基于TLR4-IRF3-IFN通路的清热利湿活血方治疗HBV转基因小鼠抗HBV作用机制研究

目的:观察清热利湿活血方治疗HBV转基因小鼠抗乙肝病毒(HBV)及其机制作用。方法:HBV转基因小鼠随机分4组,苦参素组小鼠给予同体积含150mg/kg·d苦参素混悬液,清热利湿活血方组小鼠分别给予同体积含7、2g/kg·d混悬液,5周后,常规HE染色观察肝组织病理变化;ELISA法检测血清及肝组织中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg);ELISA法检测血清干扰素α(IFNα)、干扰素β(IFNβ);定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、Toll样受体4(TLR4)mRNA、干扰素调控因子3(IRF3)mRNA表达;Western bloting法检测肝组织TLR4、IRF3蛋白表达。结果:7g/kg·d清热利湿活血方可以减轻肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBsAg、HBVDNA水平;清热利湿活血方(7g/kg·d)显著增强小鼠TLR4mRNA、IRF3mRNA及蛋白表达;清热利湿活血方(7g/kg·d)可显著升高血清IFNα、IFNβ。结论:清热利湿活血方具有抗HBV作用,其机制与激活TLR4-IRF3-IFN信号通路有关。     

附子对免疫性肝损伤模型大鼠的影响及代谢组学研究

目的探讨附子对急性免疫性肝损伤动物模型的干预和保护作用。方法将50只SD大鼠随机分为5组：正常组10只,模型组10只（采用卡介苗联合脂多糖法建立免疫性肝损伤的大鼠模型）,低、中、高剂量治疗组各10只（治疗组采用附片免煎剂进行干预）。取大鼠血清观察ALT、AST、TBIL的改变情况,取肝组织进行病理组织学检查、代谢组学检测。结果各用药组均能明显降低免疫性肝损伤大鼠的ALT、AST、TBIL,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。病理组织学检查,各用药组均能减轻肝组织的损伤。代谢组学检测表明附子免煎剂能减轻肝损伤所造成的小分子代谢物的改变。结论中药附子免煎剂能够减轻免疫性肝损伤大鼠的肝损害,具有一定的保肝降酶作用。     

基于microRNAs调控的轻度慢性乙型肝炎炎症活动的分子机制研究

目的 研究从microRNAs角度揭示轻度慢性乙型肝炎炎症活动的分子机制.方法 将符合标准的病例分为轻度慢性乙型肝炎组与慢性HBV携带者组,借助Agilent Human microRNA 8×60 k微阵列芯片检测血浆中microRNAs表达谱,求得两组间的差异表达microRNAs谱(P＜0.05),借助microRNAs生物信息学分析软件预测其靶基因并对靶基因进行GO功能富集分析和pathway分析.结果 两组间的差异表达microRNAs共65条(P＜0.05),38条上调,27条下调;GO分析及pathway分析得到其功能主要涉及细胞增殖、生物黏附、生物合成过程的正/负调控、大分子生物合成过程中的正/负调控、蛋白氨基酸的磷酸化、RNA的生物合成过程、Wnt信号通路、MAPK信号通路、Notch信号传导途径、Hedgehog信号通路、T细胞受体信号通路、TGF-β信号通路、mTOR信号通路、趋化因子信号通路JAK-STAT信号通路、钙离子信号通路等.结论 轻度慢性乙型肝炎炎症活动受特异性microRNAs调控,其涉及多个生命过程及通路.     

黄虎方对HBV转基因小鼠病毒复制及TKB1-IRF7-IFNα/β通路的影响

目的 观察黄虎方(HH方)治疗HBV转基因小鼠抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)疗效及其作用机制。方法 HBV转基因小鼠随机分为4组,苦参素组小鼠给予含150mg/(kg·d)苦参素混悬液,高、低剂量HH方组小鼠分别给予含7g/(kg·d)、2g/(kg·d) HH混悬液,均为每日1次灌胃,共5周,Elisa法检测血清及肝组织中乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen, HBsAg),Elisa法检测血清干扰素α(interferon-α, IFNα)、干扰素β(interferon-β, IFNβ),定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA, HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1, TKB1)mRNA、干扰素调控因子7(interferon regulatory factor 7, IRF7) mRNA表达。Western Bloting检测肝组织中TKB1、IRF7蛋白表达。结果 高剂量HH方(7g/(kg·d))可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBsAg、HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P<0.01, P<0.05),与苦参素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量HH方显著增强小鼠TKB1 mRNA、IRF7 mRNA及蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.01, P<0.05)。高剂量HH方可显著升高血清IFNα、IFNβ,差异有统计学意义(P＜0.01, P＜0.05)。 结论 HH方具有一定抗HBV作用,推测可能与影响TKB1、IRF7的mRNA和蛋白表达进而促进IFNα /β分泌有关。     

损伤性肾匀浆体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞转分化效果及可能机制的研究

目的：利用损伤性肾匀浆体外模拟急性肾损伤的微环境,探讨骨髓间充质干细胞（BM SC ）诱导转分化及其可能机制。方法将体外培养的BM SC用10％大鼠缺血再灌注损伤肾匀浆上清液进行培养。7 d后从形态学改变、18型角蛋白（CK‐18）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态发生蛋白‐7（ BM P‐7）的相应表达水平。结果损伤肾匀浆诱导7 d后,骨髓间充质干细胞形态发生明显变化,并检测到CK‐18阳性表达;同时被诱导的HGF和BMP‐7表达水平明显升高。结论损伤肾匀浆可诱导BMSC部分向肾小管上皮样细胞转分化,其可能机制是BMSC可能以旁分泌的形式产生了 HGF和BMP‐7等“肾脏保护因子”。     

HH胶囊治疗HBV转基因小鼠的抗HBV机制分析

目的:观察HH胶囊的抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)疗效及作用机制。方法:采用大连依利特ODS-BP C18色谱柱研究HH胶囊的HPLC指纹图谱。HBV转基因小鼠随机分4组,苦参素组小鼠按150 mg·kg~(-1)·d~(-1)给予苦参素混悬液,高、低剂量HH胶囊组小鼠分别按7,2 g·kg~(-1)·d~(-1)给予HH混悬液,模型组给予等体积的生理盐水,5周后,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBs Ag),干扰素α(interferonα,IFN-α),干扰素β(interferonβ,IFN-β)及肝组织HBs Ag,常规苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链式方应(q PCR)法检测血清及肝组织乙肝病毒的脱氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBVDNA)。结果:标定14个特征峰构成HH胶囊的指纹图谱,其中1号峰为没食子酸,8号峰为柯里拉京,9号峰为虎杖苷,10号峰为鞣花酸,13号峰为甘草酸,14号峰为齐墩果酸。与模型组比较,高剂量HH胶囊可以明显降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBs Ag,HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P0.01),与苦参素组比较差异无统计学意义;高剂量HH胶囊可显著升高小鼠IFN-α,IFN-β,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论:HH胶囊具有确切的抗HBV作用,可能与升高IFN-α,IFN-β有关。     

扶正抗癌饮经验方防治成人急性髓系白血病化疗后骨髓抑制的临床研究

目的:观察扶正抗癌饮经验方防治成人急性髓系白血病化疗后骨髓抑制的临床效果。方法:选取2014年1月至2017年1月成都中医药大学附属医院收治的成人急性髓系白血病化疗后患者116例,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组58例,对照组采用标准DA方案诱导化疗;观察组在对照组基础上于化疗后加用自拟扶正抗癌饮经验方治疗。2组均以3周为1个周期,连续治疗3个周期。记录骨髓抑制的发生时间、恢复时间,统计骨髓抑制发生率,评价其发生程度,监测化疗后外周血象变化,评价治疗前后的生命质量,比较化疗后的不良反应。结果:观察组骨髓抑制的发生时间明显晚于对照组,而骨髓抑制恢复时间明显早于对照组(P 0. 05);观察组骨髓抑制发生率为17. 2%,明显低于对照组的48. 3%(P 0. 05);化疗后观察组WBC、PLT、Hb含量较对照组显著升高(P 0. 05);观察组其生命质量评分显著高于对照组(P 0. 05);观察组不良反应发生率为15. 5%,显著低于对照组的37. 9%(P 0. 05)。结论:扶正抗癌饮经验方有助于延缓骨髓抑制的发生时间,促进骨髓抑制的恢复,降低化疗后骨髓抑制发生率,减轻骨髓抑制的严重程度,提高生命质量,减少化疗后的不良反应,有一定的临床推广应用价值。     

基于microRNAs调控的慢性HBV感染的分子机制

目的:从microRNAs(miRNAs)调控角度揭示慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的分子机制.方法:将符合标准的病例分为慢性HBV感染者组(含慢性乙型肝炎及慢性HBV携带者)与正常组,借助Agilent Human miRNA 8×60k微阵列芯片检测血浆中miRNAs表达谱,求得两组间的差异表达miRNAs谱(P0.05),借助miRNA生物信息学分析软件预测其靶基因并对靶基因进行GO功能富集分析和Pathway分析.结果:两组间的差异表达miRNAs共69条(P0.05),28条上调,41条下调;GO分析及Pathway分析得到其功能主要涉及生物黏附、转录正/负调控、生物合成过程的正/负调控、氮化合物的代谢过程的正/负调控、蛋白质定位、蛋白氨基酸的磷酸化、Notch信号传导途径、细胞凋亡、Wnt信号通路、Hedgehog信号通路、T细胞受体信号通路、MAPK信号通路、转化生长因子b信号通路、B细胞受体信号通路、ErbB信号通路、p53信号通路等.结论:慢性HBV感染受特异性mi RNAs调控,其调控涉及多个生命过程和信号通路.     

复方叶下珠胶囊体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的研究

目的:观察复方叶下珠胶囊体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用北京麻鸭乙型肝炎病毒模型,用低、中、高不同剂量的复方叶下珠胶囊灌胃,治疗1周(T7)、2周(T14)及停药3d(P3)时,检测血清中DHBVDNA、DHBsAg和DHBeAg的变化。结果:与模型组对比,复方叶下珠胶囊高、中剂量组用药2周后,血清中DHBVDNA含量、DHBsAg和DHBeAg滴度水平显著降低。结论:复方叶下珠胶囊连续用药2周后具有较强的抗DHBV作用。     

基于microRNA调控的轻度慢性乙型肝炎发生的分子机制

目的从microRNA(miRNA)调控角度揭示轻度慢性乙型肝炎发病的分子机制。方法收集2013年7月-2014年2月成都市传染病医院门诊就诊的患者共16例,分为轻度慢性乙型肝炎组与正常组,借助Agilent Human miRNA 8×60 k微阵列芯片检测血浆中miRNA表达谱,求得两组间差异表达的miRNA谱,借助miRNA生物信息学分析软件预测其靶基因并对靶基因进行GO功能富集分析和pathway分析。两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析。结果两组间的差异表达miRNAs共54条(P值均0.05),30条上调,24条下调;其功能主要涉及细胞增殖、转录正/负调控、生物合成过程的正/负调控、蛋白质定位、Wnt受体信号通路、转录正/负调控、基因表达的正/负调控、酶联受体蛋白信号通路、蛋白氨基酸的磷酸化等生命过程。Pathway分析得到其主要涉及Wnt信号通路、Notch信号传导途径、Hedgehog信号通路、p53信号通路、B淋巴细胞受体信号通路等。结论轻度慢性乙型肝炎发生受到特异性miRNA调控,涉及多个生命过程及通路。