自噬参与氧糖剥夺对N2a细胞的损伤

自噬在脑缺血中的作用目前没有统一定论。本文主要是通过建立氧糖剥夺(OGD)模型来模拟脑缺血的过程从而探讨自噬在脑缺血中的作用。在小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)经过OGD处理后,检测处理前后自噬相关蛋白、细胞活力以及乳酸脱氢酶释放率的改变。结果发现在OGD处理后,N2a细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白表达量均增高,而细胞活力明显下降;与OGD组相比,使用3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬后,N2a细胞乳酸脱氢酶释放率下降。本研究表明在脑缺血过程中自噬被激活,但自噬的激活可能对神经细胞是起损伤性作用的。     

老年脑梗死患者急性期血压与预后的关系分析

目的：分析老年部分前循环脑梗死（partial anterior circulation infarct,PACI）患者急性期血压变化与远期预后的关系.方法：2011年1月-12月上海市浦东新区周浦医院收治80例老年PACI患者,入院后监测血压,并于入院时、发病14 d及3个月时进行美国国立卫生研究院卒中量表评分（National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS）及改良Bathel指数（modified Barthel index,MBI）测评,分析血压变化与预后的关系.结果：80例患者中,完成3个月随访者68例,失访12例.发病时58例（85.3％）患者出现血压升高,7d内部分患者血压有自然下降趋势.3个月时7d内收缩压下降幅度10％～20％组,5％～10％组和≥20％组的NIHSS评分及MBI差异有统计学意义;而7d内舒张压下降幅度10％～20％组,5～10％组和≥20％组比较,差异无统计学意义.结论：老年PACI患者急性期收缩压变化幅度与远期预后有关.     

Beclin1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对N2a细胞增殖的影响

目的构建抑制自噬基因Beclin 1 shRNA慢病毒载体,建立Beclin 1基因稳定干扰的N2a细胞株,探讨抑制Beclin 1对N2a细胞增殖的影响。方法根据小鼠Beclin 1基因mRNA序列,设计4个Beclin 1靶点并构建shRNA慢病毒质粒。构建好的Beclin 1 shRNA质粒与包装质粒psPAX2及包膜质粒pMD2.G共转染293FT细胞后得到病毒颗粒,将产生的病毒颗粒感染N2a细胞。通过荧光定量PCR和Western blot检测感染的N2a细胞中自噬基因Beclin 1 mRNA及蛋白表达水平,比较shRNA的干扰效率。利用CCK8法检测干扰Beclin 1表达对N2a细胞增殖的影响。结果成功构建了表达Beclin 1 shRNA的慢病毒载体。在稳定感染Beclin 1 shRNA慢病毒载体的N2a细胞中,Beclin 1表达显著降低。抑制Beclin 1表达有促进N2a细胞增殖的趋势,但差异无统计学意义。结论成功构建了自噬基因Beclin 1 shRNA慢病毒表达载体,可显著抑制N2a细胞中Beclin 1表达。抑制Beclin 1表达有可能促进N2a细胞的增殖。