β-细辛醚对抑郁模型大鼠行为及生物钟基因表达的影响

目的:探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠生物钟基因(clock)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,agomelatine(褪黑素药物激动剂)组,β-细辛醚低、高剂量组5组,每组10只。给予28 d慢性不可预见性刺激(CMUS),复制大鼠抑郁模型。第8天开始模型组、agomelatnie组、β-细辛醚组分别给予生理盐水,agomelatnie(40 mg·kg-1·d-1),β-细辛醚低、高剂量组(12.5,25 mg·kg-1·d-1),5 m L·kg-1,ig。于给药前及第28天分别检测大鼠体重、水平活动次数及糖水偏爱度,评价大鼠行为学改变。处死大鼠冰上取脑,利用实时PCR及,Western blot方法,检测生物钟基因在各组大鼠脑中表达。结果:在行为学方面,模型组大鼠28 d后体重的增加程度,水平活动次数及糖水偏爱度均显著低于正常组及给药组。在基因表达方面,与正常组相比较,模型组clock的表达显著高于正常组,agomelatnin组,β-细辛醚2个剂量组clock的表达无显著差别;与模型组相比较,agomelatine组,β-细辛醚两剂量组clock的表达显著低于模型组。结论:β-细辛醚可能通过影响抑郁大鼠生物钟基因clock在脑中的表达改变大鼠的抑郁状态。     

大黄素抑制Lovo细胞迁移与黏附的作用

目的探讨大黄素对lovo细胞与内皮细胞迁移和黏附的影响。方法采用MTT法检测大黄素对Lovo细胞和HUVECs增殖的影响,分光光度法检测大黄素对Lovo细胞与HUVECs黏附的影响,Transwell双层小室观察大黄素对Lovo细胞迁移穿过单层HUVECs的影响。结果与对照组比较,10～40μmol/L大黄素对Lovo细胞和HUVECs增殖无显著性影响(P>0.05);与对照组比较,大黄素能够降低Lovo细胞与内皮细胞的黏附(P<0.05),并显著减少迁移与穿过单层HUVECs的Lovo细胞数目(P<0.05)。结论大黄素具有抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附以及肿瘤细胞迁移穿过内皮细胞的作用,提示其具有抗肿瘤转移的潜能。     

抑郁模型大鼠海马区脑酪氨酸激酶受体B活性的变化

目的:从基因水平探讨抑郁症模型大鼠海马区脑酪氨酸激酶受体B活性(TrkB)的变化。方法:SD♂大鼠,分为正常对照组,7,14,21 d不同时程慢性应激刺激组,运用敞箱实验(Open-Field-test) 与糖水消耗量指标评定大鼠行为学改变,釆用免疫组织化学法检测TrkB蛋白表达,实时定量聚合酶链反应对TrkB进行定量分析。结果:实验前各组大鼠水平运动得分与垂直运动评分无差异,与正常对照组相比,7,14,21 d应激组水平﹑垂直运动得分均明显降低(P<0.05),各组间相比无明显差异(P>0.05)。 14,21 d应激组其糖水偏爱度持续减少(P<0.05),免疫组织化学检测结果显示,7,21 d应激组海马区TrkB表达与正常对照组明显降低(P<0.05), 7,21 d 应激组TrkB的mRNA含量亦明显低于正常组。结论:提示不同时程慢性应激刺激海马的神经再生变化与TrkB的中介机制相关联。     

通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及nNOS、SS表达的影响

目的 观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD大鼠学习记忆障碍的改善作用及对神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、生长抑素(Somatostatin,SS)蛋白表达的影响.方法 采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型.采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数评价大鼠学习记忆能力及通络救脑口服液干预作用.采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区nNOS、SS蛋白阳性目标积分光密度.结果 与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长,跨越原平台位置次数明显减少(均为P＜0.01);与模型组比较,通络救脑口服液组(12,24,48 mg·kg-1·d-1)平均逃避潜伏期显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P＜0.01).免疫组化实验结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马区nNOS、SS蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,通络救脑口服液各剂量组nNOS、SS蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 通络救脑口服液通过上调nNOS、SS蛋白表达水平,从而发挥其抗老年性痴呆的作用.     

CD151在胃腺癌和宫颈癌中的表达

目的 探讨CD151在胃腺癌和宫颈癌中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学方法检测CD151在正常胃黏膜和宫颈黏膜组织及胃腺癌和宫颈癌组织中的表达.结果 CD151在所有的胃腺癌(58/58,100.0％)和宫颈癌组织(55/55,100.0％)都表达,在绝大多数正常胃黏膜( 26/28,92.9％)和宫颈黏膜组织(23/24,95.8％)中也都表达.CD151在胃腺癌和宫颈癌中的细胞阳性率及表达量都要显著高于正常组织(P＜0.05).结论 CD151是细胞增殖的一个标记分子;CD151蛋白在宫颈癌中高表达,是宫颈癌治疗的一个潜在靶点.     

墨西哥仙人掌多糖对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡坏死诱导作用的研究

目的观察墨西哥仙人掌多糖对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及坏死的诱导作用。方法将浓度为20μg／mL的墨西哥仙人掌多糖作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,分别培养24h和48h,然后利用流式细胞仪检测人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡及坏死情况。结果不同作用时间的墨西哥仙人掌多糖均能够诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,并促进该肿瘤细胞发生坏死,与阴性对照组比较差异显著（P〈0．01）,尤以48h作用明显,凋亡及坏死肿瘤细胞占培养细胞总数的84．11％。结论墨西哥仙人掌多糖能够诱导人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡及坏死。     

远志汤有效成分对APP/PS1 小鼠氧化损伤的保护作用机制研究

目的 通过观察远志汤有效成分即β- 细辛醚+ 远志皂苷（TEN）对APP/PS1 双转基因小鼠磷脂酰肌醇3- 激酶（PI3K）/ 蛋白激酶B（Akt）/ 糖原合成激酶3β（GSK-3β）信号通路的调控,探讨远志汤防治阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法 将3 月龄APP/PS1 双转基因小鼠分为模型组、盐酸多奈哌齐组（0.33 mg/kg·d）、β- 细辛醚+TEN 低、中和高剂量组[18.5、37.0 和74.0 mg/（kg·d）],选同月龄C57BL/6 小鼠为空白对照组,采用Morris 水迷宫法和新物体识别实验检测小鼠的学习记忆能力,采用分光光度法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）活性,以及丙二醛（MDA）含量。采用Western blot 检测GSK-3β、Akt,以及两者磷酸化蛋白表达。结果 β- 细辛醚协同TEN 可增强APP/PS1 双转基因小鼠的学习记忆功能,同时还能升高SOD、CAT 和GSH-PX 的活性,降低MDA 含量,诱导Akt 的蛋白表达,抑制GSK-3β 的表达。结论 远志汤有效成分即β- 细辛醚+TEN 可通过调控PI3K/Akt/GSK-3β 信号通路,对APP/PS1 双转基因小鼠氧化应激损伤发挥保护作用。     

不同年龄组抑郁症模型鼠Meynert基底核形态学研究

q目的探讨不同年龄组抑郁症模型鼠中枢胆碱能系统神经毡突触超微结构及胆碱乙酰转移酶（ChAT）免疫组化变化情况,并探讨二者之间的关系。方法选择中枢胆碱能系统发源地Meynert基底核为观察对象,采用透射电镜从形态学上观察Meynert基底核神经毡突触的变化,应用ChAT免疫组化观察胆碱能神经元的变化。结果透射电镜观察显示,模型组突触囊泡数量较对照明显减少,且与年龄呈正相关。突触囊泡分布不均匀,聚集于激活的突触带附近,各年龄模型组CqchAT免疫反应与对照组相比明显增强,且与年龄呈正相关。结论抑郁症模型鼠中枢胆碱能系统发源地Meynert基底核神经毡突触囊泡明显减少,而ChAT免疫反应阳性细胞明显增多,差异有统计学意义（P〈0．01）。     

Vav3表达下调对Lewis肺癌细胞体外侵袭能力影响的研究

目的:通过下调Lewis肺癌细胞中Vav3的表达,观察其对肺癌细胞体外迁移和侵袭能力的影响,探讨Vav3在肺癌转移过程中发挥的作用。方法:体外化学合成Vav3特异性siRNA(Vav3-163),并转染至Lewis肺癌细胞。蛋白质印迹法检测转染前后细胞中Vav3表达水平。Transwell小室实验观察下调Vav3对Lewis肺癌细胞体外迁移和侵袭能力的影响。结果:蛋白质印迹检测结果显示,转染Vav3-163序列后,Lewis肺癌细胞中Vav3的表达明显下调。实验组Vav3表达(0.112±0.005)低于LLC组(0.408±0.004)和对照组(0.388±0.005),F=22.052,P=0.002。下调Vav3在Lewis肺癌细胞中的表达后,迁移实验中干扰组穿过膜细胞数(31.0±10.5)明显少于Lewis肺癌细胞组(56.0±5.4)和对照组(49.0±9.1),F=11.213,P=0.002;体外侵袭实验中干扰组穿过人工基底膜细胞数(21.0±6.6)明显少于Lewis肺癌细胞组(59.0±9.8)和对照组(43.0±18.0),F=11.692,P=0.002。结论:下调Lewis肺癌细胞中Vav3的表达,具有抑制肺癌细胞体外迁移和侵袭能力的作用。