IL-24 cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

目的 建立转染人白细胞介素-24(hIL-24)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-24的表达情况.方法 将携带人白细胞介素-24的质粒peDNA3.1( )-hIL-24转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Western blot和ELISA法对hIL-24的表达进行检测.结果 IL-24基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达.RT-PCR电泳结果显示hIL-24基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-24的含量为162.8±15.4 pg/mL,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-24.结论 hIL-24基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达.     

Survivin在鼻咽癌中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot免疫印迹法,检测2株鼻咽癌细胞株、25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中SurvivinmRNA和蛋白的表达。结果Survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达。2株鼻咽癌细胞株、80.0%的鼻咽癌组织和40.0%的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中均可检测到Survivin基因mRNA和蛋白的表达,SurvivinmRNA在鼻咽癌组织中的表达较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高,其吸光度(A)比值分别为0.83±0.22和0.29±0.14,差异有显著性(P<0.01);Survivin蛋白在鼻咽癌中的表达同样高于对侧鼻咽部黏膜组织,其A值分别为33680±1466和17925±1908,差异有显著性(P<0.01)。Ⅲ+Ⅳ的鼻咽癌病人中Survivin表达强度明显高于Ⅰ+Ⅱ的鼻咽癌病人(P<0.05)。鼻咽癌组织中Survivin阳性表达与患者的年龄、性别、鼻咽癌细胞的分化程度及有无淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论Survivin的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用,检测Survivin在鼻咽癌中的表达对鼻咽癌的诊断、临床分期有一定意义。     

IL-15cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

目的建立转人白细胞介素-15(hIL-15)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-15的表达情况。方法将携带人白细胞介素-15的质粒pcDNA3.1( )-hIL-15转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Westernblot和ELISA法对hIL-15的表达进行检测。结果IL-15基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达。RT-PCR电泳结果显示hIL-15基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-15的含量为(185.0±12.2)pg/ml,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-15。结论hIL-15基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达。     

人IL-15基因在CHO细胞中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用

目的在CHO细胞中进行人白细胞介素-15基因真核表达载体的稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-15对鼻咽癌细胞体外增殖的抑制作用。方法将真核表达载体pcDNA3.1( )-hIL-15转染CHO细胞,G418筛选稳定表达株;采用RT-PCR和ELISA法对hIL-15的表达进行检测,MTT法检测rhIL-15对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z体外增殖的抑制效应。结果人IL-15在CHO细胞中获得稳定表达,RT-PCR显示细胞的rhIL-15mRNA呈现高水平,ELISA检测到rhIL-15在细胞中的分泌性表达,浓度达(3.08±0.23)μg/ml,且所表达的人IL-15具有较强的抑制CNE-2Z鼻咽癌细胞增殖的作用。结论成功地在CHO细胞中获得了hIL-15蛋白的高效、稳定表达,重组表达蛋白rhIL-15体外能有效地抑制鼻咽癌细胞增殖,为进一步研究人IL-15抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。     

凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot免疫印迹法,检测25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中SurvivinmR-NA和蛋白的表达。结果:Survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达。80·0%(20/25)的鼻咽癌组织和40·0%(10/25)的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中均可检测到Survivin基因mRNA和蛋白的表达,SurvivinmRNA在鼻咽癌组织中的表达较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高,其吸光度(A)比值分别为0·83±0·22和0·29±0·14,差异有统计学意义,P=0·00;Survivin蛋白在鼻咽癌中的表达同样高于对侧鼻咽部黏膜组织,其A值分别为33680±1466和17925±1908,差异有统计学意义,P=0·00。Ⅲ Ⅳ期的鼻咽癌患者中Survivin表达强度明显高于Ⅰ Ⅱ期的鼻咽癌患者,P<0·05。鼻咽癌组织中Survivin表达强度与患者的年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移无相关性,P>0·05。结论:Survivin的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用,检测Survivin在鼻咽癌中的表达对鼻咽癌的诊断、临床分期有一定意义。     

复杂性手部离断再植术后的护理体会

由机械冲压、碾搓或绞榨所致手部离断再植术后,再植组织的血循环重建和组织创伤性反应均与一般刃性手部离断再植术后不同.1999年7月至2002年6月,我院共行13例复杂性手部离断再植术,通过术后严密的观察与护理,患者恢复良好.现将护理体会报告如下.     

耳源性脑脓肿20例临床分析

目的：通过对已明确诊断20例耳源性脑脓肿患者的临床表现、X线检查及治疗转归进行临床评估分析。使急诊医师提高对耳源性脑脓肿的认识。方法：对耳源性脑脓肿患者的临床资料进行回顾性分析。结果：耳源性脑脓肿和其它脑脓肿在病因、临床表现、X线检查等多方面都有不同的特点。结论：耳源性脑脓肿临床症状常不典型，定位症状出现较晚或不出现，易延误病情或漏诊，应结合其临床特点及X线检查早期明确诊断、早期治疗。     

HPLC法测定复方罗布麻片中绿原酸和蒙花苷的含量

目的建立HPLC法测定复方罗布麻片中绿原酸和蒙花苷的含量。方法采用KromasilC18色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30℃,绿原酸的紫外检测波长为326nm,蒙花苷的紫外检测波长为334nm,流速为1.0mL·min^-1。结果绿原酸进样量在0.1629～0.8144μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998（n=5）,平均回收率为99.24%,RSD为1.27%（n=6）;蒙花苷进样量在0.0782～0.3912μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998（n=5）,平均回收率为98.02%,RSD=1.27%（n=6）。结论本法操作简便,切实可行,获得了满意的测定结果。     

手部多指离断再植术后的护理

目的 本文总结了断指再植术后的护理及观察要点,以提高断指再植的成活率.方法 对36例多指离断患者进行护理和观察.结果 1例患指感染坏死,2例患指栓塞坏死,其余33例成活.结论 细心的观察护理和适当的功能锻炼是断指再植获得满意疗效的重要保障.     

艾司洛尔防治小儿氯胺酮麻醉时的心血管副反应

<正> 氯胺酮以其镇痛迅速完善、应用方便等优点在小儿短小手术中得到广泛应用,但其心率增快、血压升高等心血管兴奋作用不可忽视。近来我院试用短效选择β_1受体阻滞药艾司洛尔防治这种心血管副反应,效果满意。