化疗对结肠癌Th1和Th2类细胞因子基因表达的影响及意义

目的探讨结肠癌患者体内Th1和Th2类细胞因子的基因表达水平及化疗对其表达的影响。方法收集67例结肠癌患者、35例正常人和30例结肠息肉患者血清。采用RT-PCR技术,检测3组及结肠癌组化疗后外周血单个核细胞(PBMC)Th1和Th2类细胞因子mRNA表达水平。结果正常对照及结肠息肉组Th1和Th2类细胞因子基因表达呈阴性或基本不表达。结肠癌组IL-4、IL-6、IL-10mRNA表达水平显著高于正常对照及结肠息肉组(P<0.05),且与结肠癌的分化程度及临床分期相关(P<0.05);IFN-γ无阳性表达(0/67),IL-2则仅有3例阳性表达,其表达与结肠癌的分化程度及临床分期无相关性(P>0.05)。化疗后Th1类细胞因子表达增强,Th2类细胞因子的表达则减弱(P<0.05)。结论结肠癌患者Th1和Th2类细胞因子表达失衡,细胞免疫受抑,化疗可使结肠癌患者Th2类细胞因子的强势表达向Th1类逆转。     

微小RNA-27 a对黑色素瘤WM239细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨微小RNA-27a（ miR-27a）模拟物和抑制物转染黑色素瘤WM239细胞后对细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-27a模拟物、抑制物及其阴性对照转染WM239细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测相应的微小RNA,四甲基偶氮唑盐（ MTT）法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果细胞转染效率为80%~90%。转染miR-27a模拟物后,细胞内miR-27a表达量明显上升（2-△△CT值为26.98±0.01）,与正常对照组相比差异有统计学意义（ t＝－1123.67,P＝0.00）;转染miR-27a抑制物后,细胞中miR-27a的表达量下降（2-△△CT值为0.96±0.02）,与正常对照组相比差异无统计学意义（t＝4.04,P＝0.06）。转染miR-27a模拟物后,细胞增殖受到明显抑制,与正常对照组相比差异具有统计学意义[72 h吸光度（0.45±0.02）∶（0.72±0.01）,F＝129.56,P﹤0.05]。miR-27a模拟物组G0-G1期的细胞比例升高[（74.83±1.46）∶（63.73±1.25）,F＝30.33,P﹤0.05],S期和G2-M期细胞比例减少[（21.33±1.75）∶（27.50±1.25）,F＝14.98,P﹤0.05;（3.90±1.31）∶（8.80±2.10）,F＝3.66,P﹤0.05];模拟物组细胞凋亡率与正常对照组相比明显增加[（29.67±0.91）%∶（1.44±0.85）%, F＝530.90,P﹤0.01];而抑制物组对细胞周期和凋亡无明显作用。结论 miR-27a抑制黑色素瘤细胞增殖,具有抑瘤作用,这与其促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0-G1期相关。     

Toll样受体与癌症研究进展

Toll-like receptor (TLR) is an important pattern recognition receptor (PRR) which participates in innate immunity and regulates adaptive immunity. TLR can be expressed in immune cells and malignant tumors recognize conservative molecular structure, mediate response of inflammation, tissue injury and repair, which plays an important role in the process of tumor. Research results about some molecules and signal pathways of TLR demonstrate that it can act anti or pro-tumor dual functions, which has an extensive prospects in prevention and treatment of tumor.     

脑心通对实验性动脉硬化兔血管MCP-1的基因影响的研究

目的探讨脑心通对动脉粥样硬化(AS)的防治作用及其可能机制.方法通过高脂饮食建立兔AS模型,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测腹主动脉单核细胞趋化因子(MCP-1)mRNA的表达.结果脑心通可降低主动脉MCP-1 mRNA的表达,降低MCP-1的表达水平,减少泡沫细胞的形成.结论脑心通对AS的发生发展可起预防和治疗作用.     

检测IL—6的ELISA试剂盒的研制

建立了检测白细胞介素６（ＩＬ－６）的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。通过初步应用，检测血清和培养上清，结果表明，该方法特异性强，敏感度高，重复性好，可用于临床检验及基础医学研究。     

单纯疱疹病毒2型抗原DNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中表达重组单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原。方法：用PCR方法从单纯疱疹病毒中扩增HSV-2DNA片段，约500bp，克隆到pMD18T载体并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制酶EcoRI和BamHI消化pMD18T／HSV-2重组质粒，分离HSV-2片段，并插入质粒表达载体pBV220的相应限制酶位点，酶谱分析鉴定重组表达载体pBV220／HSV-2。转化菌株经42℃诱导，用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果：PCR扩增的DNA片段与HSV-2的目的片段大小一致。重组质粒pMD18T／HSV-2的DNA序列分析显示克隆的DNA序列与文献报道的HSV-2 DNA序列一致。SDS—PAGE表明重组蛋白相对分子量为18000，表达量达菌体总蛋白的20％左右，Western blot分析显示重组蛋白能特异地与抗HSV-2抗体结合。结论：已成功构建了表达具有功能的重组HSV-2抗原的工程菌株。     

结核杆菌Ag85B DNA疫苗的制备及其免疫效应初探

将结核杆菌抗原Ａｇ85Ｂ基因克隆到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ3中 ,构建成重组ｐｃＤＮＡ3 Ａｇ85Ｂ ,作为抗结核的ＤＮＡ疫苗 ,观察其对小鼠免疫应答的能力 ,为进一步研制抗结核疫苗提供依据。1 结核杆菌抗原Ａｇ85Ｂ真核表达载体的构建及在Ｃｏｓ 7细胞中的瞬时表达 :由本室构建的重组质粒ｐＵＣ1 8 Ａｇ85Ｂ ,经ＥｃｏＲⅠ /ＳａｌⅠ酶切 ,获得 860ｂｐＤＮＡ片段 ,插入经ＥｃｏＲⅠ /ＸｈｏⅠ酶切的载体ｐｃＤＮＡ3中 ,用ＨｉｎｄⅢ和ＸｈａⅠ酶切分析鉴定阳性克隆 ,获得表达载体ｐｃＤＮＡ3 Ａｇ85Ｂ。用 5μｇ纯化的重组质粒ｐｃＤＮ…     

胃癌组织Wnt10b的表达及意义

目的：检测胃癌及癌旁组织中 Wnt10b 的表达,探讨其与临床病理参数的关系。方法收集25例胃癌患者手术切除的癌组织及对应的癌旁组织,用实时荧光定量 PCR检测 Wnt10b mRNA的表达,Western-blot技术检测 Wnt10b蛋白的表达,分析 Wnt10b mRNA在胃癌组织中的表达与临床病理参数的关系。结果胃癌组织中 Wnt10b mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁组织（P〈0.001）,胃癌组织中 Wnt10b mRNA 表达阳性率与肿瘤远处转移相关（P〈0.05）,但与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、分化程度和浸润深度无关。结论 Wnt10b在胃癌组织中呈活化状态,可能参与胃癌的发生发展。     

趋化因子受体4与肿瘤

趋化因子受体4（CXCR4）属于G蛋白耦联受体超家族,具有趋化免疫细胞、维持免疫细胞的动态平衡等生物学作用。CXCR4表达于多种类型的组织和细胞,在多种肿瘤及肿瘤的不同阶段,CXCR4的表达都明显高于正常组织。CXCR4与肿瘤细胞的增殖、黏附、侵袭和转移有关,在肿瘤的进展中发挥重要作用。