胃癌原发灶和淋巴结转移灶中锌指蛋白139与肿瘤细胞凋亡和生存素及B细胞淋巴瘤/白血病-2的关系及意义研究

目的 探讨胃癌原发灶和淋巴结转移灶中锌指蛋白139（ZNF139）与肿瘤细胞凋亡、生存素（Survivin）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）的关系及意义。方法 选取2012年1-6月在河北医科大学第四医院外三科行手术切除的35例进展期胃癌患者为研究对象,收集患者胃癌组织及相应的淋巴结转移组织,采用DNA原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡指数（AI）,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测ZNF139、Survivin、Bcl-2 mRNA的相对表达水平,蛋白印迹法（Western blotting）检测ZNF139、Survivin、Bcl-2蛋白表达水平。结果 胃癌原发灶AI（10.8±4.7）高于淋巴结转移灶的（8.7±3.0）（t=-2.176,P=0.039）。淋巴结转移灶ZNF139、Survivin、Bcl-2 mRNA相对表达水平均高于胃癌原发灶（P＜0.05）。淋巴结转移灶ZNF139、Survivin、Bcl-2蛋白表达水平均高于胃癌原发灶（P＜0.05）。胃癌原发灶Survivin mRNA相对表达水平与AI呈负相关（r=-0.517,P=0.001）;淋巴结转移灶ZNF139、Survivin、Bcl-2 mRNA相对表达水平均与AI呈负相关（r=-0.346、-0.467、-0.511,P=0.042、0.005、0.002）。淋巴结转移灶Bcl-2 mRNA相对表达水平与胃癌原发灶Bcl-2 mRNA相对表达水平呈正相关（r=0.791,P＜0.001）。在胃癌原发灶中,ZNF139 mRNA相对表达水平与Bcl-2 mRNA相对表达水平呈正相关（r=0.482,P=0.003）。在淋巴结转移灶中,ZNF139 mRNA相对表达水平与Survivin、Bcl-2 mRNA相对表达水平均呈正相关（r=0.436、0.452,P=0.009、0.006）;Survivin mRNA相对表达水平与Bcl-2 mRNA相对表达水平呈正相关（r=0.465,P=0.005）。结论 胃癌肿瘤细胞在转移过程中抗凋亡能力增强,这可能与ZNF139对部分凋亡相关基因（Survivin、Bcl-2）的调控有关,但这种调控关系在胃癌原发灶和淋巴结转移灶中并不相同。     

芪丹消渴胶囊质量标准研究

目的 制定芪丹消渴胶囊的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）对方中的黄芪、黄连进行定性鉴别,运用高效液相色谱（HPLC）法对制剂中的丹酚酸B进行含量测定。结果 TLC斑点清晰,阴性对照无干扰,分离度良好;丹酚酸B在0.2856～2.856μg范围内与峰面积分值呈良好的线性关系（r=0.9996）,平均加样回收率为99.55%,RSD=0.965%. 结论 所建立的定性定量方法分离度好,重现性好,结果准确,可用于芪丹消渴胶囊的质量控制。     

桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的Meta分析

目的系统评价桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的有效性和安全性。方法计算机检索CNKI、VIP、CBM、万方数据库、PubMed数据库,收集以甲氨蝶呤为对照,观察桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的临床随机对照研究文献。采用循证医学的方法,评价纳入研究的方法学质量,提取有效数据,采用Rev Man 5.3软件对数据进行Meta分析。结果共纳入8篇随机对照试验文献。Meta分析结果显示,桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的总有效率明显优于甲氨蝶呤[RR=1.17,95%CI(1.09,1.25)],差异有统计学意义(P0.01)。在缩短晨僵时间、改善握力,以及减少关节肿胀数、降低类风湿因子水平方面均优于甲氨蝶呤(P0.01),且不良反应发生率低[OR=0.20,95%CI(0.10,0.38),P0.01],但在减少关节压痛数及改善红细胞沉降率方面则较甲氨蝶呤无明显优势。结论桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎疗效较好,且不良反应低于甲氨蝶呤。但由于纳入文献数量较少且质量较低,不可避免地对Meta分析结果造成一定的影响,所以有关结论仍需将来高质量、大样本的双盲随机对照试验提供更高级别的证据。     

不同促渗剂对白芥子散贴剂体外透皮吸收效果的影响

目的:考察氮酮、丙二醇及二者混合物对白芥子散贴剂中延胡索乙素透过量的影响,为该复方的凝胶膏剂研制提供参考。方法:采用改良Franz扩散池,以离体雄性大白兔皮肤为模型,通过HPLC测定延胡索乙素含量,流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调p H 6.0)(60∶40),检测波长280 nm,拟合延胡索乙素透皮吸收的累积透过量,考察不同促渗剂对白芥子散贴剂体外透皮效果的影响。结果:以2%氮酮制备的白芥子散贴剂累积透过量最高;促渗剂合用时以2%氮酮+5%丙二醇促渗作用较好,但其合用效果弱于2%氮酮单用的效果。结论:氮酮能显著提高白芥子散贴剂的透皮吸收效果。     

正交设计法优选银屑灵片中肿节风有效成分的提取工艺

目的建立高效液相色谱同时测定银屑灵片中多种成分含量的方法,采用正交设计法优选银屑灵片中肿节风有效成分的提取工艺。方法以绿原酸、迷迭香酸和落新妇苷为指标,采用正交实验,考察乙醇浓度、提取时间、提取次数等因素的影响,优化提取条件。结果 最佳提取工艺条件为:70%乙醇提取2次,每次提取0.5 h。结论 优选的提取工艺多种有效成分的提取率均较高,适用于生产。     

大鼠口服芍苓消银片后血液中芍药苷、落新妇苷、迷迭香酸、异嗪皮啶、甘草苷的药物动力学研究

芍药苷、落新妇苷、迷迭香酸、异嗪皮啶和甘草苷为芍苓消银片中主要成分,为给其后期剂型及临床用药方案设计奠定基础,该文建立了这5种成分血药浓度含量测定方法并进行大鼠体内药物动力学的研究。血药浓度测定采用HPLC测定,菲罗门C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,甲醇-乙腈-0.05%甲酸梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长275 nm。样品处理采用固相萃取法。大鼠灌胃芍苓消银片浸膏后分别于不同时间采血,测定血药浓度。实验结果显示5种成分可基线分离,芍药苷、异嗪皮啶、落新妇苷、迷迭香酸和甘草苷分别在2.48~248,0.213 6~21.36,0.531~53.1,0.704~70.4,0.253~25.3 mg·L^-1线形关系良好。5种成分均可吸收入血,均为快速吸收、快速消除的模式。该文建立的方法快速、准确,可用于含同类成分的制剂的体内分析,芍苓消银片中主要成分吸收消除较快,适合制备成缓控释制剂,普通制剂可能需要1 d服药4~6次。     

基于网络药理学和分子对接技术的银柴胡解热作用机制探讨

目的 采用网络药理学与分子对接技术探讨银柴胡解热作用的机制。方法 借助中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、中医药整合药理学研究平台（TCMIP）和中药分子机制生物信息学分析工具（BATMAN-TCM）筛选银柴胡活性成分和相关作用靶点;使用GeneCards、OMIM和TTD数据库筛选发热相关靶点;通过STRING数据库构建活性成分靶点与发热疾病靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;利用Cytoscape软件的Network Analysis插件对获得的PPI网络进行拓扑分析,筛选核心节点;使用Venny软件获得银柴胡活性成分靶点、发热疾病靶点和核心节点的交集靶点,并通过进一步的拓扑分析筛选得到关键成分和关键靶点;通过DAVID数据库进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析;利用Schr?dinger软件对关键靶点与对应的关键成分进行分子对接。结果 银柴胡解热关键成分为银柴胡胺D和银柴胡新木质素-β-D-葡萄糖苷A~D,71个关键靶点主要包括促丝裂原活化蛋白激酶10（MAPK10）、蛋白激酶B1（Akt1）、热休克蛋白90AA1（HSP90AA1）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、转化蛋白p21（HRAS）、血管内皮生长因子受体2（KDR）、原癌基因受体酪氨酸激酶（KIT）等;KEGG富集的67条通路主要包括Rap1信号通路、Toll样受体信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、Ras信号通路等;分子对接结果表明,银柴胡新木质素-β-D-葡萄糖苷A与KDR,银柴胡新木质素-β-D-葡萄糖苷C与CDK2、HRAS和HSP90AA1,银柴胡新木质素-β-D-葡萄糖苷D与Akt1、HRAS和KIT具有良好的结合能力。结论 银柴胡解热作用机制可能与抗炎、抗过敏、调节新陈代谢、促进免疫调节等过程有关。     

非肥胖人群基线三酰甘油水平与急性胰腺炎发病风险关系的前瞻性队列研究

背景 近年来高三酰甘油血症作为急性胰腺炎（AP）发病的危险因素逐渐受到重视,目前关于肥胖是否增加AP发病风险尚存在争议,非肥胖人群基线三酰甘油（TG）是否影响AP的发病风险尚无定论。 目的 探讨开滦研究队列非肥胖人群基线TG水平与AP发病风险的关系。 方法 采用前瞻性队列研究方法,以参加开滦（集团）有限责任公司2006—2007年和2008—2009年健康体检、无AP病史和TG资料完整的非肥胖人群为观察队列,研究按基线TG三分位数分为3组。以新发AP事件、死亡或至随访结束（2020-12-31）为随访终点。采用Kaplan-Meier法绘制累积发病率曲线图并用Log-rank法进行组间检验,并采用多因素Cox比例风险回归模型分析不同TG水平对新发AP事件的影响。 结果 共纳入统计分析者102 358例,按基线TG三分位数分为Q1（TG≤0.96 mmol/L）、Q2（0.96 mmol/L相似文献   

银屑灵片中芍药苷和甘草酸的提取工艺

目的:建立高效液相色谱同时测定银屑灵片中芍药苷和甘草酸含量的方法,采用正交设计法优选银屑灵片中芍药及甘草有效成分的提取工艺。方法:以芍药苷和甘草酸为指标,采用正交试验,考察乙醇浓度、提取时间、提取次数等因素的影响,优化提取条件。结果:最佳提取工艺条件为:70%乙醇提取2次、每次提取0.5 h。结论:优选的提取工艺多种有效成分的提取率均较高,适用于生产。     

银屑灵与土茯苓中落新妇苷大鼠体内的 药代动力学比较

目的:建立大鼠体内落新妇苷的SPE-HPLC分析方法,通过复方银屑灵与单味土茯苓中落新妇苷药代动力学参数的比较,探讨配伍对落新妇苷大鼠体内药代动力学行为的影响。方法:雄性SD大鼠分别灌胃银屑灵、土茯苓提取物后,于不同时间眼眶静脉丛采血,固相萃取(SPE)法处理。采用反相高效液相色谱法,以甲醇-乙腈-0.05%甲酸为流动相梯度洗脱;Phenomenex C18色谱柱,柱温24℃,流速0.8 mL.min-1。结果:落新妇苷在0.266～53.1 mg.L-1线性关系良好(r=0.996);提取回收率为79.0%～89.1%;用非隔室模型估算药物动力学参数t1/2,Cmax,AUC0-t,AUC0-∞,MRT,各参数具有统计学意义。结论:该法可用于落新妇苷的药代动力学研究;配伍可提高落新妇苷在大鼠体内的生物利用度。