基于创新能力培养的研究生"高级生物化学与分子生物学技术"课程体系的构建

研究生教育是培养高层次人才的主要途径,面对近年来不断扩大的研究生队伍,如何提高培养质量是近年研究生教育工作的重点。研究生的培养质量,主要是看毕业生能否为经济建设、科学进步发展做出应有的贡献。产生这种贡献的大小与研究生具有的创新精神和创新能力密切相关^[1],创新能力是衡量研究生教育质量的重要指标,     

四种抑制剂对人白细胞脂加氧酶的抑制作用

用无色孔雀绿的方法测定了几种抑制剂对人白细胞脂加氧酶的抑制作用。其中,消炎痛对脂加氧酶无抑制作用,NDGA、槲皮素、黄芩甙的 IC_(50)分别为1.8μmol/L,2.86 μmol/L 和1.8 μg/ml     

基于创新能力培养的研究生“高级生物化学与分子生物学技术”课程体系的构建

研究生教育是培养高层次人才的主要途径,面对近年来不断扩大的研究生队伍,如何提高培养质量是近年研究生教育工作的重点。研究生的培养质量,主要是看毕业生能否为经济建设、科学进步发展做出应有的贡献。产生这种贡献的大小与研究生具有的创新精神和创新能力密切相关^[1],创新能力是衡量研究生教育质量的重要指标,     

人白细胞脂加氧酶同工酶的分析及黄芩甙对其抑制作用

目的：研究人白细胞脂加氧酶同工酶及黄芩甙对其抑制作用。方法：从人白细胞中提取脂加氧酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳后，凝胶与底物反应３０ｍｉｎ，加入０．１％ＤＢＨ过夜。用光密度计扫描。结果：凝胶上出现“快带”和“慢带”。黄芩甙对脂加氧酶有抑制作用，但对“慢带”的抑制作用强。结论：黄芩甙对人白细胞中两种脂加氧酶同工酶的抑制程度不同。     

人白细胞脂加氧酶同工酶的分析及黄芩甙对其抑制作用

目的：研究人白细胞脂加氧酶同工酶及黄芩甙对其抑制作用。方法：从人白细胞中提取脂加氧酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳后，凝胶与底物反应３０ｍｉｎ，加入０．１％ＤＢＨ过夜。用光密度计扫描。结果：凝胶上出现“快带”和“慢带”。黄芩甙对脂加氧酶有抑制作用，但对“慢带”的抑制作用强。结论：黄芩甙对人白细胞中两种脂加氧酶同工酶的抑制程度不同。     

果蝇神经特异性拼接因子Dxl6N变体在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达

目的：表达与纯化果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6N端变体。方法：用PCR方法扩增得到Dxl6N端基因片段，经酶切亚克隆至pGEX-4T-1原核表达栽体。在大肠杆菌BL21（DE3）中与GST融合表达。并用谷胱甘肽-sepharose4B亲和层析柱纯化融合蛋白。结果：表达产物以可溶形式经亲和层析柱纯化后获得相对分子质量约为37000的融合蛋白。结论：成功克隆、表达并纯化了果蝇神经特异性拼接因子Dxl6N端变体与GST的融合蛋白。     

果蝇S2细胞中高表达荧光素酶重组质粒的构建及活性测定

目的：构建果蝇S2细胞中高表达荧光素酶的重组质粒。方法：用PCR方法扩增得到pac启动子的基因片段，经酶切亚克隆至pGL3—Basic的真核表达载体中，转染果蝇S2细胞，通过测定荧光素酶和β-半乳糖苷酶的活性计算荧光素酶的相对活性。结果：构建的重组质粒在S2细胞中荧光素酶的相对活性较pGL3—Control中增加了2．7万倍。结论：成功构建了果蝇S2细胞中高表达荧光素酶的重组质粒pGL3—pac。     

非小细胞肺癌中PTB对肿瘤抑制基因ceacam1选择性拼接的调控研究

目的：研究在非小细胞肺癌及癌旁组织中ceacam1通过选择性拼接而产生的两种转录产物的调控机制。方法：将用PCR方法获得ceacam1基因中从内含子5至外显子8长1606bpDNA片段插入到真核表达载体pCMV中，构建成ceacam1迷你基因模型并与ptb基因共转染，用PCR法鉴定转染后的产物变化；根据外显子7序列设计的探针GAE（16-nt）及ACE（8-nt）进行凝胶阻滞分析实验。分离与探针结合的蛋白并进行质谱分析。结果：ptb3种cDNA与ceacam1迷你基因共转染后，CEACAMIL表达水平下降，其中ptb4对迷你基因的表达产物影响最大。仅转染迷你基因的细胞中ceacam1L在两条带中所占比例为76．7％，而与ptb3种重组质粒共转染后，比例分别下降至58．3％、64．8％和54．0％。凝胶阻滞实验表明，探针GAE能与核蛋白结合，而ACE基本不能与核蛋白结合，与GAE结合的蛋白经质谱分析为PTB。结论：PTB过表达与ceacam1低表达有明显的相关性，拼接因子PTB参与ceacam1的选择性拼接。     

果蝇神经特异性拼接因子Dxl6变体在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达

目的:表达与纯化果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6 N端变体.方法:用PCR方法扩增得到Dxl6 N端基因片段,经酶切亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中与GST融合表达,并用谷胱甘肽-sepharose4B亲和层析柱纯化融合蛋白.结果:表达产物以可溶形式经亲和层析柱纯化后获得相对分子质量约为37 000的融合蛋白.结论:成功克隆、表达并纯化了果蝇神经特异性拼接因子Dxl6N端变体与GST的融合蛋白.