黄芪甲苷对成纤维细胞的毒性研究

目的探索黄芪甲苷（astragaloside-Ⅳ, AS-Ⅳ）对小鼠成纤维细胞L929的毒性及影响机制, 为AS-Ⅳ在皮肤创伤治疗中的应用提供实验依据。方法体外培养L929细胞, 在倒置显微镜下观察各组细胞形态, 采用CCK8检测细胞增殖, Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡, Western blotting检测细胞内cleaved Caspase-3和γ-H2AX蛋白表达, 细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果与Control组相比, 30、60、120 μmol/L的AS-Ⅳ处理L929细胞12 h、24 h, 随给药浓度及给药时间增加, 圆形细胞逐渐增多, 悬浮细胞增多, 死亡细胞逐渐增多。30、60、90、120 μmol/L AS-Ⅳ处理L929细胞12 h和24 h, 其OD值均低于Control组（P < 0.05~P < 0.01）; 在同一处理时间, 随着给药浓度增加, 其OD值逐渐降低（P < 0.05~P < 0.01）; 同一浓度AS-IV处理L929细胞12 h和24 h, 其OD值均低于处理6 h（P < 0.05~P < 0.01）。30、60、120 μmol/L AS-Ⅳ干预L929细胞24 h, 细胞凋亡率均高于Control组（P < 0.05~P < 0.01）。与Control组相比, 60 μmol/L AS-Ⅳ干预L929细胞6 h、12 h、24 h均能升高细胞内cleaved Caspase-3及γ-H2AX蛋白表达（P < 0.05~P < 0.01）; 与Control组相比, 30、60、120 μmol/L AS-Ⅳ处理L929细胞12 h均能升高细胞内γ-H2AX和cleaved Caspase-3蛋白表达（P < 0.05~P < 0.01）。与Control组相比, 30、60、120 μmol/L AS-Ⅳ干预L929细胞12 h及24 h, 相对迁移率均下降（P < 0.05~P < 0.01）。结论AS-Ⅳ浓度大于30 μmol/L时能抑制L929细胞增殖、迁移, 诱导其凋亡。