DAAO/D-Ala系统对高致瘤性K562e细胞体外杀伤效应及其机制的研究

目的 研究D－氨基酸氧化酶（DAAO）／D－丙氨酸（D－Ala）自杀基因系统在基因治疗中的应用。方法 应用转录病毒转染技术获得稳定表达DAAO的高致瘤性K562e单克隆细胞KDfGC，用ＰＣＲ、原位杂交技术对ＤＡＡＯ基因修饰的ＫDfGC、不同比例ＤＡＡＯ表达阳性与阴性混合细胞的杀伤作用；用酚红氧化法测定培养上清Ｈ２Ｏ２水平。结果 ＰＣＲ和原位杂交分析证明ＤＡＡＯ基因已整合至细胞基因组中，并在mRNA水平表达。ＫDfGC与未转基因的原肿瘤细胞相比，生长速度差异无显著性。１２.5／Ｌ Ｄ－Ａla作用２４h即可杀死近９０％的ＫDfGC细胞，而且Ｄ－Ａla达到一定有效浓度杀伤效率可成倍提高。上清的Ｈ２Ｏ２产生水平与杀伤转基因细胞作用相一致。ＫDfGC与不同比例的Ｋ５６２e细胞混合时，被１５.0mmol/L D-Ala杀死的细胞比例不超过ＫＤfGC细胞的比较。结论 ＤＡＡＯ／Ｄ－Ａla系统可有效杀伤Ｋ６５２e白血病细胞，在该模型未观察到明显旁观者效应。     

自体外周血CD_34~ 细胞移植治疗二例恶性血液病

移植物中含有肿瘤细胞是自体外周血造血干细胞移植(Ａｕｔｏ ＰＢＳＣＴ)治疗恶性血液病复发的主要因素之一。人造血干 /祖细胞表面表达ＣＤ3 4抗原 ,而许多肿瘤细胞如淋巴瘤、多发性骨髓瘤细胞表面不表达ＣＤ3 4抗原 ,采用纯化的自体ＣＤ3 4 细胞移植治疗淋巴瘤等肿瘤 ,可能达到净化移植物的目的。我们采用纯化的自体外周血ＣＤ3 4 细胞移植治疗恶性血液病 2例取得成功 ,报告如下。病例和方法1　病例　例 1,男 ,13岁 ,非霍奇金淋巴瘤 (ＮＨＬ)ⅢＡ 期 ,原始淋巴细胞性、弥漫型 ,经ＣＨＯＰ(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松 )等方案化…     

20例初诊多发性骨髓瘤血清游离轻链测定及其临床意义

本研究测定多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者血清游离轻链（serum free light chain，sFLC）数值，并与血清总轻链（游离＋结合）比较，探讨sFLC测定在MM患者中的临床意义。应用免疫比浊法测定20例初治MM患者及20例正常对照人群sFLC数值，同期测定患者血清总轻链数值，计算sFLC及血轻链结果的K／h比率，其中18例行免疫固定电泳（immunofixation electrophoresis，IFE）检查。结果表明：20例多发性骨髓瘤患者sFLC数值及K／h比值较正常人群均明显异常（P〈0．01），其敏感性明显高于血清轻链（P〈0．01）。结论：应用免疫比浊法测定sFLC并结合K／h比率在MM诊断中有重要的价值，sFLC检测可作为MM诊断的重要指标之一。     

脾边缘带B细胞淋巴瘤的临床及病理组织学特征

目的：提高对脾边缘带淋巴瘤(SMZL)的认识和诊治水平。方法：对1例男性老年(75岁)SMZL患者的外周血、骨髓及脾脏标本，分别采用光镜、相差显微镜、透射电镜、免疫组织化学染色、RHG显带核型分析及PCR技术研究肿瘤细胞的生物学特征。结果：本例患者肿瘤细胞CD20、CD43、bcl—2表达阳性，肿瘤细胞呈结节状浸润脾脏白髓，致套区和边缘带完全被肿瘤细胞取代。骨髓细胞无异常核型。脾脏有单克隆IgH基因重排，骨髓和外周血未见异常淋巴细胞，无单克隆IgH基因重排。结论：对脾进行性肿大不伴浅表淋巴结肿大患者应疑为SMZL；单克隆IgH基因重排有助于SMZL的诊断，需排除滤泡中心淋巴瘤和套区淋巴瘤；脾切除治疗效果好。     

BLTD方案治疗24例难治复发性多发性骨髓瘤

以沙利度胺为基础的联合化疗是目前治疗难治、复发性多发性骨髓瘤（MM）应用最广泛的方法。我们以BLTD（沙利度胺、克拉霉素、地塞米松）方案治疗24例难治、复发性MM患者取得了较好的效果。     

多发性骨髓瘤新药治疗的不良反应及处理

免疫调节剂和蛋白酶体抑制剂等新药与常规化疗或地塞米松联合治疗,使多发性骨髓瘤的治疗模式发生了根本变化.对年轻病人,新药已用于移植前诱导缓解和移植后巩固及维持治疗.对于老年病人,在马法兰和强的松(MP)方案基础上联合沙利度胺(MPT)或硼替佐米(MPV)是目前的标准治疗.雷利度胺与MP联合(MPR)或与小剂量地塞米松(Rd)联合,可能是另一可供选择的治疗方案.这些新药在提高疗效的同时亦产生特殊的不良反应.对于每个病人,最佳治疗方案应根据随机研究结果并参考病人年龄、合并症和不同方案的预期不良反应来确定.及时进行剂量调整和恰当处理治疗相关毒性可避免过早中断治疗,从而提高疗效.本文介绍新药治疗的主要不良反应和处理方法.     

淋巴母细胞淋巴瘤28例临床病理分析

目的:淋巴母细胞淋巴瘤(LBL)是少见的高度恶性淋巴瘤,WHO新分类法将其归为前体淋巴瘤细胞白血病//淋巴瘤.文中探讨LBL临床和病理学特征. 方法:对28例LBL患者的瘤组织做病理、免疫组化检测,并结合临床进行分析. 结果:患者中位年龄17 ( 10～42)岁.男26例,女2例.首发症状以颈部淋巴结肿大最多见(32.1%),其次胸闷、呼吸困难(28.5%),咳嗽(21.4%).82.1%患者有纵隔肿大,64.2%有骨髓侵犯.Ⅲ～Ⅳ期21例( 76.0% ),T-LBL 26例,B-LBL 2例.TdT和CD99阳性率均为81.2%.平均治疗6个周期,中位生存期9.6个月,Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ～Ⅱ期两组患者生存期无显著性差异(P＞0.05).1例进行自体造血干细胞移植者获得长生存,2例中枢神经系统复发者均未进行预防. 结论:LBL以青少年男性多见,有纵隔占位或伴颈部淋巴结肿大者应考虑LBL可能.LBL以T细胞性为主,TdT阴性不能排除LBL诊断.临床分期与预后未见明显相关.大剂量化疗和造血干细胞移植可能是延长生存期的关键,预防中枢神经系统(CNS)复发很有必要.     

DBT方案与VAD方案治疗复发性难治多发性骨髓瘤的对比研究

目的研究DBT方案与VAD方案治疗复发、难治性MM的近期疗效，有效生存率。方法按随机抽样将65例复发、难治性MM分为二组：DBT组（35例），采用DBT方案治疗；VAD组（30例），采用VAD方案治疗，并观察各组的疗效、有效生存率。结果二组CR、达PR的平均疗效程数比较差异非常显著（P＜0．01），进展率、达PR的中位时间、1年及18个月EPS有显著性差异（P＜0．05），主要观察指标DBT组明显优于VAD组。结论DBT组在近期疗效、有效生存率及完全缓解率等方法均优于VAD组，其毒副作者轻，是治疗复发、难治性MM的理想方法之一。     

嗅神经母细胞瘤骨髓转移临床及形态学特征(附1例报告)

目的:探讨嗅神经母细胞瘤(ONB)骨髓转移的细胞形态学特征,并复习ONB相关文献.方法:对1例经病理组织学确诊为ONB骨髓转移的患者,行血象、骨髓象和细胞化学染色分析,并对骨髓象与病理结果进行比较.结果:血象可见贫血及血小板减少,外周血涂片见瘤细胞、原粒、幼粒及幼红细胞.骨髓象示瘤细胞增生明显活跃,散在或成团分布,胞体较为均一中等大小,类圆或不规则形;胞浆量中等或丰富,色蓝,有或无少许细小红色颗粒,空泡易见且常近边缘分布,浆边缘易见日珥状突起;胞核深染,圆或类圆形,可见双核及多核,核染色质细致或粗颗粒状均匀分布,核仁模糊或可见,淡蓝色.裸核常见.可见多个瘤细胞聚集并呈放射状环形排列,形成菊形团结构.瘤细胞POX染色全阴性.结论:ONB是罕见的神经源性恶性肿瘤,起病隐匿,当外周血出现至少一系减低或可见幼粒或幼红细胞,应考虑肿瘤骨髓转移的可能性,及时行骨髓细胞形态学检查以明确诊断并确定分期及肿瘤负荷,可为临床治疗及预后提供可靠依据.     

D-氨基酸氧化酶/D-丙氨酸系统杀伤K562e细胞的作用机制探讨

目的:探讨D-氨基酸氧化酶( DAAO)/D-丙氨酸(D-Ala)系统用作自杀基因治疗白血病的作用机制. 方法:[ HT5"SS〗以D-Ala杀伤稳定表达DAAO和绿荧光蛋白(GFP)的高致瘤性K562e单克隆细胞K DfGd、KDfGC,应用MTT法检测细胞存活率,并用酚红氧化法测定培养上清H2O 2和Lowry法测定细胞蛋白数量,流式细胞仪测定细胞GFP的荧光强度.结果:在25 mmol/L D-Ala作用下24 h即可完全杀死KDfGd细胞,当 D-Ala为20 mmol/L时延长作用时间至48 h,杀伤率由64％增加至96.8％,而D -Ala≤15 mmol/L时杀伤率增加不明显.低于20 mmol/L,D-Ala 对K562e几乎无杀伤作用.培养上清的H2O2变化与杀伤转基因细胞作用相一致.结论:DAAO/D-Ala系统可能是通过产生H2O2发挥杀伤转基因K562e白血病细胞的作用 .