一种以小鼠精子为主导的综合性保种体系

目的 利用活体保种、精子冷冻技术及辅助生殖技术建立一套安全的综合性保种体系.方法 以单侧睾丸摘除方法获得ICR、BDF1、C57BL/6J和GFP四种小鼠的附睾精子进行冷冻保存实验,术后恢复的公鼠继续用于自然繁育.如果无法自然繁育,则将冻融精子用于体外受精(IVF).如果冻融精子仍无法受精获得后代,则需要借助卵胞质内单精子注射技术(ICSI)进行胚胎构建,胚胎移植,直至获得后代.结果 单侧睾摘除的BDF1、C57BL/6J的公鼠可以继续繁育;不育的ICR和GFP小鼠的冻融精子IVF后,只有ICR小鼠可以得到正常的胚胎和子鼠;而以C57BL/6J 为遗传背景的GFP小鼠,其冻融精子只有采用ICSI技术,才可以得到子代.结论 精子冻融小鼠的遗传背景是影响IVF成功与否的关键性因素,同时还建立了一种以小鼠精子为主导的综合性保种体系,既可以达到品系保存的目的,同时又可以最大限度地利用小鼠品系.     

人类胚胎干细胞研究进展

人类胚胎干细胞（ES）与其他哺乳动物的胚胎干细胞之间存在一定差异,且具有自身独特的特征。随着人类ES细胞的研究进展,人类ES细胞将在临床医学,生物学等领域发挥重要的作用。     

人类胚胎干细胞与胚胎生殖细胞

胚胎干细胞(ES)是早期胚胎(桑椹胚,囊胚)或原始生殖细胞(PGCs)经体外分化抑制培养,在传代过程中筛选出来的具有发育全能性或多能性的细胞。这种细胞具有与早期胚胎相似的分化潜能和正常二倍体核型的特点,因此兼有早期胚胎卵裂球及体细胞的某些特性。在发育生物学、遗传学、生物工程、动物克隆、转基因动物中,具有广泛的应用价值。     

人类种植前胚胎的染色体分析

核型分析是诊断人类胚胎染色体异常的常规方法，但是通过细胞遗传学方法对人类种植前胚胎进行染色体检测并不容易。因此分裂间期细胞核的荧光原位杂交（FISH）就成为首选方法之一。体外受精（IVF）种植前胚胎的FISH和核型分析均表明：胚胎的染色体异常率可高达25％－51％。FISH分析显示染色体异常最常见的情况是染色体嵌合的（22％－24％）和胚胎分裂紊乱（7％－26％）。虽然目前还不能应用以上方法对自然受精的胚胎进行检测，但是染色体嵌合以及胚胎分裂紊乱较高的发生率可以为我们合理的解释人类的月经周期自然妊娠率为什么如此低（25％），提供理论依据。     

人类胚胎干细胞与胚胎生殖细胞

胚胎干细胞(ES)是早期胚胎(桑椹胚，囊胚)或原始生殖细胞(PGCs)经体外分化抑制培养，在传代过程中筛选出来的具有发育全能性或多能性的细胞。这种细胞具有与早期胚胎相似的分化潜能和正常二倍体核型的特点，因此兼有早期胚胎卵裂球及体细胞的某些特性。在发育生物学、遗传学、生物工程、动物克隆、转基因动物中，具有广泛的应用价值。     

剖宫产与体外授精技术在小鼠生物净化中的应用

目的 采用剖宫取胎和体外受精对微生物级别达不到SPF级的小鼠进行生物净化.方法 对于具有正常繁殖能力的小鼠品系,通过对阴道栓的检查和触诊确定剖宫产取胎时间,采用子宫摘除手术对小鼠进行剖宫产,取出仔鼠用SPF级受体母鼠代乳,观察代乳情况及代乳仔鼠成活率;对于繁殖力较差或者丧失繁殖能力的品系,采取辅助生殖的方式,采集小鼠精子和卵子,在HTF液中受精,培养3.5 d后的胚胎移植到SPF级受体母鼠子宫内,待产仔.结果 两种方式净化的小鼠断奶后进行微生物检测,均达到SPF级.结论 对微生物级别达不到SPF级但不含垂直传播病原体的小鼠,采用两种方式可有效提高小鼠的微生物等级.     

人类种植前胚胎的染色体分析

核型分析是诊断人类胚胎染色体异常的常规方法 ,但是通过细胞遗传学方法对人类种植前胚胎进行染色体检测并不容易。因此分裂间期细胞核的荧光原位杂交 (FISH)就成为首选方法之一。体外受精 (IVF)种植前胚胎的 FISH和核型分析均表明 :胚胎的染色体异常率可高达 2 5 %～ 5 1%。FISH分析显示染色体异常最常见的情况是染色体嵌合 (2 2 %～ 2 4 % )和胚胎分裂紊乱 (7%～ 2 6 % )。虽然目前还不能应用以上方法对自然受精的胚胎进行检测 ,但是染色体嵌合以及胚胎分裂紊乱较高的发生率可以为我们合理的解释人类的月经周期自然妊娠率为什么如此之低 (2 5 % ) ,提供理论依据     

人类干细胞与胚胎生殖细胞

胚胎干细胞（ES）是早期胚胎（桑椹胚，囊胚）或原始生殖细胞（PGCs)经体外分化抑制培养，在传代过程中筛选出来的具有发育全能性或多能性的细胞。这种细胞具有与早期胚胎相似的分化潜能和正常二倍体核型的特点，因此兼有早期胚胎卵裂球及体细胞的某些特征。在发育生物学、遗传学、生物工程、动物克隆、转基因动物中，具有广泛的应用价值。     

卵胞质内单精子注射与转座子介导的转基因技术

通过卵胞质内单精子注射(ICSI)已经成为治疗人类不育症和小鼠生殖生物学研究的一种有效手段.而且ICSI介导的转基因作为一种动物转基因技术,仍然不够完善.但是相比传统的原核注射技术,该技术最大的优势是可以导入较大片段的外源基因(比如人工酵母染色体YAC).最近研究者们又发展了一种ICSI与转座子结合的转基因技术,能够高效地生产转基因后代,其效率几乎可以与慢病毒载体法相媲美,值得在转基因动物研究中加以推广和应用.     

一种改良的小鼠附睾尾常温运输方法

目的 探索常温条件下附睾尾运输的最佳条件,并消除培养液对常温运输可能存在的影响.方法 对附睾尾的运输方法进行了改良,同时比较了常温或4～8℃条件下,在20μ1或0 μ1培养液M2中,运输后精子的活力、受精能力及其胚胎发育能力.结果 结果表明,常温运输不加培养液的条件下,运输的附睾尾精子活动率和活力,均优于20 μl培养液中运输的附睾尾,但是稍差于4～8℃条件下20μ1M2培养液中运输的附睾尾.结论 无液体运输的方式更加适合于附睾尾的常温运输,同时该方法还可消除培养液对附睾精子可能存在的不良影响;常温附睾尾的运输对于小鼠资源库或者研究机构间珍贵小鼠品系的运输具有重要的应用价值.