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目的探讨小鼠体外受精(IVF)冻融后用于Cas9注射的可行性。方法新鲜C57BL/6J小鼠卵子IVF后采用冻存管法(EFS20/40)冷冻原核胚(单细胞胚)和2细胞胚胎,次日复苏后培养。比较冻融原核胚和2细胞胚胎的回收率及成活率。选取部分冻融原核胚与新鲜原核胚同时进行Cas9和稀释液胞质注射并培养至2细胞,分别比较注射后的存活率及2细胞发育率。结果冻融后的B6小鼠原核胚的回收率为92.5%、成活率为92.8%,2细胞胚的回收率为90.5%、成活率95.8%,两组数据差异无显著性(P0.05)。新鲜原核胚Cas9注射后的存活率为92.7%,空白组注射组为97.5%,冻融原核胚Cas9注射后的存活率为82.6%,空白组为92%,冻融组Cas9注射与各组差异有显著性(P0.05),其它各组差异无显著性(P0.05)。注射后的2细胞胚发育率差异无显著性(P0.05)。结论冻融原核胚可用于Cas9显微注射。 相似文献
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氯吡格雷联合低分子肝素治疗不稳定型心绞痛临床观察 总被引:1,自引:0,他引:1
不稳定型心绞痛(UA)是冠心病的常见类型,它介于稳定型心绞痛和急性心肌梗死之间,是急性心肌梗死或心源性猝死的最主要原因。我院2010年1—10月采用氯吡格雷联合低分子肝素钙治疗UA取得一定效果,现报告如下。 相似文献
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目的克隆人胰腺癌相关易感基因HNF1α,并通过检测三种不同胰腺癌细胞系中HNF1α的表达,筛选出HNF1α低表达的胰腺癌细胞系,为进一步研究提供依据。方法提取Bx PC-3,PANC-1及SW-1990胰腺癌细胞系的总RNA,用RT-PCR方法扩增HNF1α基因,PCR产物及pc DNA3.1(+)经Eco R I/Xho I双酶切后,用T4 DNA连接酶连接,连接产物转化细菌后挑选克隆,进行测序鉴定。通过Real-time PCR及Western blot方法比较HNF1αm RNA及蛋白在不同胰腺癌细胞系中的表达量。结果克隆得到了1 914 bp的HNF1α基因c DNA序列,与已发表的HNF1α同源性为99%。Bx PC-3,PANC-1及SW-1990细胞HNF1αm RNA相对表达量分别为(6.52±1.11),(3.09±0.54)及1,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot法检测HNF1α蛋白表达水平显示,在SW-1990细胞中HNF1α蛋白有少量表达,而在PANC-1,Bx PC-3细胞系中HNF1α蛋白表达依次增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HNF1α表达水平与胰腺癌细胞分化程度呈明显正相关,HNF1αm RNA及蛋白在SW-1990细胞系中均呈低表达,因此该细胞系可作为良好的研究工具,为进一步将HNF1α转染该细胞系,以研究HNF1α对胰腺癌的抑癌作用提供依据。 相似文献
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慢性胃炎,祖国医学为胃脘痛。“胃痛”俗称“心口痛”。其病有虚、实、寒、热之辨,临床凡诊断慢性浅表性胃炎,其病多在食后发作,稍食即胀,不能多吃,这是与消化溃疡不同之处,其病多实证和虚中夹实。气病日久,可以入络,痛处固定不移,中脘部多有烧灼威舌苔多黄厚,故辨证多属热属瘀。 一、临床资料 选择符合下述标准患者,作为临床观察对象。凡是胃脘部之疼痛,按之痛重,嗳气、胀满,食则 相似文献
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