从肺泡灌洗液分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药特征及毒力基因研究

目的 了解临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药机制及毒力基因分布情况.方法 通过PCR方法检测CRKP菌株碳青霉烯酶基因和毒力基因,对扩增产物进行测序比对.结果 在CRKP中检到22株(91.7％)携带blaKPc,1株(4.2％)携带blaIMP,23株(95.8％)携带entB,19株(79.2％)携...     

转化缺陷的R6菌株经黏膜免疫小鼠可抵抗肺炎链球菌有毒株感染

摘要：目的：研制一种无转化能力的肺炎链球菌（S.pn）减毒株R6ΔcomE,评价其作为S.pn活菌疫苗的保护效果。 方法：构建comE基因缺陷的R6ΔcomE株,评价R6、R6ΔcomE株的转化能力及其毒力;用R6、R6ΔcomE株分别对BALB/c小鼠进行黏膜免疫,用ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体效价和脾细胞上清中IFN-γ、IL-4及IL-17A水平;用D39株经鼻腔黏膜感染免疫小鼠,观察生存时间和生存率。 结果：成功构建comE缺陷的R6ΔcomE株。体外转化实验中R6株转化菌量中位数为1 970 CFU/mL,体内转化实验中每只小鼠34 CFU,体内外实验中R6ΔcomE株转化菌量均为0;感染1×10⁸ CFU D39株的小鼠于3 d内全部死亡,而感染相同剂量R6、R6ΔcomE株的小鼠均存活＞21 d,且均于感染后72 h内清除细菌。R6、R6ΔcomE株黏膜免疫小鼠后,血清抗体滴度的中位数（P₂₅,P₇₅）分别达1.0×10⁶（6.4×10⁵,1.8×10⁶）、1.2×10⁶（8.1×10⁵, 1.6×10⁶）,与相应阴性对照组比较差异有统计学意义（P均＜0.01）;与相应阴性对照组比较,R6、R6ΔcomE株免疫组IL-4、IL-17A均升高（P均＜0.01）,而IFN-γ水平差异无统计学意义（P＞0.05）。黏膜免疫R6、R6ΔcomE株的BALB/c小鼠可抵抗D39株感染,生存率分别为60%和70%。 结论: R6ΔcomE株毒力弱,无转化能力,可诱导对S.pn感染的免疫保护,是一株安全有潜力的S.pn减毒活菌疫苗。     

耐多药结核分枝杆菌对喹诺酮药物的耐药特性及分子机制的研究

目的研究喹诺酮药物对临床分离耐多药结核分枝杆菌（MDRTB）的最小抑菌浓度（MIC）及耐药分子机制,探索使用喹诺酮类药物治疗MDRTB感染的可行性。方法采用微量孔AlamarBlue显色法检测氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星对MDRTB的MIC;PCR方法扩增MDRTB的gyr基因并测序。结果40株氧氟沙星敏感MDRTB对氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星均敏感;未检测到gyr基因发生突变。40株氧氟沙星耐药MDRTB对氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星敏感率分别为0%、30.0%、42.5%、40.0%;检测到33株（82.5%）gyrA基因和2株（5%）gyrB基因发生突变,突变类型为Ala90Val、Ser91Pro、Asp94Gly、Asp94His、Asp94Asn、Asp94Ala、Asn477Thr和Thr478Asn。结论MDRTB对喹诺酮类药物的耐药机制以gyrA基因Ala90Val、Ser91Pro、Asp94Gly突变类型为主;莫西沙星是治疗氧氟沙星低水平耐药MDRTB的首选方案。     

荧光PCR法检测石蜡标本中结核分枝杆菌的流程改进

<正>结核分枝杆菌的检测对于有肉芽肿性炎特征组织病变的病理诊断具有重要的参考意义。目前,病理科常用的检测方法有基于细菌学的抗酸染色、金胺O荧光染色,基于分子病理学的PCR、Xpert MTB/RIF检测^[1-2]等。其中荧光PCR技术具有敏感性高、特异性好、速度快,且价格实惠的特点,被广泛应用于大中型医院病理科福尔马林固定石蜡包埋（formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE）组织的结核分枝杆菌的检测中^[3-6]。由于石蜡组织标本中的病菌分布不稳定,     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌肺炎耐药性及危险因素分析

目的探讨耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(IMPRPAE)肺炎耐药性和危险因素,为防治耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌肺炎提供理论依据。方法收集2016年1月-12月本院82例耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(IMPRPAE)住院感染肺炎患者资料和菌株为实验组、82例碳青霉烯类敏感铜绿假单胞菌(IMPSPAE)住院感染肺炎患者资料和菌株为对照组,用Carba NP方法检测碳青霉烯酶,分析危险因素和耐药性。结果实验组对抗生素的耐药性显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。ICU入住、呼吸机使用、气管插管、碳青霉烯类药物使用、年龄因素、住院天数、抗生素使用时间2组比较差异有统计学意义(P0.05);呼吸机使用、气管插管、碳青霉烯类药物使用、住院天数(≥14 d)、ICU入住是IMPRPAE肺炎的独立危险因素。结论 IMPRPAE耐药严重,因此,合理使用抗菌药物、减少呼吸机使用、减少气管插管、减少碳青霉烯类药物使用是预防和控制IMPRPAE肺炎的关键。