蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：观察具有活血化瘀、软坚散结、补肾益气功效的中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠血尿代谢指标和肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响。 方法：①实验于2002-10／2003-10在潍坊医学院分子免疫实验室完成。选用30只8周龄健康雄性Wistar大鼠。②喂养1周后，随机选用22只大鼠，将其造成糖尿病模型：按50mg／kg腹腔注射链脲佐菌素(溶于0．1mol／L枸橼酸钠缓冲液中，pH4．5)，72h后血糖值达16．7mmol／L者确定为糖尿病模型。将造模成功的16只大鼠分为2组：模型组和中药组各8只。设其余8只为对照组(只注射相同体积的枸橼酸钠缓冲液)。中药组根据每只大鼠体质量(按大鼠体表面积换算成等效剂量21．6g／kg)每日给予五六个蜂贝化瘀胶囊(主要成分：黄芪30g，黄精30g，蜂胶15g，丹参30g葛根15g，生地30g，浙贝母15g，菟丝子30g)中的粉末进行灌胃，喂养10周，自由饮水。正常组及模型组用普通饲料喂服10周，自由饮水。③血糖、血肌酐、尿肌酐、尿素氮、尿蛋白测定采用日立7170A全自动生化分析仪，计算肌酐清除率[尿肌酐浓度(mg／d)×尿量(mL／min)／血肌酐浓度(mL／d)]。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况。采用免疫组化法和流式细胞仪检测Fas和Fas-L表达，以荧光指数[(样品的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)／正常组织平均荧光强度]表示Fas及Fas-L的相对含量。④用t检验比较组间差异。 结果：大鼠30只中因造模失败脱失6只，进入结果分析24只。①血糖、尿素氮、尿蛋白：模型组明显高于对照组和中药组(t=2．25～5．36，P<0．05～0．01)。②内生肌酐清除率：三组相近(P>0．05)。③单个肾小球细胞凋亡率和肾小管细胞凋亡率：模型组均明显高于对照组和中药组[(1．89±0．03)％，(13．85±0．53)％；0，(2．91±0．30)％；(0．65±0．03)％，(9．98±0．81)％，t=2．27～5．15，P<0．05～0．01]。④Fas和Fas-L荧光指数：模型组均明显高于对照组和中药组(1．51±0．07，1．69±0．11；1．00±0．02，1．00±0．02；1．25±0．02，1．31±0．12，t=2．39～4．85，P<0．05～0．01)。 结论：蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡，从而改善大鼠血尿代谢指标，发挥对肾脏的保护作用。     

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的调整及微血管并发症的防治

目的观察具有活血化瘀、补气益肾、软坚散结作用的蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的干预以及微血管并发症的影响. 方法实验于2001-07/2004-07在潍坊医学院分子免疫研究室完成.选用8周龄的清洁级健康雄性Wistar大鼠40只.①造模及分组用0.1 mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 4.5)链脲佐菌素配成4.5g/L的溶液,按50 mg/kg单次腹腔注射,72 h后取大鼠尾静脉血查空腹血糖值达16.7 mmol/L的大鼠30只纳入实验.采用随机抽签法将大鼠分成2组中药治疗组和糖尿病组,每组15只;同时另取与糖尿病大鼠体质量、鼠龄相匹配的健康大鼠15只作为正常对照组.②分组干预中药治疗组饲料中加用蜂贝化瘀胶囊中的粉末(蜂胶、丹参、葛根、贝母、生地、菟丝子、黄精及黄芪等),以21.6 g/kg喂养10周.糖尿病组及对照组普通饲料喂服大鼠10周.③生物化学指标的测定血浆醛糖还原酶活性测定参照Vander等方法测定血浆醛糖还原酶的辅酶-还原型辅酶2的吸光度示醛糖还原酶活性.尿蛋白测定采用改良Lowry法.全血糖化血红蛋白含量测定采用微柱亲和层析法.血脂测定总胆固醇和三酰甘油测定均采用酶法.血清脂质过氧化物含量测定脂质过氧化降解产物丙二醛含量,采用721分光光度计,按试剂盒说明测定.24 h尿蛋白测定采用考马斯亮蓝法.按Green等方法用Greiss试剂测一氧化氮的代谢产物亚硝酸盐含量,间接反映一氧化氮含量.④血管平滑肌细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入率测定以液闪仪测定各组血管平滑肌细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入率,反映血管平滑肌细胞内的DNA合成量.⑤形态学观察分别对肾脏和眼球切片进行苏木精-伊红和过碘酸-Schiff染色,光镜下观察肾脏及视网膜病理改变.制备肾脏和视网膜组织超薄切片,乙酸双氧铀和枸橼酸铅染色,透射电镜观察肾脏及视网膜超微结构的改变.⑥用t检验比较组间差异. 结果纳入大鼠55只,其中10只造模失败被剔除,进入结果分析45只.①血糖、总胆固醇及丙二醛水平中药治疗组均明显低于糖尿病组(t=4.15,2.38,2.35,P＜0.05～0.01),与正常对照组差异不明显(P＞0.05);糖尿病组均明显高于正常对照组(t=2.77～5.20,P＜0.05～0.01).②血醛糖还原酶活性、糖化血红蛋白和尿蛋白含量中药治疗组明显低于糖尿病组(t=2.35～5.03,P＜0.05～0.01),糖尿病组明显高于正常对照组(t=4.05,4.22,5.19,P＜0.01);血浆亚硝酸盐含量中药治疗组明显高于糖尿病组(t=2.21,P＜0.05),糖尿病组明显低于正常对照组(t=2.62,P＜0.05).③血管平滑肌细胞内3H-胸腺嘧啶核苷掺入率中药治疗组明显低于糖尿病组[(11 891±1 386),(12 729±1 438)min-1,t=2.23,P＜0.05],而与正常对照组差异不明显[(10 909±1 255)min-1,P＞0.05].④形态学观察结果糖尿病组大鼠肾脏结构和血管、视网膜血管均有炎性浸润性增生改变;中药治疗组其病理改变较糖尿病组明显减轻. 结论蜂贝化瘀胶囊可改善糖尿病大鼠各项代谢指标,且能明显减轻其肾及视网膜微血管并发症.     

戊已丸对胃溃疡模型小鼠胃组织中前列腺素含量的影响

1 材料 实验动物:昆明种雄性小白鼠,由山东中医药大学动物中心提供。动物在本实验室饲养3d,固体饲料和水自由摄取。药物来源:中药材购于济南市建联药店,经山东中医药大学中药鉴定教研室鉴定,黄连为毛茛科多年生草本植物黄连Coptis chinensis Fransh的根茎。白芍为毛茛科多年生草本植物Paeonia lactiflora Pall.的根。吴茱萸为芸香科落叶灌术吴茱萸Eudia rutaecarpa(Juss.)Benth.的近成熟果实。甲氰咪胍为国营青岛制药厂生产,批号931002;消炎痛为上海黄河制药厂生产,批号920642;利血平,上海医科大学红旗制药厂生产,批号     

实验性呼吸窘迫综合征时红细胞和白细胞变形能力改变及其与肺血流阻力的关系

实验性呼吸窘迫综合征犬油酸模型的红细胞和白细胞变形能力以及静注油酸后２４０ｍｉｎ内（０，３０，６０，１２０和２４０ｍｉｎ５个时点）肺血流阻力的动态变化，发现肺血流阻力进行性增加（由基础值３５．５±７．０ｋＰａ．ｓ／Ｌ增至２４０ｍｉｎ时９５．５±２６．５ｋＰａ．ｓ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），红细胞和白细胞变形指数分别由基础值０．３６±０．０８，４．１０±０．７５升为２４０ｍｉｎ时０．６２±０．２２，６．９１±１．４４（Ｐ＜０．０１），即红细胞和白细胞变形能力显著降低。单因素直线回归分析示肺血流阻力与红细胞和白细胞变形能力呈负相关。     

高糖对大鼠平滑肌细胞表型转变的影响

目的 通过复制高糖血症大鼠模型，观察长期高糖对血管内皮细胞及平滑肌细胞的影响，研究高糖致平滑肌细胞表型转变的作用机制。方法 采用血管功能检测，组织培养及免法。结果（１）高糖组血管乙酰胆碱依赖性舒张反应较对照组明显降低（Ｐ〈０．０１）；（２）高糖组血浆一氧化氮（ＮＯ）含量、血管壁ＮＯ合酶（ＮＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量均明显少于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论 长期高糖血症可引起血管内皮ＥＤＲＦ／ＮＯ系统严     

医学院校基础课教学方法改革的研究与实践

选用病理生理学作为高等医学院校基础课模板，医学系本科生作为研究对象，采用三种不同的教学方法进行基础课教学方法改革的研究与实践。结果表明传统教学法有传授知识较扎实的优点，缺点是束缚了学生能力的发挥，费学时较多；单纯启发式教学法能较好地发挥学生的主观能动性，但学习难度和学时数均增多，加重了学生的负担；而两者结合法则较好地发挥了传统教学法和启发式教学法的优点，既能发挥学生的主观能动性，又能加强学生对知识的理解，因此受到了学生的普遍欢迎，值得进一步深入研究与实践。     

中药复方连竹胶囊对糖尿病大鼠肾脏保护机制的研究

目的：建立糖尿病(DM)大鼠模型，研究中药“复方连竹胶囊”对DM肾病的治疗和保护机制。方法：将Wistar大鼠分为正常对照组、DM组和DM治疗组，DM大鼠模型由链脲佐菌素(STZ)诱导。治疗10周后，测定各组大鼠尿量、24h尿蛋白、尿素氮、血肌酐、糖化血红蛋白(GHbAlc)、血清丙二醛(MDA)和血浆NO含量，光镜下观察肾脏组织病理学改变。结果：DM组的尿量、24h尿蛋白、尿素氮、血肌酐、GHbAlc和MDA均明显高于正常对照组，血浆N0含量低于正常对照组(P＜0、01或P＜0．05)，形态学观察可见DM组大鼠肾脏有弥漫性肾小球硬化表现，肾小球系膜区增宽、肾小管基底膜增厚等病理改变；DM治疗组的以上指标与正常对照组比较无明显差异(P＞0．05)，与DM组比较除NO外均显降低，而血浆NO含量明显升高(P＜0．05)，肾脏病理改变较DM组有明显减轻。结论：复方连竹胶囊对DM大鼠并发肾脏病变有较好的治疗作用，其机制可能与该方剂能抑制脂蛋白非酶基糖化、抑制脂质过氧化、促进NO生成、保护肾脏功能等作用有关。     

周次清益气活血治疗心系疾病经验

周次清教授对心系疾病的临床与研究造诣颇深。周次清老师认为，心系疾病发病多因年老体衰，气血亏虚，脏腑功能衰退，或久病及心，或心系病损日久，积损正衰。心系疾病的病机为本虚标实，以本虚为重点。各种致病因素引起人体内部阴阳失调、气血失和的病理变化贯穿于冠心病的全过程，其中血瘀、痰浊、气滞、寒凝等标实证是建立在气虚、血虚、阴虚、阳虚等本虚的基础上。因此，治则当扶正祛邪，标本兼顾，以补为通、补中寓通、通补兼施，达到气盈血行、血脉通利的目的。在心系疾病的各种临床辨证类型中，几乎都可见到气虚血瘀的证候表现，因此，益气活血是周老常用的治法之一。     

2型糖尿病时血管内皮细胞的超微结构观察

目的观察2型糖尿病时大鼠胸主动脉内皮细胞的光镜及形态学变化，探讨其病变的发生机制。方法复制高糖、高脂血症动物模型，光镜及电镜下观察胸主动脉内皮细胞的病理变化。结果①高糖血症：光镜下见胸主动脉内皮细胞肿胀、肥胖，呈立方状，三五成群向腔面突出。内皮下纤维组织轻度增生。电镜下内皮细胞表面有破损及绒毛状突起，并见血浆蛋白附着物；细胞浆内有较正常明显增多的糖原颗粒，细胞浆内吞饮小泡增多。细胞核周池增宽。②高脂血症：光镜下见内皮细胞肿胀、肥胖，个别细胞向腔面呈出芽状生长。电镜下内皮细胞表面有指状突起，胞浆内见较大的吞饮泡，平滑肌细胞有向内膜下迁移的倾向。结论2型糖尿病的高糖及高脂可不同程度地损伤血管内皮细胞，是导致进一步血管病变的重要因素。     

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病微血管病变相关指标的影响

目的观察蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病(DM)大鼠微血管病变的作用及机理。方法将Wistar大鼠分为正常对照组、DM模型组、中药治疗组、中药对照组和西药对照组,测定各组大鼠血糖、血脂、脂质过氧化物、糖基化终末产物、醛糖还原酶(AR)及相关基因表达的变化。结果DM模型组大鼠血糖、甘油三酯、糖化血红蛋白、AR活性、丙二醛和T细胞凋亡率均明显上升,T细胞中Fas配体(FasL)、脂肪细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达均明显增高,中药治疗组大鼠以上指标显著降低,与DM模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论蜂贝化瘀胶囊能有效降低2型DM模型组大鼠的血糖、血脂、糖化血红蛋白、AR活性和丙二醛含量,减少相关基因表达和T细胞凋亡率,对2型DM微血管病变有较好的治疗作用。