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目的:制备来源于人外周血并转染人乳头瘤病毒(HPV)16 E6基因的冻融树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态。转染情况及体外诱导的免疫效应。方法:细胞因子扩增人外周血DC,低温-70℃冻存;Lipofectamine转染HPV16 E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学检测E6分子表达,体外诱导并测定细胞毒性T淋巴细胞活性。结果:转染E6基因的人外周血冻融DC呈形态迥异的多突起状,免疫细胞化学染色显示E6蛋白表达阳性;MTT法检测人宫颈癌细胞株(CaSKIi细胞)的杀伤活性明显高于对照组(P〈0.01),与新鲜DC疫苗比无统计学意义(P〉0.05)。结论:转染历基因的人外周血冻融DC疫苗保持了功能成熟DC的形态特征,且内源性表达E6蛋白,并在体外诱导出高效特异性的抗宫颈癌免疫反应,为宫颈癌的主动特异性免疫治疗提供了理想的疫苗和实验依据。 相似文献
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冻融人脐血树突状细胞疫苗的抗肝癌活性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察人肝癌裂解抗原致敏的冻融人脐血树突状细胞(dendriti cells,DC)诱导的CTL抗肝癌活性,并观察与细胞因子联用的效应。方法:应用CD34^+干细胞试剂盒和免疫磁珠标记法分选人脐血CD34^+干细胞,细胞因子扩增培养为成熟DC,液氮冻存;人肝癌裂解抗原致敏冻融DC制备疫苗,进行DC疫苗及其与细胞因子联用的体外抗肿瘤实验,MTT检测各自诱导的CTL活性,并作统计学处理。结果:肝癌抗原致敏的人脐血冻融DC疫苗能诱导高效的CTL活性(P<0.01),与新鲜DC疫苗差异无显著意义(P>0.05)。冻融DC疫苗与1μg/mL GM-CSF联用,或与500U/mL TNF-a联用,诱导的CTL活性均明显增高(P<0.05)。结论:肝癌抗原致敏的人脐血冻融DC疫苗能诱导具有高度针对靶细胞的特异性CTL活性,与细胞因子联用有一定的协同作用。 相似文献
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目的 利用杂交瘤技术制备脐血树突状细胞和食管癌细胞融合疫苗 ,研究融合疫苗的生物学特征。方法 免疫磁珠法分离脐血CD34 干细胞 ,细胞因子诱导扩增为成熟树突状细胞 (DC) ;用聚乙二醇法 (PEG)将DC与食管癌细胞EC10 9融合 ,免疫磁珠法筛选阳性克隆EC10 9-DC ;利用流式细胞术鉴定融合疫苗表型 ;绘制融合疫苗生长曲线。结果 融合疫苗EC10 9-DC可在体外培养生长 ,高表达CD80 ,CD83和CD86 ,增殖活性低于EC10 9。结论 融合疫苗EC10 9-DC细胞具备了刺激免疫细胞活化的分子表型 ,为食管癌的特异性免疫治疗提供新的理论依据。 相似文献
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砷剂用于治疗急性早幼粒细胞性白血病 ,取得了较好的临床效果。同样 ,其在实体瘤的体外实验中 ,也具有细胞周期阻滞和促进细胞凋亡的作用 ,作用机理主要包括 :①增加细胞内活性氧水平 ,影响线粒体膜电位及细胞代谢。② 调节癌基因或细胞周期依赖基因的表达 ,促进细胞凋亡。③影响微管的结构和功能 ,抑制细胞的有丝分裂。本文对此作一综述 相似文献
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脐血树突状细胞介导的食管癌瘤苗体内抗癌效应 总被引:1,自引:0,他引:1
背景与目的:用杂交瘤技术制备脐血树突状细胞(DC)和食管癌细胞的融合瘤苗,探讨其在体内诱导抗肿瘤效应.材料与方法:分离脐血CD34+干细胞诱导扩增为成熟DC,与EC109细胞经聚乙二醇(PEG)法融合;免疫磁珠法筛选EC109-DC,鉴定瘤苗表型和致瘤性;观察该瘤苗的体内成瘤性、保护性免疫反应和免疫治疗效果.结果:融合瘤苗可体外生长,并高表达CD80、CD83、CD86和叶酸受体(FR);瘤苗接种小鼠体内未见肿瘤形成;经瘤苗免疫的小鼠,肿瘤生长的潜伏期较对照组明显延长(P<0.05),肿瘤的大小和肿瘤重量均明显小于对照组(P<0.05).用融合瘤苗治疗的荷瘤小鼠,肿瘤的大小和重量也均明显小于对照组(P<0.05).结论:融合瘤苗EC109-DC同时表达EC109和DC特异性抗原,无体内致瘤性,对EC109细胞的攻击有明显的抵抗作用,对治疗荷瘤小鼠有一定的作用. 相似文献
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目的:探讨低温冻存后脐血树突状细胞(DC)与EC109食管癌细胞融合疫苗体内致瘤性。方法:免疫磁珠标记法分选人脐血CD34^+干细胞,细胞因子扩增培养为成熟DC,聚二乙醇(PEG)融合法制备EC109-DC融合疫苗。流式细胞术双阳性标记鉴定融合疫苗,-80℃低温冰箱冻存,3周后融冻,流式细胞术再次鉴定融合疫苗,行体内致瘤性研究。结果:(1)融冻后疫苗体外半悬浮生长;同时高表达FR和CD80;(2)融冻后疫苗接种于SCID小鼠俸内未见肿瘤形成,脾、肺和肝等器官未出现肿瘤病变。结论:冻存未破坏融合疫苗的完整性,融冻瘤苗无体内致瘤性,其亲本EC109细胞的恶性生长特征已丧失。安全可靠。 相似文献