SHP-2抑制剂PHPS1对动脉粥样硬化斑块作用及其机制的研究

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2抑制剂PHPS1对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块易损性的作用及其机理,为研究动脉粥样硬化提供新思路.方法 16只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为对照组和PHPS 1组,给予西方膳食饲料16周,构建易损AS模型.取主动脉根部经福尔马林固定后制成切片,行Movat、天狼星红等染色法...     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2特异性抑制剂PHPS1通过促进泡沫细胞形成加速apoE-基因敲除小鼠早期动脉粥样硬化进展

目的 研究酪氨酸磷酸酶SHP-2 （Src Homology 2 Containing Protein Tyrosine Phosphatase 2,SHP-2）特异性抑制剂苯肼基吡唑啉酮磺酸盐1(phenylhydrazonopyrazolonesulfonate1,PHPS1)对apoE基因敲除小鼠（apoE-/-小鼠）动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的影响作用。 方法 1.25%胆固醇高脂饲料饲养apoE-/-小鼠28只4周构建早期AS模型,随机分为对照组和PHPS1组。观察降主动脉斑块大小和细胞成分,评估斑块内信号通路及清道夫受体(scavenger receptor,SR)蛋白及mRNA的含量变化情况。氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）和绿色荧光微球加或不加PHPS1干预骨髓来源的巨噬细胞（bone marrow-derived macrophage,BMDM）细胞16 h,观察BMDM内绿色荧光沉积情况。 结果 PHPS1组斑块内油红O面积、斑块大小、斑块内巨噬细胞含量比对照组显著增加,差异均有统计学意义（P＜0.01）。PHPS1组巨噬细胞内部绿色荧光强度比对照组显著增加,差异有统计学意义（P＜0.01）。PHPS1组白细胞分化抗原36（cluster of differentiation 36,CD36）和SR-A1的mRNA表达量比对照组显著升高,差异均有统计学意义（P＜0.01）。PHPS1组磷酸化细胞外信号调节酶（phosphorylated extracellular-regulated kinases,p-ERK）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B,p-AKT）蛋白含量比对照组显著升高,差异均有统计学意义（P＜0.01）。 结论 PHPS1主要通过激活细胞外信号调节酶及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路,影响SR的过表达从而增加了巨噬细胞对ox-LDL的吞噬能力最终促进了泡沫细胞的形成、促进AS进展。     

CysC、α1-MG和β2-MG在糖尿病早期肾损伤诊断中的价值

目的 探讨血清胱抑素C（CysC）、α1微球蛋白（α1-MG）和β2微球蛋白（β2-MG）多指标检测在糖尿病早期肾损伤中的诊断价值.方法 选取糖尿病（DM）患者188例和健康对照者90例,检测各组血CysC、α1-MG、β2-MG、BUN和Cr的含量并作统计分析.结果 单纯DM组血清CysC、α1-MG水平较健康对照组明显升高（P〈0.05）,但两组β2-MG、BUN和Cr水平无明显差异;早期DN组血清CysC、α1-MG和β2-MG水平较单纯DM组显著升高（P〈0.01）,但两组血清BUN、Cr水平无明显差异;188例糖尿病患者血清 CysC、α1-MG和β2-MG均与BUN、Cr水平呈正相关;早期DN组中3个指标的异常率较单纯DM组显著升高;3个指标联合检测早期肾损伤的异常率较单指标检测明显升高;用ROC曲线进行诊断效能评价,以CysC最优.结论 血清CysC、α1-MG和β2-MG联合检测可发现糖尿病病程中的早期肾损伤,有重要的临床应用价值.     

膀胱癌组织中高表达的MTA2 促进膀胱癌细胞T24 的恶性生物学行为

［摘要］ 目的：分析肿瘤转移相关蛋白（MTA2）在人膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞系T24 恶性生物学行为的影响,探讨MTA2 对膀胱癌进展中的作用。方法：收集河北省人民医院2012 年12 月至2014 年12 月收治的62 例膀胱癌患者癌组织和28 例正常膀胱组织（取自膀胱炎患者,病理学诊断为正常组织）标本,通过免疫组织化学染色检测膀胱癌和正常膀胱组织中MTA2 的表达水平;分析MTA2 表达水平与患者临床病理特征的相关性。构建稳定高表达MTA2 的膀胱癌T24 细胞系,通过MTS、克隆形成、划痕愈合和Transwell 实验检测MTA2 对膀胱癌T24 细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响。结果：与正常膀胱组织相比,膀胱癌组织中MTA2 呈明显高表达（P<0.01）;MTA2 的高表达状态与膀胱癌患者的性别、年龄、肿瘤体积无关（P>0.05）,而与患者更高的TNM分期、肿瘤的组织学分级、淋巴浸润和转移有关（均P<0.05）。在膀胱癌T24 细胞系中过表达MTA2 后,细胞的增殖活性明显升高（P<0.05）,克隆形成、划痕愈合、迁移和侵袭能力均明显增强（均P<0.01）。结论：MTA2 在人膀胱癌组织中表达上调,能够促进T24 细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭等恶性生物学行为。     

综合性分析miR-224在肝癌中的表达及其生物学作用

目的： 分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织和血浆中的表达水平及其与临床病理特征、诊断和预后之间的相关性,并进一步通过生物信息学方法和体外实验分析其在肝癌发生发展中的作用机制。方法： 利用基因表达数据库（Gene Expression Omnibus,GEO）中大样本数据分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织及正常组织中的表达水平。采用qPCR法检测2017年1月至2020年1月间于河北省人民医院手术切除的80例临床肝癌患者肿瘤组织和对应癌旁组织中miR-224的表达水平,检测miR-224在30例肝癌患者血浆中的表达水平。利用Kaplan-Meier plotter数据库分析miR-224的表达水平与肝癌患者的总生存时间之间的相关性。利用生物信息学手段分析miR-224所参与的生物学过程和信号通路。向肝癌HepG2细胞转染miR-224 inhibitor,采用克隆形成实验、Transwell小室实验、qPCR和WB法分别检测敲低miR-224表达对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭能力以及EMT相关分子表达水平的影响。结果： GEO数据库分析结果显示,miR-224在肝癌组织中的表达水平显著高于正常组织。临床标本验证结果表明,miR-224在肝癌患者肿瘤组织和血浆中的表达水平显著高于对应的癌旁组织和健康人血浆（均P<0.01）。miR-224的表达水平与肝癌患者的TNM分期、淋巴结转移状态和肿瘤大小显著相关（P<0.05或P<0.01）。ROC分析发现,miR-224在肝癌诊断方面具有较强的能力,且miR-224的表达水平升高与肝癌患者的预后不良显著相关（P<0.05）。功能富集分析发现,miR-224主要参与mTOR信号通路、AGE-RAGE信号通路、Rap1信号通路、Ras信号通路、ErbB信号通路、HIF-1信号通路以及p53信号通路等肿瘤发生发展相关的信号通路。敲低miR-224可显著抑制HepG2细胞的克隆形成和侵袭,影响EMT相关标志物的表达（P<0.05或P<0.01）。结论： miR-224在肝癌组织和血浆中显著高表达,且与肝癌患者的预后不良显著相关,敲低miR-224表达可抑制肝癌HepG2细胞的克隆形成、侵袭和EMT进程。     

多重PCR-毛细管电泳法的应用及HPV感染亚型分布特征分析

目的分析河北省石家庄地区人乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染特征以及HPV亚型分布情况, 探讨多重PCR-毛细管电泳片段分析法的应用评估。方法采用横断面调查研究, 2022年5至8月期间纳入河北省人民医院434例女性(年龄范围17～74岁, 就诊者260例、查体者174例)进行横断面调查, 应用多重PCR-毛细管电泳片段分析法进行HPV分型检测。以多重荧光定量PCR试剂盒作为参考, 采用卡方检验分析多重PCR-毛细管电泳片段分析法的诊断效果, Kappa值分析其一致性。结果总HPV感染率为45.85%(199/434), 其中高危型HPV(HR-HPV)阳性率为35.48%(154/434)、低危型HPV(LR-HPV)3.92%(17/434)、HR-HPV和LR-HPV混合感染6.45%(28/434)、单一型别感染率27.88%(121/434)和多型别17.97%(78/434)。HPV52(9.68%, 42/434)、HPV16(6.91%, 30/434)、HPV58(6.91%, 30/434)为常见HPV亚型。查体者阳性率为45.4...