蛛网膜下腔出血后致残因素的Logistic回归分析

<正>蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是临床常见的危急重脑血管病。SAH具有起病急、病情重、致残率高、急性期病死率高的特点。在出血后存活的患者中,约1/3需依赖他人生活,超过2/3的患者生活质量明显下降[1]。但经积极治疗后,多数存活者可以没有明显的神经系统缺陷,还     

排斥导向分子在中枢神经系统中的研究进展

排斥导向分子（RGMs）家族包括三种蛋白,即RGMa、RGMb和RGMC,通过其受体neogenin,在发育及成年神经系统中显示了多种生物学活性.近年来,RGMa被证实参与了细胞增殖和分化、细胞粘附和迁移、神经褶皱形成、轴突导向、生长锥塌陷和轴突生长/再生等神经系统发育早期事件,同时RGMa还在多发性硬化症和老年性痴呆（AD）等中枢神经系统疾病中发挥了独特的作用.本文就RGMa在神经系统中的研究进展作一述评.     

马来酸桂哌齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注后白介素-1β、白介素-6的表达及神经功能的影响

目的 研究马来酸桂哌齐特(cinepazide maleate,CM)对大鼠急性脑缺血后IL-1β、IL-6的表达及神经功能的影响.方法 成年雄性SD大鼠48只,采用随机数字表法分为正常组、假手术组、缺血再灌注组及CM治疗组,在缺血再灌注后第2、7 天对脑组织进行HE染色、测定脑组织含水量及采用免疫组化法测定皮质IL-...     

CRMP2可通过改善神经细胞凋亡减轻缺血/再灌注大鼠神经功能缺损

目的探讨CRMP2(collapsin response mediator protein2)对大鼠脑缺血/再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法 192只♂成年SD大鼠分成4组:假手术组(sham)、脑缺血/再灌注组(MCAO)、脑缺血+质粒对照组(MCAO+GFP)、脑缺血+CRMP2真核质粒干预组(MCAO+CRMP2/GFP)。大鼠MCA阻塞手术前1 d将真核质粒注射入脑内,缺血/再灌注后48 h、1周,采用RT-PCR检测各组大鼠脑组织CRMP2、BCL2、p53、Caspase-3和Caspase-8的mRNA的表达;Western blot检测脑组织CRMP2蛋白的表达;TUNEL染色检测凋亡细胞;免疫组化检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达;TTC染色检测脑梗死体积并进行神经功能缺损评分。结果脑缺血/再灌注48 h及1周,与sham组比较,MCAO组及MCAO+GFP组CRMP2和BCL2的表达水平明显降低(P<0.01),而Caspase-3、Caspase-8及p53的mRNA表达升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞数量明显升高(P<0.01)。MCAO+CRMP2/GFP组CRMP2和BCL2较MCAO及MCAO+GFP组明显增高(P<0.01),同时该组p53、Caspase-3及Caspase-8表达明显降低(P<0.01)。过表达CRMP2使TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01)。脑缺血/再灌注后BDNF表达升高(P<0.01),而脑内过表达CRMP2使BDNF的水平上调更明显(P<0.01)。TTC染色显示,MCAO+CRMP2/GFP组脑梗死体积较MCAO组及MCAO+GFP组明显减小(P<0.01),且神经功能缺损明显减轻(P<0.01)。结论过表达CRMP2可能通过对线粒体凋亡通路的调控减少了脑缺血/再灌注损伤后的神经细胞凋亡、减少脑梗死体积而起到神经保护作用。     

上调脑内脑衰反应调节蛋白2的表达促进了脑缺血再灌注大鼠神经再生

目的 探讨脑衰反应调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP2)对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元丢失及神经再生的影响及其可能的机制.方法 将60只成年雄性SD大鼠分成4组:假手术组(sham)、脑缺血/再灌注组(MCAO)、脑缺血+质粒对照组(MCAO+ GFP)、脑缺血+CRMP2真核表达质粒组(MCAO+ CRMP2).将质粒注射人各组大鼠脑内,ld后建立大鼠大脑中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)/再灌注模型,术后5～7d腹腔注射5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethinyl deoxidization uracil nucleoside-2’,Edu),免疫荧光检测各组大鼠MAP2、GFAP、Edu标记细胞的阳性率及Nestin/Edu双标记阳性细胞的表达;采用Western blot检测CRMP2、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(N-methyl-D-aspartate receptor2B,NMDAR2B)的表达;免疫组化检测CRMP2的表达及其神经功能评分.结果 与sham组相比,脑缺血再灌损伤使MAP2表达降低(P＜O.05),GFAP表达增高(P＜0.05),同时促进了Edu标记阳性细胞[(62.00±7.65)、(62.60±7.06)]及Nestin/Edu标记阳性细胞[(31.60 ±5.50)、(31.60 ±5.40)]的表达(P＜0.05).而CRMP2真核质粒干预之后降低了GFAP的表达(P＜0.05),且升高了MAP2的表达(P＜0.05),还进一步促进了Edu标记阳性细胞(100.20 ±11.52)及Nestin/Edu标记阳性细胞(57.20±4.80)的表达(P＜0.05).与sham组相比,MCAO及MCAO+ GFP组BDNF及NMDAR2B的表达明显升高(P＜0.05);经CRMP2真核质粒干预后,BDNF表达进一步增高(P＜0.05),NMDAR2B的表达被部分削弱(P＜0.05).CRMP2真核质粒干预后神经功能评分较MCAO及MCAO+GFP组明显改善(P＜0.05).结论 CRMP2减少了大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元的丢失;促进了大鼠脑缺血再灌注损伤后内源性神经干细胞的增殖,而其对BDNF及NMDAR2B的调节可能是其作用机制的一部分.     

CRMP2真核表达质粒在大鼠缺血/再灌注脑皮质 转染效率的对比研究

目的:筛选Collapsin反应调节蛋白2(CRMP2)真核表达质粒转染大鼠脑皮质的适宜注射部位。方法:成年雄性SD大鼠150只随机分为空白质粒(VP)组、侧脑室(LV)组、海马(H)组、皮质(C)组及嗅球(OB)组。选定质粒注射部位后,20只大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(MCAO)组、缺血再灌注+空白质粒(MCAO+GFP)组、缺血再灌注+CRMP2真核质粒干预(MCAO+CRMP2/GFP)组。大鼠脑缺血/再灌注模型成功后,分别于相应4个部位立体定向注射CRMP2真核表达质粒/空白质粒,转染后24 h和48 h,采用Western blot及RT-PCR检测缺血区皮质CRMP2蛋白及m RNA的表达;激光共聚焦检测GFP的表达。TTC检测脑梗死体积,同时行神经功能评估。结果:不同部位注射CRMP2真核表达质粒后,皮质CRMP2的表达均有增高,其中LV组及H组的转染效率明显高于C组及OB组(P0.05),LV组与H组之间差异无统计学意义(P0.05)。与MCAO及(MCAO+GFP)组相比,CRMP2真核质粒干预之后能缩小脑梗死体积,促进神经功能恢复(P0.05)。结论:CRMP2真核表达质粒能够成功转染大鼠脑组织,使缺血区皮质CRMP2蛋白及m RNA的表达明显增高。侧脑室的转染效率较其他三个部位更高。     

电刺激嗅球对脑室下区神经干细胞增殖、迁移和分化的影响

目的 探讨电刺激嗅球对脑室下区(SVZ)神经干细胞(NSC)增殖、迁移及其分化的影响.方法 取SD大鼠48只,随机分为正常对照组、假刺激组、电刺激1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d组,以5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记NSC,免疫组化法检测SVZ区NSC的增殖情况.另取大鼠18只,随机分为正常对照组、假刺激组和电刺激组,以免疫组化法观察NSC向嗅球迁移情况,荧光双标法检测NSC分化情况.结果 电刺激1 d,SVZ区BrdU阳性细胞开始增高,第7天达高峰,第3周达对照组水平.注射BrdU28 d后,电刺激组喙侧迁移流(RMS)及嗅球内的BrdU阳性细胞数较正常对照组明显增多,但两组NSC分化情况没有明显差别.结论 电刺激嗅球可促进SVZ区NSC增殖及迁移,但对其分化没有影响.

Abstract：

Objective To investigate the effects of electrical stimulation of olfactory bulb( OB) on the proliferation, migration and differentiation of neural stem cell ( NSC ) in subventricular zone. Method Forty - eight adult female Sprague - Dawley(SD) rats were randomly divided into control group, sham stimulation group and stimulation group including 6 time points(1 day,3 day,7 day, 14 day,21 day, 28 day). The rats were injected intraperitoneally with bromodeoxyuridine( BrdU) to detect the proliferation of NSC by immunohistochemistry staining. Another 18 rats were randomly divided into control group, sham stimulation group and stimulation group. Four weeks after BrdU injection, the rats were sacrificed and immunohistochemistry and immunofluorescence were used to investigate the migration and differentiation of NSC in OB. Results In SVZ, BrdU - positive cells began to increase 1 d after stimulation (17. 67 ± 1.03, P <0.01) .reached to the maximum level at 1 week(28. 50 ± 1. 87, P <0. 01) ,then decreased to normal at 3 week. Four weeks after injection of BrdU,the BrdU -positive cells significantly increased in RMS(67. 33 ±3.50, P <0.01) and OB(44.33 ±5.47, P <0.01) in stimulation group. Fluorescence double staining showed that the stimulation of OB had no effect on the differentiation of NSC into neurons or gliocytes. Conclusions Electrical stimulation of OB could promote proliferation, migration of NSC in SVZ, but it has no effect on the differentiation of NSC into neurons or gliocytes.     

17β-雌二醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓Rho激酶表达的影响

目的探讨17β-雌二醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠中枢神经系统Rho激酶表达的影响及相关机制。方法 75只雌性Wistar大鼠分为正常组、模型组、雌激素组、DMSO对照组和雌激素+雌激素核受体抑制剂ICI组。雌激素组每日皮下注射17β-雌二醇20μg/(kg.d),连续10 d。雌激素+ICI组于17β-雌二醇注射前先给予雌激素核受体抑制剂ICI 182780 5 mg/(kg.d),比较各组大鼠神经功能评分;HE染色观察病理学改变;免疫组织化学和Western blot观察Rho激酶表达的变化。结果与对照组和模型组分别比较,雌激素组发病潜伏期延长,神经功能评分降低;HE染色示雌激素组炎性细胞浸润减少;免疫组化检测结果显示,雌激素组Rho激酶阳性细胞数(8.36±1.57)明显低于模型组[(17.55±1.70),P<0.01];Western blot检测结果显示,雌激素组蛋白表达相对值(0.833±0.022)显著低于模型组[(1.013±0.060),P<0.05];雌激素+ICI组Rho激酶阳性细胞数(18.90±2.39)和蛋白表达(1.141±0.046)显著高于雌激素组(P<0.05)。结论 17β-雌二醇能抑制EAE大鼠Rho激酶的表达,这种抑制作用是通过经典的雌激素核受体通路实现的。