人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2的建立

目的体外建立顺铂(DDP)诱导的人肝癌耐药细胞株(HepG2/DDP),研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2/DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2/DDP的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2/DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1.35μg/ml,HepG2/DDP的IC50为23.35μg/ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0/G1期细胞减少、S期与G2/M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2/DDP。     

某院校护理专业学生实验室生物安全知识认知情况调查分析

目的 通过对柳州市2所医学院校护理专业学生的问卷调查,了解护理专业学生对实验室生物安全知识的认知情况及态度.方法 运用随机抽样的方法,采用问卷调查方式对护理专业502人开展问卷调查.结果 学生对医院内感染、消毒、灭菌的概念掌握较好,对实验室生物安全、生物危害的等级分类、气溶胶、生物安全柜等知识的了解程度有限.结论 护理专业学生对实验室生物安全知识的了解程度有待提高,学校应加强实验室生物安全教育.     

适于Panhandle PCR模板的贵阳腐霉基因组DNA的提取方法

目的：探索适合作为锅柄聚合酶链反应（Panhandle PCR）模板的贵阳腐霉基因组DNA的提取方法。方法：采用氯化苄法、微波法、改良的SDS法提取贵阳腐霉基因组DNA,利用核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳法测定其纯度和浓度,并比较其作为Panhandle PCR模版的扩增效果。结果：氯化苄法、微波法、改良的SDS法均能提取到贵阳腐霉基因组DNA,氯化苄法提取的基因组DNA纯度及含量较高。而且氯化苄法提取的基因组DNA扩增的条带专一,特异性强。结论：氯化苄法提取的贵阳腐霉基因组DNA最适合作为Panhandle PCR的模板。     

女性激素受体检测在乳腺癌中的应用分析

女性激素受体在乳腺癌中治疗起到了重要作用,通过把握女性激素受体,利用分子生物学,有助于对乳腺癌症状进行更加准确的判断,为乳腺疾病治疗提供有效参考,使乳腺癌疾病治疗的效果得到提升。本文研究了女性激素受体在乳腺及乳腺癌中的应用情况,注重把握现有研究方法,希望能够为乳腺及乳腺癌疾病治疗提供一些参考和借鉴。     

增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及表达

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记的原核表达栽体,并观察EGFP基因在大肠杆菌中的表达情况.方法 据已知的EGFP基因序列,设计引物,并引入Nde Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.采用PCR技术从含有EGFP的质粒pEGFP-C1中克隆EGFP编码序列;将其亚克隆入表达载体pTWIN1,得到以EGFP为标记的原核表达载体pTWIN-EGFP.转化大肠杆菌ER2566菌株,IPTG诱导EGFP基因表达.结果 经过IPTG诱导后,细菌培养物在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光.结论 成功构建了原核表达载体pTWIN-EGFP,为应用EGFP作为报告基因和筛选标记奠定了实验基础.     

广西汉族大学生遗传性状调查分析

目的研究广西汉族遗传性状基因频率分布特点。方法采取群体遗传公认的方法调查了705名广西汉族大学生的卷舌、前额发际、耳垂、翻舌、眼睑、发旋、小拇指弯曲、拇指类型8对遗传性状,并与其他地区汉族进行聚类分析。结果调查结果显示,前额发际、耳垂、翻舌、卷舌、小拇指弯曲、拇指类型隐性基因频率高于显性基因频率,眼睑、发旋隐性基因频率低于显性基因频率;与其他地区汉族存在差异,广西汉族与宁夏汉族遗传距离(0.170 0)最近,与江西汉族遗传距离(0.474 5)最远。结论广西汉族人群遗传性状基因频率存在一定特点,其群体遗传学意义有待进一步探讨。     

医学检验专业学生生物安全防护知识调查

生物安全防护是指在实验室环境下处理和保存感染性物质的过程中采用一系列的防护措施,包括个人防护装备、实验室防护设施、相关仪器设备、物品和管理体系。近年来实验室SARS感染事件的发生,再一次给医学实验室的生物安全防护敲响了警钟。医学检验专业学生毕业后的主要去向是各级医院临床实验室,是患者血液、体液、排泄物标本集中场所,也是医院重要的污染源和传染源,是控制医院感染的重要环节。对医学检验专业学生生物安全防护知识进行调查,分析学生对实验室生物安全知识的了解现状,探讨对医学检验专业学生开展实验室生物安全知识专题教育的可行性。     

灭蚊真菌贵阳腐霉总RNA提取方法的建立

①目的 提取贵阳腐霉(Pythium guiyangense)的总RNA.②方法 诱导后的菌丝加入硅藻土,用液氮研磨成粉末状,在变性剂存在的条件下,用酚/氯仿/异戊醇抽提,除去DNA和蛋白质,再用醋酸钠和70%乙醇沉淀RNA,去除多糖.③结果 用该方法提取的RNA 样品,经紫外分光光度计检测,OD260/OD280＝1.98,OD260/OD230＝2.30;1%琼脂糖凝胶电泳检测,28SrRNA带的亮度约为18SrRNA带的2倍.④结论 成功地提取了贵阳腐霉总RNA,且RNA的纯度和完整性很好,能够达到进行分子生物学领域其他操作研究的标准.     

Pr1基因和绿色荧光蛋白基因融合表达载体的构建

目的:以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因为报告基因,类枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease,Pr1)基因为目的基因,分别构建含有EGFP-Pr1和Pr1-EGFP融合基因的原核表达载体.方法:将Pr1基因分别连接到EGFP基因的上游和下游,插入质粒pTWIN1,构建表达载体pEGFP-Pr1和pPr1-EGFP.结果:经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,重组菌株在长波紫外线的照射下,均能发出明亮的绿色荧光,并且诱导菌株破碎后均可检测到Pr1蛋白酶的活性.结论:应用基因工程技术成功构建pPr1-EGFP和pEGFP-Pr1融合基因表达载体,EGFP作为Pr1生物标记分子,有利于进一步开展Pr1基因的特异性功能研究.