MKK6过表达调控SIRT1影响食管癌细胞肿瘤行为学的体外研究

目的 向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1（+）/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6（MKK6）重组过表达载体，观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子（SIRT1）表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化，探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其对Eca109细胞各项肿瘤行为学造成的影响。 方法 根据GenBank中MKK6基因的mRNA序列设计引物，构建MKK6过表达载体；将Eca109细胞分空载体转染组、MKK6过表达载体转染组、MKK6-SIRT1 ShRNA共转染组和MKK6-RES（白藜芦醇）组，相应处理后，采用Western blot测定各组Eca109细胞的SIRT1及MKK6表达水平，MTT法检测各组Eca109细胞的增殖活力，Transwell法观察各组Eca109细胞的侵袭力，流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况。 结果 测序结果表明成功构建MKK6过表达载体；转染MKK6过表达载体可降低Eca109细胞的内源性SIRT1表达，减弱Eca109细胞的增殖活力，促其凋亡，同时可使Eca109细胞的侵袭力增强，以上各项改变均与SIRT1的表达水平有关。 结论 Eca109细胞内可能存在p38-MAPK-SIRT1调节轴，MKK6及其下游因子对SIRT1可能具有反馈调节作用，可引起Eca109细胞各项肿瘤行为学的变化。

Study of Mechanism of Esophageal Cancer Development Through MKK6 Over-expression Regulated SIRT1 Expression Level