细胞上皮-间质转化发生的分子机制及临床意义

上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是上皮细胞通过特定程序从黏附细胞形态向具有间质表型游离细胞形态转化,并获得侵入细胞外基质能力的一系列转化过程。这种后天获得运动能力的细胞在移行过程中可再次向上皮细胞或其他细胞类型转变,即间质细胞上皮化(mes-enchymal-epithelial transition,MET)。EMT 与 MET 的相互转化与肿瘤的发生、发展、转移关系密切[1-2]。目前,EMT 与肿瘤关系及其临床应用已成为研究热点。     

HPV L1 C-末端保守序列短肽体液免疫学特性

目的 探讨一段位于HPV L1 C-末端、长30个氨基酸残基的保守序列的体液免疫学性质而进行此实验.方法 以此序列为基础人工合成短肽,以该短肽免疫小鼠和兔,获得抗血清,通过ELISA,Western Blot及免疫组织化学的方法,分别对含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白或HPV阳性临床标本进行反应.结果 抗短肽抗血清能与含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白发生针对HPV L1的反应,能使HPV6和16阳性的临床标本呈现阳性反应,而抗HPV16及抗重组HPV16 L1抗血清对此短肽的反应则较弱.结论结果表明由该保守序列短肽诱导的抗血清具有一定的型间交叉反应特征,这一特性可能对研究检测用广谱HPV L1抗体有一定的意义.该序列短肽抗血清对不同型HPV L1反应的差异性及抗血清对多型别HPV L1的反应是否具有中和性,尚需进一步的研究.     

L1 C末端共同序列多肽诱导单克隆抗体应用于宫颈脱落细胞HPV的检出

目的 确定由人乳头瘤病毒( human papillomavirus,HPV)主要外壳蛋白(L1)C-末端保守序列多肽诱导的单克隆抗体对宫颈脱落细胞内的 HPV感染 是否具有可应用于临床的检测能力。方法 收集妇科门诊宫颈脱落细胞标本,一式两份,其中一份标本用于HPV感染的医院检验科基于市售HPV分型检测试剂盒检测,另一份以本课题组制备的HPV L1 C-末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体作为探针用免疫组化(Immunological Histological Chemistry, IHC)方法检测标本中的 HPV L1,比较HPV L1 C-末端共同序列诱导单克隆抗体对宫颈脱落中 HPV 的检出结果和临床检测结果的差异。结果 收集到的 384 例妇科门诊宫颈脱落细胞标本中, HPV分型检测试剂盒检测出HPV阳性感染例数为63例,阳性率为16.41%(63/384);用免疫组化检测方法检测了其中380例标本,共检出阳性标本120例,阳性检出率为31.58%(120/380),与HPV分型检测试剂盒检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 初步证明了HPV L1 C- 末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体对宫颈脱落细胞内 HPV 的感染具有良好的检出能力,并且检测能力明显要高于现临床所用的市售 HPV 分型检测试剂盒的检测能力(P<0.05)。该单克隆抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的 HPV 检测试剂盒方面具有一定的潜力。     

人白细胞抗原、人乳头瘤病毒感染与宫颈癌相关性的研究进展

宫颈癌的发生是一个多因素、多阶段的渐进过程。目前认为,人乳头瘤病毒(HPV)感染正常宫颈鳞状上皮是宫颈癌的始发因素,但是,特异性的HPV感染并不是宫颈癌发生的唯一致病因素。目前认为,浸润癌的发生需要经历一段漫长的宫颈上皮内瘤样变(CIN)过程,根据其组织病理变化分为CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ3个级别。大部分CINⅠ病     

外感温燥咳喘病机的实验研究

目的:研究温燥对气道组织结构与功能、黏液素基因(MUC5ac)表达和核因子NF-κB活性等影响。方法:138只SPF级昆明种小鼠随机分为常温常湿组、常温燥组、温燥组,每组46只。于处理后第6天与第12天行气管与肺组织超微结构观察、MUC5ac表达、NF-κB活性、气管纤毛运动(CM)、气道液黏多糖(MS)、IgG与分泌型IgA(SIgA)及二棕榈酰卵磷酯(DPPC)含量的影响。结果:与常温常湿组比较,常温燥组第6天、第12天气道组织改变不明显;温燥组气管上皮细胞鳞状化生与纤毛缺损、腺体化生伴炎性细胞浸润,肺泡瘀血伴肺气肿,超微结构显示Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)嗜锇板层小体数量减少与线粒体肿胀;温燥组CM加快、MUC5a mRNA表达上调但NF-κB活性下降、RM、IgG、SIgA与DP-PC下降(P<0.01)。结论:温燥袭肺使受邪部位津液骤伤、抗体含量下降和削弱"纤毛-黏液毯"御邪之功,MUC5ac基因表达上调和NF-κB活性受抑可致ATⅡ分泌肺泡表面活性物质功能障碍而损调节肺通气之功,肺失输布则炎性之物聚而为痰致病,结果为温燥之"痰、咳、喘"诸证提供实验证据。     

甘氨双唑钠影响SiHa细胞对顺铂的敏感性

目的 以子宫鳞癌SiHa细胞为靶细胞,分析甘氨双唑钠是否可影响宫颈鳞癌SiHa细胞株对顺铂的敏感性.方法 不同浓度顺铂、甘氨双唑钠及两药联合作用于SiHa细胞,通过形态学观察、四甲基偶氮唑盐细胞活力测定等方法 检测对SiHa细胞敏感性的影响.结果 不同浓度的顺铂对宫颈癌细胞的生长均有抑制作用(P<0.05),而不同浓度甘氨双唑钠对SiHa细胞影响不显著(P>0.05).顺铂(5μg/mL)与不同浓度CMNa合用可明显增强顺铂对SiHa细胞生长的抑制作用,且随CMNa浓度的增加,组间抑制作用越明显(P<0.01).结论 联合应用甘氨双唑钠可提高顺铂对肿瘤细胞的敏感性,为临床制定宫颈癌化疗方案提供理论依据.     

青蒿琥酯对小鼠宫颈癌实体瘤和腹水瘤抑制作用的研究

目的观察青蒿琥酯（artesunate,Art）对小鼠宫颈癌实体瘤和腹水瘤生长抑制作用。方法同时建立小鼠宫颈癌U14细胞腹水瘤和实体瘤模型,分别用Art200mg&#183;kg^-1&#183;d^-1、100mg&#183;kg^-1&#183;d^-1、50mg&#183;kg^-1&#183;d^-1、顺铂2mg&#183;kg^-1&#183;d^-1,Art50mg&#183;kg^-1&#183;d^-1顺铂1mg&#183;kg^-1&#183;d^-1治疗腹水瘤和实体瘤小鼠,生理盐水为对照组。观察Art对实体瘤的抑瘤率,对腹水瘤的生命延长率。结果Art对小鼠宫颈癌实体瘤抑瘤率分别为52．59％、44．44％、31．84％、61．45％、51．85％,腹水瘤组生命延长率分别为76．7％、45％、31．7％、100％、93.3％。结论Art能明显抑制小鼠宫颈癌实体瘤和腹水瘤生长,且高剂量组效果明显优于低剂量组。     

HPV L1在不同宫颈病变组织中的表达规律探讨

目的 探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法 收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表达情况。结果 共收集到48例标本,其中42例HPV16阳性,3例HPV18阳性。HPV16阳性标本中,25例病毒基因组为游离型,7例为混合型,10例为整合型;HPV18阳性标本全部为整合型。ELISA及蛋白质印迹检测显示,随着病变程度的加重,HPV L1的表达量有逐渐降低的趋势。免疫组织化学显示,组织内的HPV L1阳性反应有多种形式,依病变组织内病毒基因组物理状态、病变组织分化程度以及病变进程的不同而不同。结论 HPV L1在宫颈病变组织内的表达有一定的结构基础,其表达量与病毒基因组在病变组织和细胞内的物理状态、肿瘤组织的分化程度、病毒基因组插入宿主基因组基因序列的状态有着非常密切的关系。     

乳头瘤病毒E2蛋白的分子生物学研究进展

乳头瘤病毒E2蛋白是一种多功能蛋白,在乳头瘤病毒的生活史中处于核心的枢纽地 位。E2蛋白可在DNA复制水平、RNA转录水平上对基因表达进行调控。E2蛋白可启动、增强或抑制乳头瘤病毒早期启动子的表达。研究E2蛋白的功能有助于揭开乳头瘤病毒的生活史及其致病的分子机理。