雷帕霉素对去甲氧柔红霉素诱导急性髓系白血病THP-1细胞凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素（Rapa）对去甲氧柔红霉素（IDA）诱导急性髓系白血病THP-1细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:分别用10、20、40、80 nmol/L Rapa处理THP-1细胞1 h，另设未经Rapa处理的细胞。采用蛋白质印迹法检测THP-1细胞自噬标志物LC3蛋白的转换情况（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ），采用流式细胞术检测细胞凋亡，确定Rapa处理浓度。用不同浓度IDA作用THP-1细胞24 h，采用CCK-8法检测IDA对THP-1细胞的增殖抑制率，计算半数抑制浓度（ IC50）。以低于 IC50的IDA作用Rapa处理或未处理的THP-1细胞24 h，CCK-8法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡情况，实时荧光定量聚合酶链反应检测自噬相关基因Beclin-1、LC3和p62的表达变化，蛋白质印迹法检测自噬标志物LC3蛋白的转换情况。 结果:20 nmol/L Rapa处理的THP-1细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ高于未处理的细胞（ P=0.002 4）；80 nmol/L Rapa处理的细胞凋亡率高于未处理的细胞（ P=0.007 3）。根据蛋白质印迹法和流式细胞术检测结果，选取20 nmol/L Rapa作为预处理浓度。IDA对THP-1细胞作用24 h的 IC50为59.874 nmol/L。50 nmol/L IDA作用24 h后，Rapa预处理的THP-1细胞增殖抑制率[（69.67±5.03）%比（41.67±3.51）%]和细胞凋亡率[（74.35±4.83）%比（41.25±5.24）%]均高于未预处理的细胞（均 P<0.05）；Rapa预处理的THP-1细胞Beclin-1、LC3 mRNA表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均高于未预处理的细胞，p62 mRNA表达水平低于未预处理的细胞（均 P<0.05）。 结论:Rapa能增强较低剂量IDA诱导的THP-1细胞凋亡，此效应可能是通过其引起THP-1细胞过度自噬实现的。     

原发性高血压患者炎症因子表达水平及其与血管紧张素Ⅱ的关系

目的 :探讨原发性高血压 (EH)患者血浆中炎症因子单核细胞趋化因子 1(MCP 1)和P 选择素的表达水平以及与血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的关系。 方法 :用ELISA法检测 32例EH患者 (EH组 )和 30例健康者 (对照组 )血浆MCP 1和P 选择素 ,同时用放射免疫法测定其血浆中AngⅡ水平。结果 :与对照组相比 ,EH组患者血浆中MCP 1和P 选择素水平明显升高 [分别为 (18.6 6± 2 .5 5 )∶(15 .4 5± 1.13)ng/L ,(11.4 3± 3.35 )∶(3.4 7±1.31)ng/L ,均P <0 .0 5 ],但与血浆AngⅡ浓度以及血压升高的程度无相关性。结论 :EH患者血浆中炎性因子MCP 1和P 选择素浓度明显增加 ,这可能与高血压促动脉粥样硬化的发生发展有关     

小剂量MP方案化疗联合环孢素A治疗难治性、复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿疗效观察

我院2000～2005年对9例难治性、复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)进行了小剂量MP方案化疗联合环孢素A治疗,取得一定疗效,现将结果报道如下.……     

降糖三黄片对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1表达的影响

【目的】观察降糖三黄片对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。【方法】选用SPF级Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,采用高脂饲料加链脲佐菌素(STZ,剂量为30 mg/kg)腹腔注射法复制2型糖尿病大鼠模型,造模成功后进行8周给药,中药组予以降糖三黄片(剂量为787.5 mg.kg-1.d-1),西药组予以开博通(剂量为4 mg.kg-1.d-1)。实验末腹主动脉采血检测各组血糖、血脂、胆固醇和胰岛素水平及24 h尿蛋白定量;摘取左侧肾脏称质量并计算肾质量指数;采用免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达。【结果】中药组血糖、血脂、胰岛素水平显著下降,胰岛素敏感指数显著上升,与模型组和开博通组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);中药组肾质量指数显著低于模型组(P<0.05),24 h尿蛋白总量与TGF-β1蛋白表达均显著低于模型组(P<0.01)。【结论】降糖三黄片可通过改善糖尿病模型大鼠血糖、血脂和胰岛素抵抗,减少尿蛋白的排泄,抑制TGF-β1表达,从而保护肾功能,延缓糖尿病肾病的发展。     

降糖三黄片对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞BIP基因表达的影响

目的：观察降糖三黄片对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞BIP基因表达的影响,探讨其干预内质网应激介导的β细胞凋亡的作用机制。方法：40只4周龄Wistar大鼠被随机分为正常组和2型糖尿病组。高脂＋蛋氨酸饲料喂养30只低周龄Wistar大鼠1个月,建立胰岛素抵抗模型,结合小剂量STZ腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为2型糖尿病模型组和降糖三黄片组,降糖三黄片组予以灌胃中成药降糖三黄片治疗2个月,测定血清胰岛素、血脂、血糖,进行治疗前后比较;免疫组化方法测定各组大鼠胰岛β细胞BIP基因的表达。结果 ：降糖三黄片可明显改善2型糖尿病大鼠血糖、血脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗,明显上调内质网应激特征性分子BIP基因的表达。结论：降糖三黄片通过上调2型糖尿病大鼠胰岛β细胞BIP基因的表达,维持胰岛β细胞内环境的稳定,保护胰岛β细胞,减少内质网应激介导的胰岛β细胞凋亡。     

降糖三黄片对糖尿病心肌病大鼠心室重构的电镜观察

目的:观察糖尿病心肌病大鼠发生心室重构后的心功能与超微结构变化及中药降糖三黄片对其影响。方法:49只清洁级Wistar大鼠以高脂高热量饮食诱导加小剂量链脲佐菌素注射建立2型糖尿病心肌病动物模型,随机分为正常组、模型组、中药组和西药对照组。中药组采用降糖三黄片,西药对照组采用卡托普利片灌胃治疗8周,实验末腹主动脉采血检测各组空腹血糖、胆固醇和甘油三酯以及胰岛素;超声心动仪评价各组大鼠心脏的结构和功能,摘取心脏称重计算左室重量指数;电镜观察各组心肌超微结构。结果:①实验末降糖三黄片组血糖、血脂水平明显下降,胰岛素敏感指数上升,同模型组和卡托普利组比较有显著性差异(P<0.05);②中药降糖三黄片能够改善超声心动图监测的心功能各项指标,降低左室重量指数,改善糖尿病心肌病大鼠的心肌超微结构,其作用与西药卡托普利相似,2组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:降糖三黄片能有效改善糖尿病心肌病大鼠的心功能及超微结构,逆转其心室重构,其效果与西药卡托普利相似。     

高血压病患者血清单核细胞趋化因子-1的变化及其与血管紧张素Ⅱ的关系

目的　检测高血压病患者外周血中单核细胞趋化因子 - 1(MCP - 1)和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的变化 ,并分析两者的相关关系。方法　分别用ELISA和放射免疫法测定 32名高血压病患者和 30名正常人外周血MCP - 1和AngⅡ的浓度。 结果　同正常人组相比 ,高血压病患者外周血MCP - 1浓度明显增高 (P<0 .0 0 1) ,但两组AngⅡ浓度差异无显著性 (P =0 .887) ,血MCP - 1浓度同血压、AngⅡ浓度无相关性。 结论　高血压病患者外周血炎症因子MCP - 1浓度增加 ,但与血压升高的程度以及外周血AngⅡ浓度无关。     

中药降糖三黄片干预糖尿病心肌病大鼠心室重构的作用机制

目的观察糖尿病心肌病大鼠胞浆胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的表达及中药降糖三黄片对其影响,进一步探讨降糖三黄片改善糖尿病心肌病大鼠心室重构的作用机制。方法 49只清洁级Wistar大鼠以高脂高热量饮食诱导加小剂量链脲佐菌素(30 mg·kg-1)注射建立2型糖尿病心肌病动物模型,随机分为正常组、模型组、中药组和西药组。中药组给予降糖三黄片,剂量为787.5 mg·kg-1·d-1;西药组给予卡托普利,剂量为4 mg·kg-1·d-1;正常组及模型组灌服等量蒸馏水;均灌胃治疗8周。实验末腹主动脉采血检测各组空腹血糖、胆固醇和甘油三酯以及胰岛素水平;超声心动仪评价各组大鼠心脏的结构和功能,摘取心脏测质量,计算左心室质量指数;免疫组织化学法检测心肌细胞胞浆ERK1/2的含量。结果中药组血糖、血脂水平明显下降,胰岛素敏感指数上升,同模型组和西药组比较差别有统计学意义(P<0.05)。中药降糖三黄片能够改善超声心动图监测的心功能各项指标,降低左心室质量指数,其作用与西药卡托普利(西药组)相似,2组比较差别无统计学意义(P>0.05)。模型组心肌细胞胞浆ERK1/2水平明显高于正常组,差别有统计学意义(P<0.05);中药组和西药组心肌细胞胞浆ERK1/2水平与模型组比较明显下降,差别有统计学意义(P<0.05);中药组和西药组比较,心肌细胞胞浆ERK1/2水平差别无统计学意义(P>0.05)。结论降糖三黄片能有效改善糖尿病心肌病大鼠的心室重构,其效果与西药卡托普利相似,其改善糖尿病心肌病大鼠心室重构的作用机制可能与抑制ERK1/2的表达有关。     

ADU-S100/多柔比星原位疫苗在弥漫大B细胞淋巴瘤中的作用及机制研究

目的探讨ADU-S100/多柔比星原位疫苗在弥漫大B细胞淋巴瘤中的抗肿瘤作用及相关机制。方法选择6周龄雌性BALB/c小鼠, 采用小鼠B细胞淋巴瘤A20细胞株构建小鼠B细胞淋巴瘤双侧皮下肿瘤模型, 采用随机数字表法将皮下荷瘤小鼠随机分为未治疗组(不接受任何治疗)、ADU-S100原位疫苗治疗组(瘤内注射干扰素基因刺激因子激动剂ADU-S100)、多柔比星原位疫苗治疗组(瘤内注射多柔比星)和ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组(瘤内注射ADU-S100+多柔比星), 每组5只。将荷瘤小鼠右侧肿瘤定义为近端肿瘤, 左侧肿瘤定义为远端肿瘤, 仅对近端肿瘤进行瘤内药物注射治疗, 远端肿瘤不处理。肿瘤接种后第23天, 采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏中CD11c+树突细胞(DC)、CD8+ CD11c+ DC和CD80+ CD11c+ DC亚群的比例。采用A20肿瘤细胞裂解物体外刺激各组小鼠的脾细胞, 应用流式细胞术检测各原位疫苗治疗组CD8+ T细胞中5’’-乙炔基-2’’脱氧尿嘧啶核苷阳性(EdU+)细胞和肿瘤坏死因子α阳性(TNF-α+)细胞的比例, 并使用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检...