中药多靶点逆转白血病多药耐药机制研究

白血病是血液系统一种常见的恶性肿瘤,是国内十大高发恶性肿瘤之一。白血病的多药耐药是化疗失败的主要原因,化学药逆转剂通常毒副作用大,作用机制单一,制约着其临床应用。而中药有高效、低毒、多靶点的特点,在逆转多药耐药白血病上显示出其独特的优势。通过分析近些年白血病多药耐药的机制,综述中药单体成分、中药复方和单味药白血病多药耐药逆转剂,以探讨中药逆转白血病多药耐药的前景。     

中药天葵子的化学成分研究进展

中药天葵子是毛茛科植物天葵Semiaquilegia adoxoides（DC.）Makino的干燥块根,为我国常用中药品种。具有清热解毒,消肿散结之功效,其主要成分有生物碱、氰基和硝基类、酚酸类等。该文对天葵子化学成分的研究进行整理和总结,为进一步研究提供参考。<     

应用蛋白质组学分析化痰祛瘀法干预肝癌大鼠血清蛋白的差异表达

【目的】观察化痰祛瘀法对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响,探讨其药效学机制。【方法】将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、化痰祛瘀组,每组10只。采用自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)法复制大鼠肝癌模型。从造模第4周开始,化痰祛瘀组大鼠给予山慈菇、莪术水提液(剂量为3.12 g·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予9 g/L生理盐水灌胃(1 m L/d),每周6 d。于第16周末,将大鼠全部处死,取血清样本。将3组大鼠血清样本进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析3组差异表达蛋白质的生物信息学。【结果】共鉴定到1 151个蛋白点。与正常组比较,模型组差异表达明显的蛋白共234个,包含正调控蛋白151个,负调控蛋白83个;与模型组比较,化痰祛瘀组差异表达明显的蛋白共138个,包括正调控蛋白60个,负调控蛋白78个。对差异表达蛋白对应的基因于PubMed数据库逐一进行检索,发现这些差异表达蛋白参与代谢、免疫调控、炎症反应、自噬、热休克、氧化应激、细胞周期与凋亡、基质降解、血管生成、肿瘤转移、癌相关等。信号通路分析涉及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)代谢、糖酵解、ATP合成等多条代谢相关通路,纤溶酶原激活物联转导通路,免疫调控相关Toll样受体(TLRs)通路,低氧诱导因子1(HIF-1)信号通路,经典肿瘤通路如P53、Wnt、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路、Ras通路等,亦涉及细胞因子介导的炎症反应、细胞黏附分子、细胞基质受体互动、自噬、细胞凋亡等通路。【结论】化痰祛瘀法可有效干预大鼠肝癌转移,具有多靶点、多中心的调控作用。     

番荔枝总内酯对大鼠心、肝和肾的毒性及其作用机制

目的观察番荔枝总内酯对大鼠的毒性作用,初步探讨其毒性机制。方法将雄性SD大鼠随机分为溶剂对照、番荔枝总内酯7和14 mg·kg-1组,分别ig给药,每天1次,连续4周,末次给药1h后取血,处死大鼠。HE染色观察大鼠心、肝和肾组织病理变化;全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和肌酸激酶(CK)水平;BCA法、分光光度法和荧光素法分别测定心、肝和肾线粒体中蛋白质浓度、线粒体复合物Ⅰ活性和ATP含量;荧光探针法检测组织中Ca2+和活性氧类(ROS)浓度。结果番荔枝总内酯14mg·kg-1组大鼠肝组织中央静脉周围细胞轻微肿胀;与溶剂对照组比较,血清ALT,AST,BUN和CK水平显著升高,分别由溶剂对照组的(50.0±1.4)U.L-1,(126±11)U.L-1,(6.13±0.15)mmol·L-1和(293±13)U.L-1升高到(59.0±2.6)U.L-1(P<0.05),(176±12)U.L-1(P<0.05),(12.9±2.05)mmol·L-1(P<0.01)和(480±97)U.L-1(P<0.05),血清Cr水平无明显变化。心、肝和肾组织线粒体复合物Ⅰ活性分别由溶剂对照组的(22.6±4.9),(72±10)和(34±4)μmo.lg-1蛋白.min-1降低到(7.5±1.7),(54±10)和(26±6)μmo.lg-1蛋白.min-1(P<0.05,P<0.01);心、肝和肾组织ATP含量由溶剂对照组的(10.4±2.1),(6.8±1.6)和(12.5±3.4)nmo.l L-1降低至(2.2±3.4),(3.4±1.2)和(5.5±1.1)nmol·L-1(P<0.05,P<0.01);心肌细胞中Ca2+和ROS浓度增加,荧光强度分别由7.37±0.64和14.8±4.1增加到9.06±0.08和110.0±19.0(P<0.05,P<0.01),肝和肾细胞内Ca2+和ROS浓度无明显变化。番荔枝总内酯7mg·kg-1组上述指标无明显变化。结论番荔枝总内酯对大鼠心、肝和肾具有一定的毒性,其作用机制可能是降低心、肝和肾组织中线粒体复合物I的活性和ATP含量,升高组织细胞内Ca2+和ROS浓度,引起组织细胞损伤。     

基于液质连用分析法分析补肾活血方中黄酮类化学成分

目的建立补肾活血方中黄酮类化学成分的分析方法测定淫羊藿次苷Ⅱ含量。方法化学成分定性分析采用UPLCESI-Q-TOF-MS技术,C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),梯度洗脱(流动相:甲醇-0.1%甲酸溶液);质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。含量测定采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×100mm ID,1.7μm,Waters,Milford,USA)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱;经ESI离子源负离子化后,通过Waters-Xevo TQ三重四级杆串联质谱仪,采用多反应离子监测(MRM)对淫羊藿次苷Ⅱ进行含量测定。结果鉴定出补肾活血方中14个黄酮类化学成分。补肾活血方中淫羊藿次苷Ⅱ含量为0.092 80mg/g,单味药淫羊藿中淫羊藿次苷Ⅱ含量为0.010 08mg/g。结论采用液质连用分析法鉴定复方化学成分和测定含量,该方法快速简便、结果可靠,对于研究补肾活血方配伍前后物质变化具有积极意义。     

中药逆转肿瘤细胞多药耐药的研究进展

肿瘤细胞多药耐药性是临床化疗失败的主要原因之一。化学药逆转剂因其毒副作用较大、靶点单一,应用受到限制,而中药具有高效、低毒、多靶点的特性,是近年来的研究热点。通过对近年来能够逆转肿瘤细胞多药耐药的中药单体成分、中药提取物以及中药复方的综述,探讨中药逆转肿瘤细胞多药耐药的研究进展及肿瘤细胞多药耐药逆转剂的开发前景。     

单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物对大鼠线粒体复合酶I活性的影响

目的 探讨单四氢呋喃型番荔枝内酯类（单THF型ACGs）化合物对大鼠肝线粒体复合酶I活性的影响。方法 选用6个结构不同的单THF型ACGs,通过测定其对大鼠肝线粒体复合酶I的抑制活性,明确这些化合物结构中四氢呋喃环与内酯环之间碳数、取代羟基个数以及四氢呋喃环的核心构型对大鼠肝线粒体复合酶I活性的影响。 结果 6个单THF型ACGs对大鼠肝线粒体复合酶I均有一定的抑制活性,构效关系分析可见,在单THF型ACGs中,四氢呋喃环与内酯环间碳链越短,化合物活性越强,取代羟基个数并非是影响活性的决定性因素。结论 四氢呋喃环的核心构型为苏式/反式/赤式时比苏式/反式/苏式构型的抑制线粒体复合酶I的活性强。     

蛋白质组学分析益气养阴法作用于肝癌大鼠的血清蛋白差异表达研究

目的:观察基于癌毒病机制论的临床验方——消癌解毒方的益气养阴组分药—太子参和麦冬对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响。方法:30只SD雄性大鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)、益气养阴组(n=10)。给予模型组与益气养阴药组大鼠0.01%DEN(Sigma,纯度为99.9%,蒸馏水配制)溶液自由饮用8周后,停药2周,期间改为普通喂养,继续给药喂养6周。益气养阴组大鼠于第4周同时给予2.75 g·kg~(-1)·d~(-1)的太子参、麦冬水提液灌胃,每周6 d。模型组于第4周同时给予0.9%生理盐水灌胃,1 mL/d,每周6 d。大鼠于第16周灌胃结束后全部处死,取血清样本。将3组血清样本进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析三组差异表达蛋白质的生物信息学。结果:共鉴定到1151个蛋白点。模型组与正常组相比,差异表达明显的蛋白共234个,包含正调控蛋白151个,负调控蛋白83个。益气养阴组与模型组相比,差异表达明显的蛋白共116个,包括正调控蛋白47个,负调控蛋白69个;对差异表达蛋白对应基因于PUBMED数据库逐一进行检索,发现这些差异表达蛋白与代谢、免疫调控、炎症反应、氧化应激、细胞周期与凋亡、肿瘤转移、肝再生修复等均相关。信号通路分析涉及PPAR代谢、谷胱甘肽代谢、糖酵解等多条代谢相关通路。免疫相关的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)信号转导通路的激活,癌基因相关如Ras、PI3K、P53通路等的调控,分析结果亦提示有细胞因子介导的炎症反应,自噬,细胞黏附分子,NK细胞介导的细胞毒性,细胞周期等的变化。结论:本研究证实太子参、麦冬—益气养阴法作用于肝癌大鼠有多靶点,多中心的调控作用。     

番荔枝子油化学成分GC-MS分析

目的：研究番荔枝子油的化学组成及相对含量。方法：采用石油醚提取番荔枝子油,对番荔枝子油进行甲酯化后,应用GC-MS分析其主要成分及相对含量。结果：番荔枝子的得油率为8.27%,GC-MS分析鉴定出14个化学成分,主要成分为棕榈酸（12.5%）、亚油酸（13.2%）、油酸（24.3%）、硬脂酸（16.3%）和反油酸（12.8%）。结论：番荔枝子油富含不饱和脂肪酸,相对含量为58.2%。     

番荔枝内酯类化合物对耐紫杉醇肺癌细胞A549/Taxol的体外活性研究

选择10种番荔枝内酯类化合物对耐紫杉醇肺癌细胞A549/Taxol的活性,并分析其构效关系。采用MTT比色法,检测10种番荔枝内酯类化合物和阳性药对A549/Taxol细胞的抑制活性,分别为uvariamicin-Ⅲ(1), uvariamicin-Ⅱ(2), annosquacin D(3), desacetyluvaricin(4), annosquatin A(5), squamostatin D(6), bullatacin(7), squamocin(8), motrilin(9), annosquatin B(10), 维拉帕米和顺铂。番荔枝内酯类化合物对A549/Taxol细胞有很好的抑制作用,且抑制活性比阳性药维拉帕米和顺铂强。番荔枝内酯类化合物中的四氢呋喃环与内酯环之间的碳数越长,化合物的活性越强;在邻双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物中,链上含有2个羟基的化合物的活性强于链上含有3个羟基的;在间双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物中,链上含有3个羟基的活性强于链上含有4个羟基的。