠血清中抗病毒IgG的变化及脾细胞IFN-γ的水平。结果注射板蓝根多糖的小鼠存活时间延长、存活率提高。与病毒对照组比较,肺指数明显降低,血清中抗体IgG的水平升高,脾脏细胞IFN-γ的水平上升。结论板蓝根多糖能促进小鼠非特异性免疫、增强体液的免疫功能,并参与了调节细胞的免疫功能,从而提高了小鼠抵抗流感病毒感染的能力。     

中药FESOL抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的实验研究

目的：研究中药FESOL抗HSV－Ⅱ的药效学。方法：用MTT法和小鼠阴道模型分别进行了体内和体外抗HSV－Ⅱ实验。结果：MTT法测得FESOL TC50为2.5mg.ml^-1,IC50为0.031mg.ml^-1，治疗指数为80．65。与ACV相比，抑制HSV－Ⅱ的作用无显著性差异。小鼠阴道模型研究结果，FESOL高剂量组（8．33、1．67g.kg.d^-1)均明显降低感染鼠的发病率，死亡率，延长期平均存活天数，延缓病变发展速度，减轻病变程度。结论：FESOL具有良好的抗HSV－Ⅱ药效学效果。     

无精和严重寡精症中无精子症因子基因的初步研究

目的：研究无精子症因子基因与无精症的关系。方法：利用聚合酶链反应对７４例原发无精和严重寡精患者进行ＹＲＲＭ基因的扩增检查，同时利用男性性别决定的ＳＲＹ基因片段作为内参照系统。结果：在检查的７４例病例中，共有４例的ＹＲＲＭ基因位点没有扩增信号。结论：提示这些个体带有ＹＲＲＭ的缺失异常，与无精所致的不育直接相关。     

生命泉膏滋抗小鼠阴道单纯疱疹病毒感染的研究

目的：研究中药生命泉膏滋（FESOL）抗小鼠阴道单纯疱疹病毒2型（HSV－2）感染的药效学作用。方法：以不同剂量FESOL作用于阴道感染HSV－2实验小鼠,观察用药后小鼠的发病率、死亡率和病变发展速度及程度。结果：FESOL高、中剂量组（8．33,1．67,0．34g/kg）能显著降低感染鼠的发病率、死亡率,同时显著减轻病变程度,减慢病变发展速度。结论：中药FESOL能有效抗小鼠阴道HSV－2感染。     

重症患者PICC置管后体位改变对IC-ECG定位中P/R振幅的影响

目的：探讨重症患者上臂置入PICC时，体位改变对IC-ECG中P/R振幅的影响。方法：选取2021年1月至2023年3月期间在本院重症医学科因病情需要置入PICC导管的105例患者，采取自身对照方法，心腔内电图下PICC导管尖端定位时，置管侧手臂外展90°为对照组，置管侧手臂内收身体两侧为观察组。心腔内电图出现正向最高P波后回撤导管，使P波略低于R波视为导管尖端到达上腔静脉最佳位置，观察患者平卧手臂摆放角度由外展90°转换内收身体两侧时，心腔内电图P/R振幅及导管留置长度。结果：对照组P/R振幅由80%变为负正双向波形，观察组P/R振幅由30%～50%增高至80%～100%,P波波幅明显增高、导管尖端平均向右心房方向移动2～3cm;两组数据差异有统计意义(P<0.001)。结论：心腔内电图定位PICC尖端位置的过程中，患者置管侧手臂内收于身体侧位时，P波振幅明显高于置管标准体位，手臂外展90°定位的P/R振幅为80%～100%时，应再拔出导管2～3cm,使P波振幅为R波振幅的30%～50%,以保证携带导管患者手臂平时处于内收于躯体侧体位时，导管始终处于安全位置。     

恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立

目的 建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞(monocyte-derived macrophage,MDM)的方法。方法 用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴(Macaca mulatta)全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CellBIND Surface的96孔(0.8×10⁶个细胞/孔)或48孔培养板(3×10⁶个细胞/孔)中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清(fetal calf serum,FCS)的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7 d后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体(CD14)抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素(LPS)刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒(SIVmac17E-Br、SIVmac251)和人-猴嵌合体艾滋病毒(SHIV KU-1)感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果 在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数(>85%)猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5～7 d后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度(4%,8%或10%)猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论 含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。