兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征

[目的]探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况.[方法]无菌条件下,从 2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按 1× 106个 /孔接种于 6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线.利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态.应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定.[结果]每克软骨能获取 1 5× 106个软骨细胞,活性率为 95%.培养 2～ 3 d,细胞贴壁、变形,呈多角形; 8 d左右,细胞融合成层.透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性.细胞传至 5代后,出现"成纤维细胞样".[结论]本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第 2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞 5代培养后,细胞表型发生改变.     

右肺下叶癌右肺下叶及中间段支气管袖状切除保留右肺中叶一例

患者　男 ,6 4岁 ,以咳嗽 1个月余 ,伴轻微气短 ,胸部Ｘ光片发现右肺下叶肿块收住院。胸部ＣＴ显示右肺下叶 5ｃｍ× 4ｃｍ肿块 ,肿块密度不均、边缘不规则 ,ＣＴ值 5 2～ 6 8Ｈｕ。纤维支气管镜检查发现右肺下叶肿块 ,累及右中间段支气管开口 ,刷片未找到癌细胞。患者心电图及肺功能正常 ,各项常规化验均在正常范围。术前临床诊断为右肺下叶癌累及中间段支气管。于 2 0 0 2年 2月 2 2日在全麻下对患者行右后外切口开胸探查。术中见右肺水平裂未发育 ,斜裂发育良好 ,肿块位于右肺下叶根部 ,大小约 5ｃｍ× 4ｃｍ× 4ｃｍ ,质硬 ,肉眼判断为…     

压力对体外培养髁突软骨细胞增殖、凋亡的影响

【目的】观察压力对体外培养SD大鼠髁突软骨细胞增殖、凋亡以及合成蛋白多糖的影响，探讨压力与软骨退变之问的相互关系。【方法】在一个大气压基础上，分别对3组体外培养髁突细胞进行加压-10kPa、10kPa，20kPa(5％CO2)，以未加压组作为对照，用四唑盐法(MTY法)和流式细胞技术分别检测各组标本在加压3h和加压24h后细胞增殖、凋亡的情况：应用硫酸-咔唑法检测各组标本在加压3h和加压24h后蛋白多糖的含量。【结果】加压3h后，各加压组与对照组相比，细胞的增殖、凋亡以及蛋白多糖含量无明显变化；加压24h后，压力值为20kPa时可以明显拟制增殖，并诱导髁突软骨细胞发生凋亡增加，蛋白多糖含量明显减少。【结论】长时间的异常压力负荷可使髁突软骨细胞增殖减缓、凋亡增加，蛋白多糖含量减少，诱发或加重关节软骨退变。     

短暂性脑缺血的中西医防治要点

本文对短暂性脑缺血的临床诊断要点和具体特征症状以及常见症状做了详尽的要点描述,力求使医者在症状诊断上确切和审慎,既不延误病情诊断,又能及早进入治疗阶段。强调短暂性脑缺血之短暂为24h之内,多数仅为数分钟或数十分钟,可以频发,并指出颈动脉系统和椎动脉系统症状特点。治疗上推出中西医防治方法,把现代医学扩管和扩容作为常规疗法,重点应用中药防治五法:先以活血益气通络,进而平肝息风,祛痰除湿滋养肝肾。步步推进,邪祛而正复。最终使得患者症状得以控制和缓解,减少再发。     

“军字一号”移动护士站的设计

本文在分析“军字一号”病房护士站系统应用现状的基础上，提出为满足临床护理工作的实际需要必须开发设计移动护士站。并且在阐述了系统的整体设计思路后具体讨论了系统中常规测量模块、执行单处理模块、标本采集模块以及急救模块设计方案。最后提出了数字化医院建设中移动医疗的思想。     

兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞分离培养的实验研究

【目的】探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件，观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性。【方法】在无菌条件下，切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘，剪至1．0m^3的碎块，0．5g／mL胰酶消化30min、胶原酶消化4h，200目筛网过滤，获得关节盘纤维软骨细胞。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率，甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定，测定其生长曲线。透射电镜观察细胞超微结构。【结果】原代培养的关节盘纤维软骨细胞12h可观察到贴壁细胞，48h贴壁细胞逐渐增多，大部分细胞为短梭形，小部分为多角形，第4天可见多个细胞克隆形成，第8天时细胞彼此相连，铺满平底，细胞以梭形为主，部分多角形。传代后12h贴壁率达90％，大部分为多角形，4～5d即可张满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒，胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达。【结论】体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力。     

恶性肿瘤组织中人纤维介素的表达及作用

目的研究恶性肿瘤患者病理组织中人纤维介素（human fibrinogen-like protein2，hfgl2）的表达及与纤维蛋白沉积的关系。方法采用免疫组化方法检测了11例结肠癌、15例宫颈癌、10例乳腺癌、9例食管癌、12例肺癌、16例胃癌患者的病理组织切片中hfgl2及纤维蛋白的表达，分析二者的组织学关系，用RT-PCR方法检测了部分肿瘤组织与肿瘤细胞系中的hfgl2 mRNA。结果免疫组化显示hfgl2在上述肿瘤中均有表达，主要分布于间质浸润细胞、肿瘤实质细胞、肿瘤血管内皮细胞及细胞外基质，且在邻近有明显的纤维蛋白沉积。通过RTPCR，在体外培养的数种肿瘤细胞系中未检出hfgl2 mRNA，但在肿瘤组织中检出hfgl2 mRNA表达明显高于正常组织。结论恶性肿瘤时存在hfgl2的高表达，并且可能与肿瘤高凝状态的形成及肿瘤的演进有关。     

兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞分离培养的实验研究

 【目的】探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件，观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性。【方法】在无菌条件下，切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘，剪至1．0m^3的碎块，0．5g／mL胰酶消化30min、胶原酶消化4h，200目筛网过滤，获得关节盘纤维软骨细胞。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率，甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定，测定其生长曲线。透射电镜观察细胞超微结构。【结果】原代培养的关节盘纤维软骨细胞12h可观察到贴壁细胞，48h贴壁细胞逐渐增多，大部分细胞为短梭形，小部分为多角形，第4天可见多个细胞克隆形成，第8天时细胞彼此相连，铺满平底，细胞以梭形为主，部分多角形。传代后12h贴壁率达90％，大部分为多角形，4～5d即可张满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒，胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达。【结论】体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力。     

临床检验标本采集系统的设计

阐述了作为临床检验信息系统（CLIS）和临床信息系统（CIS）接口的临床检验标本采集系统的设计思路,讨论了系统设计中条码技术、申请分组、质量保证等问题的解决方案,并提出了移动采集的新思想.     

中医治疗妊娠合并糖尿病59例临床疗效观察

目的 探讨中医治疗妊娠合并糖尿病59例的临床疗效.方法 选择2012年4月-2014年2月期间收治的妊娠合并糖尿病患者59例,根据中医辩证分型,采用相应的中医治疗方法.结果 治疗效果显效37例(62.71％),有效17例(28.82％),无效5例(8.47％),总有效率91.53％.结论 应用中医治疗妊娠合并糖尿病,疗效明显,改善患者临床症状,值得推广应用.