体外适宜温热刺激对络脉相关血管内皮细胞延缓衰老物质P53、SIRT1含量影响的机制研究

目的研究体外适宜温热刺激对络脉相关血管内皮细胞中P53、SIRT1基因和蛋白表达的影响,探讨体外适宜温热刺激的延缓衰老的作用机制。方法将第二代人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)分为正常组(37℃)和适宜温热刺激组(40℃),正常组不作何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4～6h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天刺激结束6h后用QPCR和Western blot技术检测P53、SIRT1基因和蛋白表达。结果两组HUVECs生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P0.01,P0.001)。第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECs内P53的基因和蛋白表达均降低(P0.01),SIRT1的基因和蛋白表达均升高(P0.05,P0.01)。结论体外适宜温热刺激能调控络脉相关血管内皮细胞延缓衰老物质P53、SIRT1的表达,为研究体外适宜温热刺激络脉发挥"延缓衰老"生物学效应提供了实验依据。     

从生物进化看脑苷脂类化合物的分布及其生物活性研究进展

脑苷脂类化合物是一类广泛存在于菌类、植物类、动物类及海洋生物组织细胞膜中含量很低的内源性生物活性物质。本文就近年来发现的脑苷脂类化合物的化学结构特点与生物进化相关性、脑苷脂类的生物合成与体内转化、生物活性与药理作用、应用前景等方面的研究进行综述和展望,为此类活性成分的深入研究提供参考。     

华佗健聪汤对H_2O_2损伤的原代星形胶质细胞分泌BDNF的影响

目的观察华佗健聪汤对氧化应激状态下的星形胶质细胞分泌脑源性神经生长因子(BDNF)的影响。方法以原代培养的SD乳鼠星形胶质细胞为材料,H2O2造成星形胶质细胞损伤,氧化损伤前中药组用华佗健聪汤灌胃后获取的大鼠含药血清进行干预,用ELISA法检测星形胶质细胞上清液中BDNF含量。结果中药组BDNF含量与正常组、模型组相比均有显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论华佗健聪汤能明显增加在氧化应激状态下星形胶质细胞分泌BDNF的水平,从而保护神经元。     

山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠骨髓细胞MN影响的研究

目的:探讨山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠骨髓细胞微核(MN)的影响。方法:取青年组、老年组、用药组(山茱萸制品几种溶剂萃取部位)小鼠的骨髓细胞,检测MN,统计微核率。结果:老年组与青年组相比,微核率差异显著,而两个用药组分别用石油醚萃取部位、水煎液灌胃,小鼠骨髓细胞微核率与老年组相比差异显著,表现出一定的药效。结论:山茱萸制品水煎液及山茱萸制品石油醚萃取部位对老年小鼠骨髓细胞DNA有一定的保护作用。     

华佗健聪汤对Aβ所致老年痴呆大鼠功能改善及相关机理的研究(1)——行为学观察及评价

目的：探讨华佗健聪汤对Aβ所致老年痴呆的大鼠行为学变化的改善作用。方法：用凝聚态Aβ1-42定向注射22月龄DD大鼠右侧海马CA1区制备出AD动物模型，分别观察正常组、假损伤组、模型组、中药预防组、中药治疗组、阳性药物对照组各组大鼠的一般状态及记录定位航行实验的游泳时间，比较各组之间的差异。结果：中药预防组和治疗组大鼠一般状态明显好于模型组，定位航行时间亦比模型组大为缩短，尤其是预防组大鼠，在测试其学习能力的定位航行时间Ⅱ时，表现非常突出，成绩优于正常组。结论：本方对Aβ所致老年痴呆的大鼠有显著的益智作用，其预防性意义尤为突出。     

论肝郁与阿尔茨海默病的关系

论述了阿尔茨海默病的发生与肝气郁结有密切的关系。肝郁导致本病的主要病机在于肝郁生痰、肝郁化火、肝郁乘脾、肝郁血瘀、肝郁及肾。提出AD从肝论治为基本治则,以疏为补,为中医药治疗阿尔茨海默病提供一种新型治疗模式。     

加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞ECV304 VEGF表达的影响

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞(ECV304)VEGF表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),随机分成正常组、模型组、血清对照组、阳性药物对照组、加减清营汤含药血清组。加减清营汤含药血清组用加减清营汤含药血清进行干预。用380μmol/L H2O2损伤细胞,培养24h后收集细胞总蛋白,用Western-blotting法检测VEGF表达水平。结果:氧化应激状态下ECV304 VEGF的表达有所增加,加减清营汤含药血清则能显著提高VEGF的表达以有效应对氧化损伤。结论:加减清营汤能促进H2O2氧化损伤的血管内皮细胞的代偿性修复。     

华佗健聪汤对β淀粉样蛋白损伤的神经元存活率和细胞形态的影响

目的 研究华佗健聪汤对β淀粉样蛋白(Aβ)损伤的神经元的存活率和细胞形态的影响.方法 取原代培养的神经细胞,随机分为正常组、中药组、模型组、阳性对照组.正常组神经细胞以无血清Neuralbasal培养基培养,不予以任何干预措施;模型组以浓度为10 μmol/L的Aβ对神经细胞予以干预;中药组:将含华佗健聪汤血清加入无血清Neuralbasal培养基中培养神经细胞24 h后,弃培养基,加入Neuralbasal培养基及10 μmol/L Aβ继续培养;阳性对照组:将中药组的含药血清换成未灌中药的正常大鼠血清及给予终浓度为20 μmol/L.人参皂苷Rg1,余均与中药组相同.培养24 h后,观察并拍摄细胞形态,MTT实验评价细胞活力.结果 华佗健聪汤组与模型组相比,细胞形态结构基本完好,OD值增高(P<0.05).中药组细胞成活率为82.64%,显著高于模型组细胞成活率(64.76%)(P<0.05).结论 华佗健聪汤对Aβ所致的大鼠神经元损伤有较好的保护作用.     

黑龙骨总皂苷对CIA小鼠脾脏MYD88、IKK-α、IKB-α蛋白表达的影响

目的:观察黑龙骨总皂苷对CIA小鼠模型关节炎症及脾脏内MYD88、IKK-α、IKB-α蛋白表达的影响。方法:随机选取雄性C57小鼠分为正常对照组、模型组、尼美舒利阳性对照组及骨藤总皂苷60、40、20 mg/kg组。除正常对照组外,其余各组构建CIA模型。给药6 w后踝关节HE染色、免疫组化法和蛋白印迹法分别检测各组脾脏MYD88、IKK-α、IKB-α蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组足跖肿胀程度显著降低,踝关节组织病理学明显改善。各给药组脾脏MYD88、IKK-α、IKB-α蛋白表达较模型组不同程度降低,免疫组化法和蛋白印迹法结果基本一致。结论:黑龙骨总皂苷能抑制CIA小鼠足跖炎性程度和踝关节病理变化的发展,并对脾脏MYD88、IKK-α、IKB-α蛋白表达有显著抑制作用。     

华佗健聪汤对Aβ诱导BV-2细胞释放IL-1β抑制作用的研究

目的：研究华佗健聪汤对邶诱导BV-2细胞生成和释放致炎因子IL—1β的抑制作用。方法：以BV-2细胞为材料，Aβ-42诱导BV-2细胞生成和释放致炎因子IL-1β，中药组预先用华佗健聪汤灌胃后获取的大鼠含药血清进行干预，ELISA法检测IL-1β含量。结果：中药组IL-1β含量显著下降，与正常组、模型组相比均有明显差异。结论：华佗健聪汤显著抑制BV-2细胞分泌IL—1β的水平，良好的抗炎作用可能是华佗健聪汤防治AD的机理之一。