大鼠肝与肺及人胎肝与肺微粒体酶对苯并(a)芘代谢的研究

苯并(a)芘[B(a)P]是一种致癌性多环芳烃,本文对大鼠肝、肺及人胎肝、肺微粒体酶在体外对B(a)P的代谢进行了研究,通过差速离心法获得的微粒体酶与B(a)P在37℃中温育1h。经有机溶剂提取的代谢产物用反相高压液相分析,结果表明各种组织中均有六种代谢产物可被检测到。其中3种为二氢二醇苯并(a)芘(9,10-diol-B aP;7,8-diol-B aP;4,5-diol-Ba P),2种羟基苯并(a)芘(9-OH-B aP;3-OH-B aP)以及1种醌基苯并(a)芘(quinone-B aP)。在二氢二醇苯并(a)芘中,7,8-diol-B aP易于被激活成能与DNA形成共价结合的环氧化物苯并(a)芘,说明除肝脏外,人肺组织也能直接代谢激活苯并(a)芘。     

反式—BPDE诱发人胎气管上皮细胞H—ras癌基因点突变的研究

用苯并[a]芘的代谢物反式-BPDE,作用于6例体外培养人胎气管上皮细胞,2至6周后,用PCR结合限制性内切酸酶切片段多态性分析法,检测H-ras癌基因12位点密码子的点突变情况。结果显示,经反式-BPDE处理的气管上皮细胞,都有H-ras癌基因第12位点密码子的点突变,其中部分细胞还同时伴有起始密码子上游24bp处的另一个CCGG序列的点突变,而这些细胞都未出现典型的转化细胞的形态特征的改变。提示癌基因的点突变早于细胞形态学的改变。     

BaP代谢物诱发人气管上皮细胞的程序外DNA合成和微核形成

本实验研究了四种Bap代谢物对人气管上皮细胞的DNA修合合成和微核形式,结果表明,所研究的Bap的四种代谢物(反式7,8-diol Bap,顺式7,8-diol Bap,3-OH Bap和9-OH BaP)均可诱发人气管上皮细胞的UOS,有剂量反应关系,其中反式7,8-diol Bap的作用最强,与动物实验中     

BDT滤嘴对香烟烟雾凝聚物诱发微核率的降低作用

用双核微核法测定香烟烟雾凝聚物对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３和ＣＨＬ细胞的致微核作用，结果发现香烟烟雾凝聚物可使两种细胞的微核率升高，不需Ｓ９的活化，比较不同滤嘴对香烟烟雾凝聚物中诱变物质的清除效果，发现普通滤嘴不能有效地降低微核率，而ＢＤＴ滤嘴则能使微核率降低了一半左右。     

体外双核细胞微核试验的应用研究

本实验用双核细胞微核试验(简称CB徽核试验)检测不同类型诱变剂对体外培养细胞微核率的影响。实验筛选了9株体外培养细胞,发现其中以BALB/c-3T3和CHL细胞的实验效果较好。丝裂霉素、硫酸镍、苯并[a]芘和香烟烟雾凝聚物等不同类型的诱变剂能直接或间接诱使细胞微核的形成。实验显示BALB/c—3T3细胞有部分代谢活化苯并[a]芘能力,CHL细胞则可能缺乏这种活性。实验还表明CB微核试验的稳定性和灵敏度都高于普通微核法,适用于检测多种类型的环境诱变剂的遗传损伤作用。     

过滤前后香烟烟雾凝聚物的致微核作用

用双核细胞微核法测定了香烟烟雾凝聚物对BALB/C3T3细胞微核率的影响,并用此指标研究了不同滤咀对香烟烟雾中诱变物质的清除效果。结果发现,不管加与不加S_9,香烟烟雾凝聚物诱发的微核率基本一致,S_9本身对微核率并无影响。用未     

人肺癌组织中C—Ha—ras,C—myc和C—sis基因的扩增

用同位素α－＾３２ＰｄＣＴＰ标记癌基因Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ，Ｃ－ｍｙｃ和Ｖ－ｓｉｓ基因片段，通过点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法检测１７例鳞癌，９例腺癌６例其它类肺癌组织和６例非肺癌组织中Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ，Ｃ－ｍｙｃ和Ｃ－ｓｉｓ基因扩增的情况，结果发现：４６．８％（１５／３２）的肺癌组织有Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因扩增，其中１０例（５８．８％）鳞癌，３例腺癌（３３．３％）出现Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因扩增，２５％（     

人肺癌组织中C-Ha-ras,C-myc和C-sis基因扩增的研究

用同位素α－P32dCTP标记癌基因C－Ha－ras，c－myc和V－sis基因片段，通过点杂交和Southern杂交法检测17例鳞癌、9例腺癌、3例其它类型肺癌组织和9例非肺癌组织中C－Ha－ras，C－myc和C－sis基因扩增的情况。结果发现：在所检测的29例肺癌样品中，10例（58．8％）鳞癌，3例腺癌（33．3％）和2例其它类型癌有C－Ha－ras基因扩增，4例（23．5％）鳞癌，3例（33．3％）腺癌出现C－myc基因扩增，4例（23．5％）鳞癌，1例（11．1％）腺癌和1例其它类型癌有C－sis基因扩增。同时我们也发现有5例肺癌组织（4例鳞癌和11例腺癌）出现两种癌基因的扩增。上述结果提示：C－Ha－ras，C－myc和C－sis基因的扩增与肺癌的发生有密切关系，特别是C－Ha－ras基因扩增在肺鳞癌的形成过程中可能起着重要作用。同时也提示：肺癌的发生与两件癌基因的扩增可能有一定关系。     

Anti BPDE诱发人气管上皮细胞H-ras癌基因点突变的初步研究

本实验用5月龄引产胎儿的体外培养气管上皮细胞,经7,8,9,10-四氢-7,8-二羟-9,10-环氧苯并花(简称Anti BPDE)染毒三周后,用PCR方法扩增细胞中含有H-ras癌基因12位点密码子的DNA片段,经HpaII限制性内切酶酶切,用聚丙烯酰氨凝胶电泳方法分析点突变情况。结果显示,经Anti BPDE处理的人气管上皮细胞,未发     

体外细胞双核微核试验的应用研究

本实验用双核细胞研究不同类型诱变剂对多种体外培养细胞株微核率的影响。共筛选了BALB/C-3T3、CHL、6S3、NIH3T3,Rat-1、V79、CHO、HEP2和人胚肺成纤维细胞等九株细胞,其中以BALB/C-3T3、CHL细胞的实验效果较好。经不同浓度的丝裂霉素和硫酸镍作用的CHL细胞微核率明显升高,有剂量反应关系。用苯并[a]芘