IL-15cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

目的建立转人白细胞介素-15(hIL-15)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-15的表达情况。方法将携带人白细胞介素-15的质粒pcDNA3.1( )-hIL-15转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Westernblot和ELISA法对hIL-15的表达进行检测。结果IL-15基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达。RT-PCR电泳结果显示hIL-15基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-15的含量为(185.0±12.2)pg/ml,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-15。结论hIL-15基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达。     

IL-24 cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

目的 建立转染人白细胞介素-24(hIL-24)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-24的表达情况.方法 将携带人白细胞介素-24的质粒peDNA3.1( )-hIL-24转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Western blot和ELISA法对hIL-24的表达进行检测.结果 IL-24基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达.RT-PCR电泳结果显示hIL-24基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-24的含量为162.8±15.4 pg/mL,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-24.结论 hIL-24基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达.     

Survivin在鼻咽癌中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot免疫印迹法,检测2株鼻咽癌细胞株、25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中SurvivinmRNA和蛋白的表达。结果Survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达。2株鼻咽癌细胞株、80.0%的鼻咽癌组织和40.0%的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中均可检测到Survivin基因mRNA和蛋白的表达,SurvivinmRNA在鼻咽癌组织中的表达较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高,其吸光度(A)比值分别为0.83±0.22和0.29±0.14,差异有显著性(P<0.01);Survivin蛋白在鼻咽癌中的表达同样高于对侧鼻咽部黏膜组织,其A值分别为33680±1466和17925±1908,差异有显著性(P<0.01)。Ⅲ+Ⅳ的鼻咽癌病人中Survivin表达强度明显高于Ⅰ+Ⅱ的鼻咽癌病人(P<0.05)。鼻咽癌组织中Survivin阳性表达与患者的年龄、性别、鼻咽癌细胞的分化程度及有无淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论Survivin的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用,检测Survivin在鼻咽癌中的表达对鼻咽癌的诊断、临床分期有一定意义。     

凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot免疫印迹法,检测25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中SurvivinmR-NA和蛋白的表达。结果:Survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达。80·0%(20/25)的鼻咽癌组织和40·0%(10/25)的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中均可检测到Survivin基因mRNA和蛋白的表达,SurvivinmRNA在鼻咽癌组织中的表达较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高,其吸光度(A)比值分别为0·83±0·22和0·29±0·14,差异有统计学意义,P=0·00;Survivin蛋白在鼻咽癌中的表达同样高于对侧鼻咽部黏膜组织,其A值分别为33680±1466和17925±1908,差异有统计学意义,P=0·00。Ⅲ Ⅳ期的鼻咽癌患者中Survivin表达强度明显高于Ⅰ Ⅱ期的鼻咽癌患者,P<0·05。鼻咽癌组织中Survivin表达强度与患者的年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移无相关性,P>0·05。结论:Survivin的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用,检测Survivin在鼻咽癌中的表达对鼻咽癌的诊断、临床分期有一定意义。     

人IL-15基因在CHO细胞中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用

目的在CHO细胞中进行人白细胞介素-15基因真核表达载体的稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-15对鼻咽癌细胞体外增殖的抑制作用。方法将真核表达载体pcDNA3.1( )-hIL-15转染CHO细胞,G418筛选稳定表达株;采用RT-PCR和ELISA法对hIL-15的表达进行检测,MTT法检测rhIL-15对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z体外增殖的抑制效应。结果人IL-15在CHO细胞中获得稳定表达,RT-PCR显示细胞的rhIL-15mRNA呈现高水平,ELISA检测到rhIL-15在细胞中的分泌性表达,浓度达(3.08±0.23)μg/ml,且所表达的人IL-15具有较强的抑制CNE-2Z鼻咽癌细胞增殖的作用。结论成功地在CHO细胞中获得了hIL-15蛋白的高效、稳定表达,重组表达蛋白rhIL-15体外能有效地抑制鼻咽癌细胞增殖,为进一步研究人IL-15抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。     

幽门螺杆菌经ROS通路激活NLRP3炎症复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18

目的:研究幽门螺杆菌(H.pylori)对NLRP3炎症复合体活化的影响及活性氧(ROS)在其中的作用。方法:将THP-1细胞与H.pylori SS1共孵育,于不同时间点收集细胞及上清,ELISA检测细胞上清中IL-1β和IL-18的含量;流式细胞术(FCM)检测胞内ROS的产生;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测细胞中NLRP3、caspase-1 mRNA的表达;Western blot检测细胞中caspase-1活性亚单位p10的表达;检测ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)及NLRP3特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)预处理细胞后相关信号分子的表达。结果:H.pylori SS1能以时间依赖性和剂量依赖性方式诱导THP-1细胞产生IL-1β、IL-18和胞内ROS;H.pylori SS1刺激能使THP-1细胞NLRP3和caspase-1 mRNA转录水平显著升高;NAC及NLRP3-siRNA预处理THP-1细胞能显著降低H.pylori SS1诱导的NLRP3炎症复合体相关成份的表达及细胞因子的分泌。结论:H.pylori SS1株通过ROS途径激活NLRP3炎症复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18,这可能与机体的先天免疫防御及细菌的致病作用相关。     

鼻渊舒口服液在慢性鼻-鼻窦炎鼻内窥镜术围手术期的临床疗效与安全性探讨

目的观察口服鼻渊舒口服液在慢性鼻-鼻窦炎鼻内窥镜术围手术期的临床疗效与安全性探讨。方法选取我院接收的124例慢性鼻-鼻窦炎患者作为本次研究对象,以随机双盲法为依据将所有患者分为观察组和对照组各62例,两组患者均行FESS治疗,同时对照组患者在围术期行常规治疗,观察组患者则行鼻渊舒口服液治疗,比较两组患者的治疗效果。结果两组患者采用不同治疗方式治疗后其治疗总有效率比较有明显差异(P0.05),且观察组患者鼻塞、流脓性鼻涕、嗅觉减退、头面部闷胀沉重感等临床症状的消失率明显高于对照组(P0.05)。结论在给予慢性鼻-鼻窦炎患者FESS治疗的同时配合鼻渊舒口服液治疗可有效的提高治疗效果,缓解患者临床症状,有较高的应用价值,可推广应用。     

射频治疗耳鼻咽喉疾病的临床分析

应用华南牌ＳＨＰ—Ⅱ型射频五官治疗仪 ,治疗耳鼻咽喉疾病 ,共计 12 3例 ,男性 6 8例 ,女性 5 5例 ,年龄最小的 3岁 ,最大的 71岁 ,临床分析如下 :1　疾病分类1)鼻出血 :黎氏区出血 4 4例 ,非黎氏区出血 4例 ,下鼻甲前端出血 1例、鼻底后端外侧壁出血 1例。2 )鼻腔肿物 :鼻中隔小血管瘤 3例、鼻腔内翻性乳头状瘤术后残留 1例。3)慢性鼻性下甲肥大 4例。4 )慢性单纯性鼻炎 12例。5 )过敏性鼻炎 :常年性型 2 1例 ,季节性 9例。6 )鼻前庭肿物 :鼻前庭疣 1例 ,直径0 .4ｃｍ。7)口咽部肿物 :乳头状瘤 3例 ,直径均在 0 .5ｃｍ以内。8)慢性粒性咽…