黄芪甲苷对长波紫外线损伤人真皮成纤维细胞的保护作用

目的观察长波紫外线（UVA）照射所致人真皮成纤维细胞损伤及黄芪甲苷预处理对细胞的保护作用。方法用20μg/ml黄芪甲苷预处理培养人成纤维细胞,2h后以5、10J/cm2剂量的UVA照射细胞并继续培养24h,使用四甲基偶氮唑蓝还原（MTT）法检测细胞活性,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-6和TNF-α的分泌量,比色法检测细胞上清液中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）含量的变化。结果黄芪甲苷对培养的成纤维细胞无明显毒性;UVA照射24h后,成纤维细胞出现增殖活性下降,IL-6和TNF-α分泌量增加,GSH-Px和CAT活力明显下降,黄芪甲苷处理则可抑制上述改变（均P〈0.05）。结论黄芪甲苷预处理可明显抑制UVA照射引起的成纤维细胞活性下降,其机制可能与其有效抑制炎性细胞因子分泌和增强细胞抗氧化能力有关。     

浅谈黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞增生和凋亡的影响

探讨分析黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞增生和凋亡的影响。方法：选取近年来我院皮肤科收治的2例中年男性患者及1例老年男性患者作为研究对象,采集其中1例中年男性的面部皱纹皮肤、另外1例中年男性的面部无皱纹皮肤及老年男性的面部皮肤作为样本,分别采用不同浓度的黄芪甲苷溶液对其进行体外培养,检测对比24h后、72h后及120h后皮肤成纤维细胞的增生率和凋亡率,并将对比的结果及3例患者的临床资料进行回顾性的分析。结果：当黄芪甲苷的浓度较低时（5～20μg/ml）,具有促进人皮肤成纤维细胞增生的作用,尤其当浓度为10μg/ml时的效果最为明显,明显优于DMSO组（72h后及120h后）,差异显著（P＜0.05）,具有统计学意义。当黄芪甲苷的浓度为10μg/ml时,皱纹组样本细胞的凋亡率由70.2%下降至24.7%（培养120h后）,下降幅度明显,差异显著（P＜0.05）,具有统计学意义;非皱纹组样本细胞的凋亡率由71.0%下降至29.7%（培养120h后）,下降幅度明显,差异显著（P＜0.05）,具有统计学意义;而老年组样本细胞的凋亡率则无明显下降,差异不显著（P＞0.05）,不具有统计学意义。结论：较低浓度的黄芪甲苷不仅能改善人皮肤成纤维细胞的活性,促进其增生,还能有效地抑制细胞的凋亡。     

黄芪甲苷对人成纤维细胞光老化的抑制作用

目的：观察黄芪甲苷对长波紫外线（ultraviolet A,UVA）辐射导致的人成纤维细胞衰老的抑制作用,以及对基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）等老化相关基因表达的影响。方法：分离培养人原代成纤维细胞,将亚融合状态的培养细胞分为空白对照组、黄芪甲苷组、UVA组和UVA＋黄芪甲苷组,以10J/cm2UVA进行照射,并加入20μg/mL黄芪甲苷干预处理。采用组织化学染色法检测衰老相关β半乳糖苷酶表达,以酶联免疫吸附法检测上清液中转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）的含量,实时聚合酶链反应法检测MMP-1和TIMP-1的mRNA表达水平变化。结果：空白对照组及黄芪甲苷组β半乳糖苷酶阳性细胞均较低,UVA组β半乳糖苷酶阳性细胞数则显著升高,加入黄芪甲苷处理可使β半乳糖苷酶阳性细胞比率明显降低（P〈0.05）。黄芪甲苷处理可以促进成纤维细胞分泌TGF-β1;UVA照射成纤维细胞后TGF-β1分泌量明显降低,UVA照射前加入黄芪甲苷可增加TGF-β1分泌量（P〈0.05）。此外,UVA能够诱导MMP-1和TIMP-1的mRNA表达水平升高,而黄芪甲苷可在一定程度上抑制MMP-1mRNA表达,并诱导TIMP-1mRNA表达（P〈0.05）。结论：黄芪甲苷可有效延缓人成纤维细胞光老化进程,其机制可能与促进TGF分泌和抑制胶原降解相关。     

黄芪甲苷对大鼠骨骺干细胞的增殖及生物学特性的影响

目的 探究黄芪甲苷对大鼠骨骺干细胞的增殖及生物学特性的作用影响。方法 将新生SD大鼠离体培养获取大鼠骨骺干细胞,选择黄芪甲苷对第3代骨骺干细胞进行干预诱导,体外培养,在倒置显微镜下分别观察实验组和对照组的细胞生长情况、记录细胞贴壁情况及时间、细胞形态变化及增殖情况。采用免疫组化Ⅱ型胶原单克隆抗体染色方法,检测诱导后细胞的生物学特性,MTT法检测细胞增殖活性。结果 经黄芪甲苷（100ug/ml ,3ml/d）干预诱导后,在倒置显微镜下可观察到实验组细胞增殖速度加快(对照组细胞群体倍增时间为30.17h ,实验组为23.20h),Ⅱ型胶原单克隆抗体染色表达阳性(实验组强于对照组),第6天MTT法检测出实验组od值(0.612+0.151)明显高于对照组(0.517+0.153)。结论 黄芪甲苷具有促进骨骺干细胞的增殖作用。经黄芪甲苷诱导培养的骨骺干细胞可以正常地分泌特征性基质,并保持骨骺干细胞的生物学特性。     

黄芪甲苷抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用和机制研究

目的探讨黄芪甲苷（AS- IV）抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用及其机制,为糖尿病肾病的治疗开辟新途径。方法将体重180~220g健康雄性SD大鼠按配伍法分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病AS- IV治疗组,每组10只,链脲霉素（STZ）腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型,糖尿病AS- IV治疗组予AS- IV 10mg/（kg·d）治疗,共8周;糖尿病组予等量1%CMC混悬液;正常对照组不予处理。第8周末测量大鼠体重、24h尿白蛋白、血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、ALT、血尿素氮、肌酐水平;PAS、Masson染色,光镜观察肾脏病理变化;肾母细胞瘤基因1（WT-1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,TUNEL染色观察足细胞凋亡,real- time PCR及Western blot测大鼠肾皮质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖、HbA1c和24h尿白蛋白增高,肾小球足细胞数量减少,系膜增生,足细胞凋亡增加,Bcl-2及其mRNA表达下调,Bax及其mRNA表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。AS- IV可显著改善糖尿病大鼠蛋白尿,抑制肾小球足细胞数目减少、系膜区增生、足细胞凋亡,上调Bcl-2表达,抑制Bax表达。结论 AS- IV对早期糖尿病大鼠足细胞具有保护作用,可能与其调节凋亡蛋白Bcl-2和Bax,抑制足细胞凋亡相关。     

黄芪甲苷药理作用研究进展

中国药典规定黄芪（ Radix Astragali ）为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根［1］,味甘,微温,归脾、肺经,具有健脾补中,补气固表、升阳举陷、利尿排毒、排脓、敛疮生肌等功效,成为中医临床常用补益中药。现代研究发现黄芪中的主要活性成分为黄芪多糖、黄芪皂苷和黄芪异黄酮,目前主要采用黄芪皂苷中的黄芪甲苷作为评价黄芪药材质量优劣的标准。临床和实验研究发现黄芪甲苷具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降糖和改善心血管疾病等广泛的生物活性,本文将对黄芪甲苷最新药理作用作一综述,冀望有助于黄芪甲苷的进一步研究。     

HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的实验研究

目的研究复方黄芪口服液中黄芪甲苷的HPLC-ELSD测定方法。方法采用蒸发光散射检测器(ELSD)对复方黄芪口服液中的黄芪甲苷进行HPLC分析。色谱柱:AlltechC18柱(5μm,250×4.6mm);流动相:乙腈-水(36:64);流速:1.0ml/min;漂移管的温度为110℃,雾化气流速为2.3L/min。结果此方法线性良好,线性范围为0.997～15.95μg,R=0.9994;平均加样回收率为95.4%,RSD为4.2%。结论此方法简便快捷,精密度、准确性、重现性均能满足质量控制的要求,是一种比较理想的复方黄芪口服液中黄芪甲苷含量的测定方法。     

正交法优化黄芪中黄芪甲苷提取工艺研究

目的筛选黄芪甲苷提取的最佳工艺组成。方法以药材粒径(A)、浸泡时间(B)、提取次数(C)为3个因素,每个因素取3个水平,选用L9(3^4)正交表,以黄芪甲苷的含量为指标进行立交试验,筛选最佳工艺组成。结果最佳工艺组成为药材粒径为40目,浸泡时间6h,提取次数3次。结论本试验为优化黄芪中有效成分的提取工艺条件提供了参考依据。     

HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量

目的 建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法.方法 色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水＝1∶2;流速为0.8ml/min;检测波长为205 nm;速度为0.4mm/min.灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量,平均回收率为96.1%,RSD为2.15%. 结果样品浓度在0.01～0.2mg/ml之间与峰面积成良好的线性关系. 结论本方法的重复性好、精密度高、稳定性强.     

黄芪甲苷对血管内皮细胞的作用研究进展

黄芪的主要有效成分黄芪甲苷对血管具有多种作用,为更好地开发利用黄芪甲苷,亦为临床血管实践提出充分理论依据,本文就黄芪甲苷对血管内皮细胞的作用进行综述。     

HPLC-ELSD测定黄芪生脉饮中黄芪甲苷的含量

黄芪生脉饮由黄芪、党参、麦冬、五味子组成,具有益气滋阴,养心补肺之功,临床用于治疗气阴两虚、心悸气短之冠心病患者.其中黄芪为处方中君药,黄芪甲苷为其主要有效成分之一,本研究采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定黄芪甲苷的含量,取得了理想的检测结果.     

黄芪甲苷对PC12细胞缺糖缺氧损伤的保护作用

目的：探究黄芪甲苷对PC12细胞缺糖缺氧损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法：体外培养PC12细胞,应用无糖Earle’s稀释Na2S2O4建立缺糖缺氧模型,尼莫地平做阳性对照,使用不同浓度的黄芪甲苷进行预保护。显微镜下观察细胞形态差异;以MTT法测定细胞活力;酶标法测定上清液中LDH含量;Western-blot法测定Bcl-2与Bax蛋白表达量。结果：黄芪甲苷能够提高PC12细胞在缺糖缺氧环境下的细胞存活率,降低LDH漏出量;能够增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2比值。结论：黄芪甲苷对PC12细胞的缺糖缺氧损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制细胞凋亡有关。     

黄芪甲苷通过抑制MerTK缓解阿霉素引起的心脏毒性

目的:探讨黄芪甲苷对阿霉素诱导的心肌损伤的作用及机制.方法:6周龄ICR雄性小鼠随机分为对照组、阿霉素组、阿霉素+黄芪甲苷组.对照组给予单次腹腔注射0.9％氯化钠溶液,其余组均给予单次腹腔注射20 mg/kg阿霉素造模.阿霉素+黄芪甲苷80 mg/kg组行每天1次黄芪甲苷80 mg/kg灌胃,其余组给予0.5％羧甲基纤...     

黄芪甲苷治疗糖尿病及其并发症药理作用研究

黄芪甲苷为中药黄芪的活性成分,具有显著的抗炎、抗氧化、保护神经等作用,其应用于糖尿病治疗中,可控制患者血糖与血脂水平,抑制氧化应激与炎症反应,改善糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变等并发症。故本文则主要对黄芪甲苷治疗糖尿病及其并发症的药理作用进行阐述,其目的在于为临床研究提供相关依据。     

成纤维细胞激活蛋白对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的通过体外实验研究成纤维细胞激活蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人类卵巢癌细胞系0VCAR3,用不同浓度的FAP(0、0.0625、0.125、0.25、0.5及1μg/mL)处理24 h或48 h后,通过MTT法检测FAP对卵巢癌细胞增殖的影响。0VCAR3用不同浓度的FAP(0、0.0625、0.25及1μg/mL)处理48 h后,通过流式细胞术检测FAP对OVCAR3细胞凋亡的影响。结果 MTT法示FAP可促进卵巢癌细胞OVCAR3增殖,其作用呈时间、剂量依赖性(P0.05);流式细胞术示FAP对卵巢癌细胞系OVCAR3的细胞凋亡率并无明显影响(P0.05)。结论 FAP可促进卵巢癌细胞系OVCAR3的增殖,对其凋亡水平无明显影响。     

HPLC-ELSD法测定黄芪药材中黄芪甲苷

黄芪为常用补气药，是我国重要的传统药材。《中国药典》规定，药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus，membranaceus （Fisch．）Bunge var．nongholicus （Bunge）Hsiao及膜荚黄芪A．membranaceus（Fiseh．）Bunge的干燥根。黄芪中含有多种化学成分，如皂苷类、黄酮类、木脂素类、氨基酸类、多糖类及多种微量元素等。研究表明黄芪甲苷具有降血压、镇静、镇痛及抗氧化等作用，是黄芪的主要活性成分，因此黄芪甲苷常作为指标性成分应用于黄芪药材的质量监控。我国黄芪药用资源丰富，在华北大部分省区均有大面积种植。