APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学及病理学特征研究

目的:探讨不同月龄APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠行为学及病理学的变化特征,为合理运用该模型研究阿尔茨海默病提供可靠依据。方法:采用旷场实验、新物体辨别实验、Y迷宫以及Morris水迷宫等行为学实验方法观察不同月龄的APP/PS1转基因小鼠的运动、新物体辨别以及学习记忆能力的变化;通过免疫组织化学方法检测不同月龄转基因小鼠脑内Aβ含量及星形胶质细胞数量等病理特征的变化。结果:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠的运动能力随月龄增加逐渐下降,9月龄时对新物体的识别、工作记忆及空间学习记忆能力均出现明显损害。同时,该转基因小鼠的海马在6月龄时开始出现Aβ沉积和星形胶质细胞数量增加,9月龄时各种病理变化更为明显。结论:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠在6月龄时开始出现脑内病理改变,9月龄时各种认知行为发生明显异常。提示该转基因小鼠脑内病理改变可能早于行为异常,因此可根据实验目的选取相应月龄的动物。     

Suvorexant通过调控PER1蛋白表达改善APP/PS1小鼠昼夜节律紊乱行为

目的:探讨orexin双受体拮抗剂suvorexant对9月龄APPswe/PS1dE9(APP/PS1)双转基因小鼠行为昼夜节律紊乱的影响及机制。方法:8月龄APP/PS1小鼠和具有同样遗传背景的野生型(WT)小鼠随机分为4组,在ZT0口服灌胃suvorexant或等体积溶剂28 d,采用跑轮行为学观察小鼠昼夜节律变化,免疫组织化学和Western Blot分别检测SCN脑区Aβ斑块和PER1蛋白的表达。结果:(1)在光暗交替环境中,给予suvorexant后APP/PS1小鼠相对振幅(P 0. 01)和鲁棒值(P 0. 01)明显升高,昼夜变异性明显降低(P 0. 01)。(2)在持续黑暗环境中给予suvorexant后,APP/PS1小鼠的自由运转周期明显缩短(P 0. 05),活动持续时间缩短(P 0. 01),相对振幅增大(P 0. 01),昼夜变异性减小(P 0. 01)。(3)免疫组化结果显示各组动物的SCN脑区未检测到Aβ阳性斑块。(4) APP/PS1小鼠给予Suvorexant后部分恢复了PER1蛋白表达的昼夜节律性。结论:suvorexant通过恢复SCN脑区PER1的昼夜节律性表达改善APPswe/PS1dE9小鼠的昼夜节律紊乱,增强其昼夜节律稳定性。     

应用天然化合物抑制β-淀粉样蛋白寡聚为原理的药物开发

β-淀粉样蛋白(amyloidβ-peptide,Aβ)异常聚集被认为是导致阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)的重要特征.因此,抑制Aβ寡聚来降低其毒性是AD药物开发的重要发展方向.许多能透过血脑屏障的天然化合物成为研究者关注的重点,本文将重点分析已经报道过的白藜芦醇、巴西木素、儿茶素、姜黄素、环已六醇等对Aβ寡聚的抑制作用,分析其抑制寡聚的实验方法,分析抑制寡聚的效果及原理,并预测分析未报道的部分化合物是否具有抑制Aβ寡聚的潜在作用,这将为探寻治疗AD可能的天然化合物提供一定的参考.     

大鼠空间学习记忆和海马长时程增强的相关性研究

目的 探讨生理或病理状态下大鼠海马突触可塑性和空间学习记忆的相关性,为在体电生理实验和行为学实验结果的一致性提供依据.方法 按照随机数字表随机选择SD大鼠38只,进行Morris 水迷宫空间学习记忆行为学和在体海马晚期长时程增强(L-LTP)电生理实验.主要指标包括大鼠连续5d定位航行试验寻找水下平台的逃避潜伏期、撤除平台后空间探索试验的目标象限游泳时间百分比以及高频刺激后3h的场兴奋性突触后电位(fEPSP).结果 双侧海马注射4 nmol Aβ25-35明显伤害了大鼠水迷宫实验中的空间学习记忆能力(P＜0.05)和在体海马L-LTP(P＜0.05).正常对照组大鼠L-LTP与逃避潜伏期呈现明显负相关(r=-0.8306,P＜0.01),与目标象限游泳时间百分比呈现明显正相关(r=0.7709,P＜0.01);AD模型组大鼠3h后fEPSP幅度也与逃避潜伏期具有明显负相关(r=-0.7675,P＜0.01),与目标象限游泳时间百分比正相关( r=0.8049,P＜0.01);将两组大鼠数据合并后,海马L-LTP与逃避潜伏期和目标象限游泳时间百分比的相关性更高,分别为r=-0.9124 (P＜0.01)和r=0.9745 (P＜0.01).结论 大鼠在体海马L-LTP电生理记录与空间学习记忆行为学测试结果具有良好的相关性,提示海马L-LTP可能是行为学改变的电生理机制,其损伤可以在一定程度上反映动物学习记忆功能障碍.     

髋关节一过性骨质疏松症的磁共振成像诊断

目的探讨磁共振成像(MRI)在髋关节一过性骨质疏松症(TOH)中的诊断价值。方法对9例髋关节一过性骨质疏松症患者的临床和影像学资料进行回顾性分析。结果 9例患者均在患侧髋关节骨质内出现骨髓水肿区,5例患者出现股骨头、颈部骨质信号异常,其余4例信号异常区除股骨头、颈部外,还包括股骨粗隆间骨质。3例患者股骨头关节面下骨质内可见局限性骨质损伤区,其症状持续时间较无骨质损伤的患者明显延长(P<0.05)。同时,骨髓水肿区范围与症状持续时间、有无股骨头关节面下骨质损伤与骨髓水肿区范围之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MRI是TOH各种检查技术中最敏感、最可靠的检测方法,能反映出TOH病理变化过程。     

如何提高医学生学习生理学的兴趣

生理学是一门重要的基础医学理论课程,但由于其内容相对抽象、复杂、难以理解,同时目前教学方法相对单一,加之学生初次接触功能学科尚未掌握有效的学习方法,造成学生学习难度较大。兴趣是最好的老师,采用生理学教学与生活常识、临床知识相结合,穿插生理学史话和科研内容、以及适当采用多媒体技术等多种教学手段,可以有效地激发医学生学习生理学的兴趣,提高生理学学习效率。     

Aβ25-35伤害大鼠空间学习记忆和在体海马长时程增强的联合研究

目的:探讨海马内注射β-amyloid protein 25-35(Aβ25-35)所致Alzheizer’s病(AD)模型大鼠空间学习记忆功能障碍的海马突触可塑性长时程增强(LTP)机制,为联合开展AD动物行为学和在体电生理学研究提供实验证据。方法:在脑立体定位仪上给予大鼠双侧海马分别注射4 nmol/L Aβ25-35或等体积生理盐水每侧2μl,手术后恢复2周,每只大鼠依次进行行为学和电生理两部分实验。首先,利用Morris水迷宫进行空间学习、记忆功能测试;之后,进行在体海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)引导记录实验,观察突触可塑性指标长时程增强(LTP)的改变。结果:与对照组相比,海马内注射Aβ25-35大鼠的空间学习记忆功能和在体海马突触可塑性LTP均有改变,其中:逃避潜伏期和逃避距离明显增加(P<0.01);目标象限内游泳时间和距离明显缩短(P<0.01);在体海马LTP幅度显著降低(P<0.01)。结论:海马内注射Aβ25-35可导致大鼠空间学习记忆功能障碍;联合实验中Aβ25-35同样可引起在体海马LTP改变。提示同批动物先后进行行为学和电生理学测试的方法是可行的,行为学实验不会影响后续LTP的实验结果。因此,本实验为行为学改变后进行在体LTP机制探讨提供了实验依据,为有效开展行为学和电生理学实验提供了思路。     

激光共聚焦扫描显微镜技术在大鼠皮层神经元细胞内钙离子浓度动态测定中的应用

目的探讨激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)技术在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中的应用。方法采用原代培养大鼠皮层神经元,用LCSM测定给KCl前后细胞内钙离子浓度的动态变化。结果培养神经元状态良好,用LCSM准确、稳定、可靠地测出细胞内钙离子浓度的动态变化。结论LCSM在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中具有明显优势。     

科研实验室开放对培养医学本科生创新与科研能力的作用初探

当前,医学高等院校本科生的教育培养存在理论课教学内容固定单一、方式传统,实验课教学内容缺乏创新性等诸多不足,严重影响医学本科生科研和创新能力的培养。通过多年的实践,我们的体会是:开放科研实验室、鼓励本科生参加课题组并给予全方位科研训练,可以全面提高学生的综合素质,有效提升医学本科生科研和创新能力。