人源性荷三阴乳腺癌NOD/SCID小鼠模型建立及其免疫应答

目的建立具有人免疫学特征的NOD/SCID小鼠模型,并观察其对三阴乳腺癌的免疫应答。方法筛选无免疫渗漏NOD/
SCID小鼠24只,分成4组,免疫重建组提前3 d腹腔注射250 mg/kg环磷酰胺（CTX）,后经腹腔注射健康人外周血单个核细胞
（PBMC）同时背部皮下接种人三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231;单纯免疫组只注射CTX 及PBMC;单纯荷瘤组只接种
MDA-MB-231;空白对照组不作任何处理。定期观察各组小鼠生物学及免疫学特征。结果免疫荷瘤组成瘤潜伏期（10~12 d）
较单纯荷瘤组（8~10 d）延长,肿瘤生长速度减缓,第5周末肿瘤体积分别为1244.82±792.82 mm3和4308.77 mm3（P<0.01）,生存
率提高（P<0.01）。接受免疫重建的小鼠外周血人IgG于第2周即可测到,并逐渐上升,较未接受免疫重建小鼠差异有统计学意
义（P<0.01）。外周血中CD3+细胞比例于第2周逐渐下降,但于第9周仍可测到。第9周小鼠脾脏细胞中CD3+T细胞比例高达
55.3%（免疫荷瘤组）及52.7%（单纯荷瘤组）。免疫荷瘤组小鼠脾指数9.64 mg/g明显高于单纯免疫组3.82±0.31 mg/g及空白对
照组1.51±0.14 mg/g。结论成功构建稳定的具有人免疫学特征的NOD/SCID小鼠模型,并观察到其对三阴乳腺癌产生免疫应
答,可为三阴乳腺癌免疫治疗研究提供较为理想的动物模型。
     

Runx2-树突状细胞基因疫苗诱导特异性细胞免疫杀伤三阴乳腺癌

【目的】探讨Runx2基因在乳腺癌中分布及Runx2-树突状细胞(DC)疫苗能否在体外诱导产生针对三阴乳腺癌的特异性抗肿瘤效应。【方法】RT-PCR、免疫细胞化学和Westernblot检测Runx2在三阴乳腺癌、非三阴乳腺癌和正常乳腺细胞中表达;提取健康人外周血并分离DC,流式检测DC表面标志;制备Runx2过表达慢病毒,转染DC并分为转染组、阴性对照组及空白组,荧光显微镜、PCR和Westernblot检测各组转染效率;将各组转染细胞与T淋巴细胞共培养,ELISA检测IL-12、IFN-γ的分泌量,MTT检测疫苗对三阴乳腺癌的特异性杀伤作用。【结果】PCR结果示Runx2在MDA-MB-231、MCF7及MCF10A中ΔCT值分别为10.37±0.61、11.86±0.59、12.97±0.06(P<0.05),免疫细胞化学及Western显示MDA-MB-231中Runx2蛋白呈强阳性,在MCF7及MCF10A中仅为弱阳性;本研究制备Runx2慢病毒在转染DC后可以表达丰富绿色荧光,证实Runx2基因成功转导入成熟DC中。转染组与T细胞共培养后分泌IL-12、IFN-γ量(pg/m L)分别为170.33±5.03、517.15±5.88,而阴性对照组的分泌量仅为72.30±3.05、171.57±1.37(P<0.05),同时转染组诱导的细胞毒性T细胞对三阴乳腺癌杀伤率(%)为60.02±3.51,较对照组(25.57±3.64)增强(P<0.05)。【结论】Runx2可能为三阴乳腺癌治疗新靶点,并能成功转导Runx2至DC中制备Runx2-DC疫苗,增强DC对三阴乳腺癌的靶向性,从而高效诱导该疫苗在体外对三阴乳腺癌的特异性杀伤作用。     

楔形真皮瓣塑形矫正乳头内陷21例

目的：探讨Ⅱ、Ⅲ型乳头内陷合并近乳晕区包块的手术治疗方法。方法2010年8月至2013年1月对21例Ⅱ、Ⅲ型乳头内陷合并近乳晕区包块患者行包块切除术的同时行楔形真皮瓣乳头内陷矫正术。根据乳腺包块位置与乳头连线方向设计一个以乳晕侧为蒂的去表皮楔形真皮瓣,包块切除后皮瓣卷起内翻旋转固定于乳头基部以支撑乳头,并作荷包缝合塑形乳头颈部防止乳头回缩。结果用该矫正术治疗21例、21个乳头,术后乳头血运良好,外形满意。随诊6个月,感觉、勃起正常,瘢痕不明显。其中2例Ⅲ型乳头内陷术后出现轻度回缩,但比术前明显改善,患者未要求二次修复。结论该术式操作简单有效,同时解决了乳腺包块、乳头内陷,以及乳头内陷引发包块再发的隐患,针对乳头内陷合并乳腺包块人群值得推广。     

沉默信息调节因子1与乳腺癌临床病理指标的相关性及生存分析

目的探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）在乳腺癌及癌旁组织中的表达及与其他临床病理指标的相关性,并分析其与术后生存数据的关系。 方法检测120例乳腺癌组织及53例癌旁组织中SIRT1的表达情况,比较两组表达率的差异,以及乳腺癌组SIRT1表达水平与其他临床病理指标的相关性。 结果乳腺癌组的阳性表达率高于癌旁组织组,差异有统计学意义（53.3% vs 34.0%,χ²=5.533,P=0.02）。临床病理指标分析显示,SIRT1表达水平与肿瘤大小及Ki-67表达情况呈密切相关性（χ²=6.790、21.316,P=0.009、0.000）,与年龄、淋巴结转移、临床分期、组织学分级、雌激素受体（ER）、孕雌激素受体（PR）、Her-2表达差异无统计学意义。生存分析显示,SIRT1蛋白表达水平高的乳腺癌患者预后较表达水平低的患者差,差异有统计学意义（χ²=9.320,P<0.05）。 结论SIRT1在乳腺癌组织中的表达较癌旁组织明显升高,随着肿瘤的增大而表达增强,且与肿瘤增殖指标Ki-67正相关,其高表达的患者预后较差,提示其可能在乳腺癌的发生发展中起着正向促进作用,高表达预示着乳腺癌细胞增殖较快,预后不佳。