携带TPH-2基因小分子干扰RNA表达载体的构建与鉴定

目的 构建携带色氨酸羟化酶(TPH)-2基因的小分子干扰RNA表达载体.方法 设计并合成shRNA TPH-2对应的两条互补的寡核苷酸链,pU6-CMV-GFP质粒经Age Ⅰ和EcoRⅠ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,目的 质粒转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落聚合酶链反应(PCR)鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析.结果 经PCR、酶切及测序证实,pU6-CMV-GFP-TPH-2 shRNA表达载体片段大小为332 bp,其中插入的片段序列和位点与预期完全一致.结论 实验成功构建pU6-CMV-GFP-TPH2 shRNA表达载体.     

不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响

目的 比较不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响.方法 60只雄性SD大鼠,体重250～280 g,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、失血性休克-内毒素组(SL组)、乳酸钠林格氏液组(LR组)、7.5%氯化钠组(HS组)和羟乙基淀粉(HES)130/0.4组(HES组).分为院前期(90 min)、院内复苏期(1 h)和复苏后观察期(3.5 h).院前期:SL组、LR组、HS组和HES组颈总动脉放血建立失血性休克模型(维持MAP 35～45 mm Hg 60 min)后,气管内注射内毒素2mg/kg,同时断尾,注射内毒素后即刻分别经30 min静脉输注3倍放血量的乳酸钠林格氏液、7.5%氯化钠4ml/kg和等放血量的6%HES 130/0.4;院内复苏期:结扎尾部断端止血,在1 h内回输全部放出的血液及等放血量的0.9%氯化钠;复苏后观察期3.5 h时采集动脉血样,进行血气分析,计算肺组织湿/干重量比(W/D)和肺通透指数(PPI),测定肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度和肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5mRNA表达水平,光镜下观察肺组织病理学结果,记录大鼠存活情况.结果 与SL组和LR组比较,HS组和HES组MAP、pH值、PaO2和SaO2升高,血乳酸浓度、BE、W/D、PPI和BALF蛋白浓度降低,HS组肺组织AQP-1 mRNA表达上调,HES组肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05或0.01);与HS组比较,HES组W/D降低,AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻.结论 6%HES 130/0.4和7.5%氯化钠可减轻失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤,6%HES 130/0.4的效果更好,其机制与抑制AQP-1和(或)AQP-5表达下调有关;而乳酸钠林格氏液对其无效.     

术前情绪状态对患者术后睡眠状况的影响研究

目的研究腹式全子宫切除手术患者的术前情绪状态对术后睡眠状况的影响。方法选取行腹式全子宫切除手术的患者80例,根据术前焦虑自评量表的结果将患者分为情绪正常组（N组）和情绪焦虑组（A组）。在术后第7d,使用匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）量表对患者进行睡眠状况调查。结果 46.25%的患者术前存在焦虑情绪。与情绪正常组相比,情绪焦虑组患者的睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物、日间功能障碍和PSQI总分均显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论接受子宫切除手术的患者常出现焦虑情绪,而术前的紧张情绪可影响患者的术后睡眠。     

不同液体复苏对未控制失血性休克大鼠肺损伤及肺水通道蛋白表达的影响

目的 观察不同液体复苏对未控制失血性休克大鼠肺损伤和肺水通道蛋白l(AQP1)和AQP5表达的影响.方法 SD大鼠被随机分为假手术组(C组)、无液体复苏组(NF组)、乳酸林格液组(LRS组)、高渗盐水组(HS组)和羟乙基淀粉组(HES)5组,每组12只.建立未控制失血性休克大鼠模型,模拟临床分为4期;动态观察各期的平均动脉压(MAP)变化.①失血性休克期(时间为60 min):在15 min内将MAP降至40 mm Hg(1mm Hg=0.133 kPa)并维持60 min;然后向气管内注射内毒素2 mg/kg,并用断尾法造成大鼠未控制失血性休克.②液体复苏期(时间为30 min):LRS、HS、HES组分别用3倍放血量的LRs、4 ml/kg的7.5%NaCl和1倍放血量的6%HES 130/0.4进行复苏,C组和NF组不处理.③综合复苏期(时间为1 h):在1 h内回输全部失血及1:1失血量的生理盐水.④复苏后观察期:输血、输液结束后继续观察3.5 h. 实验结束后测定肺组织湿/干重(W/D)比值;用免疫组化测定肺组织AQPl和AQP5表达,用苏木素一伊红(HE)染色,光镜下观察肺损伤程度.结果 在C组和HES组,肺血管内皮细胞AQP1和肺泡上皮AQP5均呈阳性表达;HS组仅AQP1呈阳性表达,AQP5则呈微弱表达;NF组和LRS组AQP1、AQP5均呈微弱表达.各组MAP、肺W/D比值和肺组织损伤程度比较显示,HS组和HES组显著优于NF组和LRS组(P<0.05或P<0.01).结论 遭受"二次打击"失血性休克大鼠并发肺损伤时,肺AQP1和AQP5表达下调;采用6%HES 130/0.4进行休克复苏可有效抑制AQP1和AQP5下调,并使肺损伤明显减轻;采用7.5%NaCI复苏仅能抑制AQPl表达下调和在一定程度上减轻肺水肿;而采用LRS复苏既不能保持AQP1、AQP5的表达,也不能有效防止肺损伤的发生.     

丙泊酚对脂多糖诱导的大鼠肺微血管内皮细胞AQP-1表达的影响

目的 观察丙泊酚对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1（AQP-1）表达的影响，阐明其减轻急性肺损伤的可能机制。方法 大鼠肺微血管内皮细胞体外培养后随机分为7组，每组5份：①C组（对照组）；②LPS0.1组（脂多糖终浓度为0、1μg／mL）；③LPS，组（脂多糖终浓度为1μg/mL）；④LPS10组（脂多糖终浓度为10μg／mL）；⑤P4（丙泊酚终浓度为4μg／mL＋LPS10组；⑥P40（丙泊酚终浓度为40μg／mL）＋LPS10组；⑦L40（脂质溶剂的体积和浓度同P40＋LPS10组。按上述分组，在相应组中分别加入不同浓度丙泊酚、等量脂肪乳剂或培养液，于37℃5％CO2培养箱中孵育30min，再在相应组中加入LPS,置于培养箱继续孵育6h。收集细胞并测定下列指标：AQP一1（免疫细胞化学和Westernblotting）和蛋白质渗透压反射系数（σ）。结果 LPS可浓度依赖性减少内皮细胞AQP-1的表达和（值P〈0．01）。与LPS10组比较，P4＋LPS10及P40＋LPS10两组能显著增加内皮细胞AQP-1的表达和（值P〈0．01），而140＋LPS10组变化不明显（P〉0．05）。结论 丙泊酚可通过调节AQP-1的表达和盯变化，从而减轻ALI／ARDS肺水肿的形成。     

心血管手术麻醉管理中食管超声监测的应用及意义

目的：评价经食管超声心动图在心脏外科手术中的临床应用价值。方法接受心脏外科手术的心脏病患者168例,在麻醉后,对所有患者进行经食管超声心动图连续检查,监测手术过程并评价手术效果。结果77例先天性心脏病矫治患者中,16例室间隔缺损在术中食管超声引导下行小切口经右心室穿刺封堵术,1例患儿在麻醉后手术前纠正误诊;45例瓣膜置换患者中,13例联合瓣膜病变患者参照食管超声结果最终确定手术方案,1例二尖瓣置换术后三维食管超声及时发现卡瓣;1例拟行带瓣升主动脉人造血管置换术患者结合手术前食管超声结果改变术式;1例肝癌合并上腔静脉取癌栓患者在食管超声指引下非体外循环完成手术。结论经食管超声心动图用于心脏外科围术期监测,可及时发现围术期手术相关问题、指引手术操作、提高手术成功率。     

重复注射氯胺酮对新生乳鼠血气分析的影响

目的 研究重复注射氯胺酮对新生乳鼠血气分析的影响.方法 12只新生7 d 的SD大鼠随机分为两组,每组6只,分别为对照组和氯胺酮组.氯胺酮组:腹腔重复注射20 mg/kg氯胺酮,间隔90 min,共计5次.对照组:在相应时间点腹腔注射等体积的生理盐水.最后一次给药后10 min,经左心室采血行血气分析检测.结果 对照组和氯胺酮组大鼠的pH值分别为7.43±0.05和7.41±0.01,PaCO2分别为(40.73 ±3.73) mmHg和(47.05 ±2.87) mmHg,PaO2分别为(86.00 ±8.66)mmHg和(84.25±3.34) mmHg,SaO2分别为(96.50±1.50)%和(96.25±0.43)%,均差异无统计学意义(P>0.05).结论 重复注射20 mg/kg氯胺酮不会引起新生SD大鼠缺氧和二氧化碳蓄积.     

氯胺酮对乳鼠海马CA3区神经元凋亡及NMDAR-2B表达的影响

目的探讨氯胺酮对新生大鼠海马CA3区海马神经元凋亡及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)-2B表达的影响。方法将12只新生7 d的SD大鼠随机分为对照组和氯胺酮组,每组6只。氯胺酮组腹腔注射氯胺酮20 mg/kg,间隔90 min再次注射,共计5次;对照组于相应时间点腹腔注射等体积的生理盐水。24 h后灌注固定,断头取脑;TUNNEL法检测海马神经元凋亡情况;免疫组化法检测海马神经元CA3区NMDAR-2B表达。结果氯胺酮组凋亡细胞密度和NMDAR-2B表达均明显高于对照组(P均<0.05)。结论氯胺酮可引起新生大鼠海马神经元凋亡增加,其机制可能与NMDA受体表达上调有关。     

预防性镇痛在腹式全宫切除术患者中的应用研究

目的研究预防性使用氟比洛芬酯对术后硬膜外自控镇痛效应的影响。方法选取行腹式全子宫切除手术的患者40例,随机分为常规镇痛组(C组)和预防性镇痛组(P组),每组20例。P组患者在切皮前15min和关腹前15min分别静脉注射氟比洛芬酯50mg。手术结束前30min,两组患者均硬膜外注射镇痛首量,同时接上镇痛泵。观察并记录患者的生命体征、VAS评分、镇静评分和不良反应的发生情况。结果两组患者的VAS疼痛评分、Ramsay镇静评分和按压次数差异均无统计学意义(P>0.05)。与C组相比,P组恶心评级显著降低(P>0.05)。两组患者均未出现呕吐的现象。C组有2例患者出现瘙痒,而P组无瘙痒病例出现。与C组相比,P组吗啡用量显著减少。结论氟比洛芬酯在腹式全子宫切除手术患者中用于预防性镇痛是安全有效的,并可减少术后硬膜外自控镇痛吗啡的用量,减少恶心、瘙痒等不良反应的发生。