热休克蛋白70基因 rs1008438多态性与高原肺水肿的相关性

目的：探讨热休克蛋白（HSP）70基因启动子区 rs1008438位点单核苷酸多态性（SNP）与高原肺水肿（HAPE）之间的关系。方法采用PCR‐DNA直接测序法检测100例HAPE组、200例健康对照组个体基因组rs1008438位点的基因分布,分析不同基因型与HAPE的关系;运用ELISA法检测不同基因型HAPE组和健康对照组白细胞细胞质和细胞核HSP70蛋白含量变化;应用蛋白质芯片技术和 EVIDENCE180全自动芯片仪分析 TNF‐α、IL‐1β、IL‐6表达水平。结果 HAPE组,健康对照组rs1008438的TT、GT、GG的基因型频率分别是76．0％、20．0％、4．0％,93．0％、6．5％、0．5％。统计处理显示,HAPE组TT基因型频率明显低于健康对照组（P＜0．05）;GT、GG基因型患 HAPE的危险性是 TT基因型的4．195倍,G等位基因相对 T等位基因也能明显增加 HAPE的发病风险（OR＝4．178）;ELISA检测结果显示,不同基因型 HAPE组 HSP70含量均高于健康对照组,且HSP70细胞核／细胞质比值TT基因型高于GT／GG基因型;蛋白质芯片检测表明,HAPE组血清中的TNF‐α、IL‐1β、IL‐6表达水平均明显高于健康对照组。结论 rs1008438位点多态性与 HAPE易感性相关,这种相关性可能是由于突变型在基因转录水平通过影响启动子活性而增强HSP70表达,从而导致HAPE的发生。     

HBeAg转阴与HBV基因型分布和YMDD变异位点的相关性分析

目的：研究感染乙型肝炎病毒患者的乙型肝炎病毒 e 抗原（HBeAg）转阴与长期应用拉米夫定诱发的YMDD 变异和病毒基因型的相关性。方法选取本院确诊的慢性乙型肝炎患者1200例,其中 HBeAg 血清学转阴患者577例,未转阴患者623例,检测患者 HBeAg 、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA ）和 HBV 基因型,并比较和探讨3者的关系。结果577例 HBeAg 阴性患者中有233例（40．38％）存在病毒复制（HBV-DNA ≥103）;对233例基因分型显示,A 、B 、C 、D 基因型分别为163例（69．96％）、57例（24．46％）、11例（4．72％）、2例（0．86％）;YMDD 突变检测发现,233例患者中106例（45．49％）发生 YMDD 突变,其中Ⅴ突变68．87％,Ⅰ突变22．64％,Ⅰ/Ⅴ共生突变8．49％。在106例 YMDD 突变患者中 A 、B 、C 、D 基因型分别为0例（0．00％）、72例（67．92％）,27例（25．47％）,7例（6．60％）。结论本院所在地区 HBeAg 血清转阴的慢性乙型肝炎患者病毒复制仍保持一定的活力,持续监测病毒拷贝数、YMDD 突变和基因型对于此类患者治疗非常必要。     

急性白血病患者化疗前后外周血淋巴细胞CR1的表达

目的 观察急性白血病患者化疗前、后外周血淋巴细胞(PBL)CR1表达的改变情况,探讨CR1测定在化疗疗效监测中的意义.方法 采用免疫黏附法和ELISA法检测56例健康体检者和临床确诊的48例急性白血病患者的PBL CR1活性及含量,并对急性白血病患者化疗前、后的结果 进行分析比较.结果 48例急性白血病患者PBL CR1活性为36.8±11.6;PBL CR1含量为0.73±0.18,均低于健康对照组(65.1±16.8)和(1.16±0.22),差异显著(P＜0.05).化疗后39例完全缓解者PBL CR1活性及含量水平回升(53.6±13.2)及(0.98±0.16),接近健康对照组(P＞0.05),与化疗前比较差异也均有统计学意义(P＜0.05),11例未缓解者PBL CR1活性和PBL CR1含量分别为(41.2±12.7)和(0.80±0.19),与化疗前比较略有升高,但无统计学意义(P＞0.05).结论 急性白血病患者PBL CR1表达明显受到抑制,化疗缓解后PBL CR1活性及含量均有回升.检测外周血淋巴细胞CR1活性及含量可为临床急性白血病患者的免疫监测以及疗效评估、预后判断提供有价值的参考指标.     

糖尿病肾病相关miR-130b-3p靶点的生物信息学预测

目的：预测miR-130b-3p靶基因,并对靶基因的分子功能、生物学进程和信号通路进行富集分析,为深入研究糖尿病肾病相关miR-130b-3p的靶基因功能提供理论基础。方法：通过NCBI和miRbase数据库检索基因。应用Vector NTI软件进行miR-130b-3p序列分析,应用TargetScan,picTar,RNA22,PITA和miRanda软件预测靶基因,通过DAVID 和KEGG 数据库进行靶基因功能与信号通路富集分析。结果：已知成熟的不同物种miR-130b-3p核酸序列高度保守。靶基因主要富集在核质和细胞溶质,分子功能主要富集在蛋白绑定和转录因子激活。经典的miR-130b-3p靶基因集合明显富集于KEGG数据库中的TGF-β、AMPK和内吞作用等7个信号转导通路。疾病富集分析与糖尿病高度相关。结论：成功预测miR-130b-3p靶基因,部分靶基因参与的功能及信号通路与糖尿病肾病发生发展过程密切相关。     

流式细胞术检测冠心病患者外周血白细胞唾液酸黏附素的表达及临床意义

目的观察唾液酸黏附素（Siglec-1）在冠心病（CHD）患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其在冠状动脉粥样硬化发病过程中的作用。方法流式细胞术检测57例CHD患者及38名正常对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞Siglec-1的百分率;生化常规测定所有人选者血脂水平。结果流式细胞仪检测发现,Siglec-1在正常对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞Siglec-1阳性率为（12．74-2．4）％,显著高于正常对照组[（1．0±0．3）％,P〈0．01],而CHD血脂正常组和血脂异常组的Siglec-1阳性率差异无统计学意义。结论作为单核巨噬细胞激活的标志,Siglec-1在外周血淋巴细胞和中性粒细胞上不表达,在正常人单核细胞上表达很低。CHD患者单核细胞Siglec-1表达明显升高,提示CHD患者外周血单核细胞已经激活,发生巨噬细胞化,Siglec-1在单核细胞黏附血管内皮及CHD的发病过程中可能起重要作用。     

类风湿关节炎患者外周血Treg细胞及其分泌IL-35水平检测与临床意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中调节性T细胞(Treg)的数量,以及其所分泌的白细胞介素(IL)-35表达水平与RA发病的相关性.方法 采集45例RA患者(RA组),22例骨关节炎(OA)患者(OA组),26例健康体检者(对照组)的外周血,流式细胞术检测CD4+ CD25+ foxp3+ Treg数量,ELISA检测血浆IL-35水平.分析Treg细胞及其表达的IL-35与临床指标间的相关性.结果 RA组外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的百分率[(5.65±2.33)％]较对照组[(4.12±1.75)％]明显升高(P＜0.05);OA组与RA组比较,差异无统计学意义(P=0.086).3组对象foxp3平均荧光强度比较,差异无统计学意义(P＞0.05);DAS28评分越高的患者,其外周血Treg细胞数量和foxp3荧光强度越低.RA组血浆IL-35[(34.22±14.35)ng/L]水平明显低于OA组[(78.63±24.58)ng/L]和对照组[(67.56±25.43)ng/L],差异均有统计学意义(P＜0.05).RA患者Treg细胞数量与红细胞沉降率(ERS)、DAS28评分呈负相关(r=-0.223、-0.343,P=0.023、0.011),而与类风湿因子、C反应蛋白、抗CCP抗体无相关性.结论 RA患者外周血中Treg细胞数量增高,IL-35水平降低;Treg细胞功能缺陷致负调控能力减弱.     

白细胞介素-17在退变腰椎间盘中的表达及意义

[目的]观察白细胞介素-17(IL-17)在退变腰椎间盘组织中的表达水平,并探讨其与椎间盘退变发生发展的关系.[方法]实时荧光相对定量PCR(RQ-PCR)方法检测42例退变椎间盘组织(26例来自腰椎间盘突出症患者,16例来自腰椎管狭窄症患者)及8例正常对照椎间盘组织(来自4具新鲜尸体)中IL-17和孤独受体(retinoid-relatedorphanreceptor,RORγT)mRNA的表达水平;免疫组织化学EnVision法检测入选标本CD4表面抗原、IL-17表达水平.[结果]退变组椎间盘组织IL-17、RORγTmRNA的相对表达量显著高于正常对照组相对表达量(P＜0.05),且腰椎间盘突出组和腰椎管狭窄组IL-17、RORγrmRNA表达量差异无统计学意义(t=0.669,P=0.507,T=421,p=0.38);IL-17mRNA和RORγTmRNA相对表达水平呈线性关系(r=0.381,P=0.013);退变组椎间盘组织IL-17、CD4细胞表面抗原阳性率显著高于正常对照组(P＜0.001),且腰椎间盘突出组和腰椎管狭窄组IL-17、CD4细胞表面抗原阳性率差异无统计学意义(t=1.13,P=0.265,t＝1.459,P=0.152).[结论]IL-17mRNA和蛋白表达水平在退变椎间盘组织中显著升高,说明IL-17参与椎间盘退变的病理过程,Th17细胞介导的免疫炎症反应可能在腰椎间盘退变的发生发展中起重要作用.     

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血单个核细胞的表达及临床意义

目的 观察唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(sialic acid-binding immunoglobulin-likelectin 1,Siglec-1,也称CD169)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法 流式细胞术检测57例CHD患者及38名健康对照者外周血CD14CD169双阳性细胞的表达率;生化常规测定所有入选者血脂水平;实时荧光相对定量逆转录(FQ-RT)-PCR方法检测入选对象外周血单个核细胞(PBMCs)中CD169 mRNA的含量.结果 流式细胞仪检测发现,CD169在健康对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞CD14CD169双阳性率为(12.7±2.4)%,显著高于健康对照组[(1.0±0.3)%,t=23.2,P<0.01];CHD组CD169 mRNA的拷贝数显著高于健康对照组拷贝数(t=6.59,P<0.01),为健康对照组的3..倍;而CHD血脂正常组和血脂异常组的CD169阳性率[分别为(12.2±2.3)%和(13.4±2.5)%,t=1.87,P>0.05]和mRNA平均拷贝数(分别为健康对照组的3.64和2.79倍,t=0.98,P>0.05)差异均无统计学意义.结论 CD169组成性表达于特定组织巨噬细胞上,健康人外周血单核细胞上并不表达,单核巨噬细胞受到炎症刺激时,CD169表达迅速上调.CD169蛋白及mRNA含量在CHD患者外周血单核细胞上表达显著升高,CHD患者外周血单核细胞已发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在CHD发生发展过程中起重要作用.     

唾液酸黏附素在相关疾病中的表达及意义

唾液酸黏附素(Siglec-1或称CD169)是Siglecs家族的成员之一,属于免疫球蛋白超家族类黏附分子,其主要表达于组织的巨噬细胞上,是巨噬细胞激活的重要标志。近年来,不断有研究表明Siglec-1可表达在激活的外周血单核细胞上,如在系统性     

载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附

目的 探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉黏附效应的影响.方法 在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16 h后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-1细胞黏附1h,观察黏附效应的变化,同时应用免疫组化方法检测血管黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达.结果 给予APOC3刺激的主动脉与对照主动脉相比,与THP-1细胞的黏附效应增加,VCAM-1和ICAM-1表达上调,且前者比后者上调显著.结论 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附.