microRNA启动子区甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭的影响

目的研究microRNA启动子区甲基化水平的变化对几种microRNAs（miRNA34a、miRNA34b、miRNA148a、miRNA203a）表达的影响,并进一步研究该甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移以及侵袭能力的影响。方法不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR) 处理人肺癌细胞A549,分别作用24 h、48 h、72 h,采用CCK8法检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率。20 μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞72 h,通过甲基化特异性PCR(MSP)检测A549细胞相关miRNAs启动子甲基化水平的变化;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测A549细胞相关miRNAs表达水平的变化。20 μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞0 h、24 h、48 h,采用划痕实验检测细胞迁移能力（计算细胞在24 h和48 h的划痕愈合率）;作用48 h,采用Transwell检测细胞侵袭能力。结果CCK8结果显示,随着5-Aza-CdR的处理浓度升高、时间延长,A549细胞的增殖抑制率逐渐增加。经5-Aza-CdR去甲基化处理后,MSP结果表明,实验组相对于对照组甲基化引物扩增条带减弱,而非甲基化引物扩增条带增强;Real-time PCR结果显示,相关miRNAs表达水平升高（P<0.05）。由划痕实验和Transwell检测结果揭示,经5-Aza-CdR处理后,A549细胞的生长愈合能力降低（P<0.05）,并且侵袭到Transwell小室滤膜下表面的细胞数亦减少（P<0.05）。结论人肺癌细胞A549经5-Aza-CdR去甲基化处理后,miRNAs表达水平升高,进一步抑制肺癌细胞的增殖、迁移以及侵袭能力。     

延长肉及肉制品货架寿命的食品包装

肉及肉制品是大众化食品,是人体许多营养素的主要来源,肉及肉制品的营养和卫生质量直接关系到消费者的健康。家畜(包括猪、牛、羊等)在屠宰之后经过加工、运输、贮存、销售等一系列过程,到达消费者手中,受     

MKK6过表达调控SIRT1影响食管癌细胞肿瘤行为学的体外研究

目的 向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1（+）/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6（MKK6）重组过表达载体,观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子（SIRT1）表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化,探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其对Eca109细胞各项肿瘤行为学造成的影响。 方法 根据GenBank中MKK6基因的mRNA序列设计引物,构建MKK6过表达载体;将Eca109细胞分空载体转染组、MKK6过表达载体转染组、MKK6-SIRT1 ShRNA共转染组和MKK6-RES（白藜芦醇）组,相应处理后,采用Western blot测定各组Eca109细胞的SIRT1及MKK6表达水平,MTT法检测各组Eca109细胞的增殖活力,Transwell法观察各组Eca109细胞的侵袭力,流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况。 结果 测序结果表明成功构建MKK6过表达载体;转染MKK6过表达载体可降低Eca109细胞的内源性SIRT1表达,减弱Eca109细胞的增殖活力,促其凋亡,同时可使Eca109细胞的侵袭力增强,以上各项改变均与SIRT1的表达水平有关。 结论 Eca109细胞内可能存在p38-MAPK-SIRT1调节轴,MKK6及其下游因子对SIRT1可能具有反馈调节作用,可引起Eca109细胞各项肿瘤行为学的变化。     

食品广告管理的现状与对策

<正> 人们只要稍微注意一下电视、报刊,就会感觉到紧锣密鼓的广告大战。在刊、播的广告中,食品广告占有较大的比例。各食品生产经营企业越来越重视广告的作用,利用广告介绍、推销产品。其中大部分食品广告内容真实、健康、准确。在很大程度上提高了产品的知名度,促进了产品的销售。但也有部分食品广告,超出了食品广告允许宣传的范围,出现了“健美食品”、“滋补食     

甲基化调控microRNA表达影响胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的研究

目的 研究基因启动子区甲基化对胰腺癌相关microRNA（miR34a、miR34b、miR148a、miR203a）表达水平的调控,及其对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 通过5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR)去甲基化处理胰腺癌细胞MIAPaca-2,使用甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR,MSP)法检测60 μmol/L 5-Aza-CdR处理组及0 μmol/L对照组 MIAPaca-2细胞目标microRNA启动子甲基化水平的变化;用荧光实时定量PCR检测处理组及对照组目标microRNA表达水平的改变;CCK-8法、划痕实验以及Transwell法检测胰腺癌细胞去甲基化处理后处理组和对照组增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果 MSP法结果显示处理组较未处理组目标microRNA甲基化M条带灰度值减弱,非甲基化U条带灰度值增强,处理组目标microRNA启动子甲基化程度较对照组减弱。荧光实时定量PCR结果显示处理组较未处理组目标microRNA相对表达量升高（ P<0.05）,处理组microRNA的表达水平随去甲基化处理而升高。CCK-8法显示随着药物处理浓度的增加,处理组细胞抑制率增高,去甲基化处理抑制了胰腺癌细胞的增殖能力。划痕实验结果显示处理组较未处理组细胞伤口愈合率降低（ P<0.01）,去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的迁移能力。Transwell法结果显示处理组较未处理组穿膜细胞数减少（ P<0.01）, 去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的侵袭能力。结论 肿瘤细胞去甲基化处理,导致4种目标microRNA高表达,抑制了胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

网络技术在卫生监督中的应用

随着网络技术的迅猛发展,“计算机网络”已经成为一种现代社会先进生产力的窗口。加强“卫生监督网络技术”的建设,是卫生监督工作适应现代化建设、促进社会经济发展的迫切需要,也是卫生监督工作实行一体化、标准化、规范化的必然选择。1政务公开,加强社会监督卫生监督工作是国家有关法律法规赋予的具有强制性的执法工作,也是保障社会经济有序发展的必要手段。网络技术可以将卫生监督机构的基本概况、工作范围、各科室的设置和职能、各类管理制度等在网上发布,使卫生监督做到政务公开,便于社会监督,能有效地杜绝职务犯罪。2增设办事指南、法…     

浅谈转基因食品的现状及发展前景

随着生产技术的发展,食品的种类越来越多。传统的农业生产杂交和诱导突变技术可使作为食品资源的微生物、植物和动物具有所需的特性。但是由于遗传上的巨大差异,使杂交受到限制,诱导突变又往往不能获得准确性状,且还有可能同时产生有害突变,转基因技术的产生和发展为解决这些问题提供了新的思路和方法。转基因食品的出现标志着生物技术的发展迎来了辉煌和关键的时期。近年来,转基因食品作为新兴的食品品种被世界越来越多的国家广泛采用和关注。     

NGAL重组蛋白的表达与纯化及其促进结肠癌转移的研究

目的 研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制.方法 通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测NGAL对细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测NGAL对肿瘤转移相关蛋白表达的影响;ELISA检测不同肿瘤分期结肠癌患者血液中NGAL表达情况.结果 成功构建pet32a-tev-NGAL原核表达载体,并通过体外表达与纯化获得NGAL重组蛋白;该蛋白促进SW480的迁移和侵袭;Western blot检测结果表明,NGAL激活EMT信号通路;ELISA结果表明,NGAL表达量与肿瘤恶化程度成正相关.结论 NGAL通过激活EMT信号通路促进结肠癌细胞SW480转移.     

过表达miR-18a靶向ATM对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因 (ataxia telangiectasia mutated gene, ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法 通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂（mimics）和抑制剂（inhibitor）,通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量（qRT）-PCR、Western blot、 MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果 软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。 转染miR-18a mimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论 证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。