远华蟾蜍精通过调节应激与凋亡通路诱导结直肠癌细胞的凋亡

目的研究远华蟾蜍精对结直肠癌（CRC）细胞活力及凋亡的作用,并分析其抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的机制。方法 四甲基偶氮唑盐法检测远华蟾蜍精对CRC细胞活力的影响,细胞核荧光染色及流式细胞术检测TBG对肿瘤细胞凋亡的作用; 免疫荧光检测线粒体膜电位及细胞内ROS水平,Western blotting及应激与凋亡信号抗体芯片检测TBG作用于肿瘤细胞后凋亡 相关蛋白表达变化。结果TBG以浓度和时间依赖关系显著抑制HCT116、SW480的细胞活力;TBG诱导HCT116细胞发生核 固缩,形成凋亡小体,增加Annexin V阳性细胞率;TGB上调细胞p53基因和Bax蛋白表达,促进Caspase9和PARP发生片段化; 抗体芯片发现该药诱导肿瘤细胞中Bad 磷酸化和PARP片段化,抑制了IΚBα、TAK1 蛋白磷酸化和Survivin 蛋白表达。结论 TBG通过诱导细胞凋亡而显著抑制CRC细胞活力,其凋亡诱导作用可能与p53介导的Bax通路活化及IAP通路的阻断相关。     

小檗碱通过ROS及caspase通路对肝癌HepG2细胞凋亡的作用

目的 探究小檗碱(BBR)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制及作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L) BBR对肝癌HepG2细胞的抑制作用;采用Hoechst 33342染色观察处理后HepG2细胞形态学变化;用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率;间接荧光标记法检测BBR对细胞内活性氧簇(ROS)水平的影响;JC-1染色法检测细胞内线粒体膜电位的变化;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3的表达变化.结果 MTT法显示BBR可呈剂量、时间依赖性抑制肝癌HepG2细胞活力(P＜0.05);Hoechst 33342染色发现细胞形态发生明显变化,0μmol/L BBR处理的细胞呈淡蓝色,处理组细胞核固缩,形成凋亡小体,细胞凋亡率与药物浓度呈正相关(P＜0.05).流式细胞术发现BBR能使细胞内ROS升高,线粒体膜电位水平下降.Western blot法显示随着药物浓度升高,Bax、Cleaved-caspase-3、cleaved-聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达增强,Bcl-2蛋白表达降低,凋亡相关蛋白caspase-3表达下降.结论 BBR在体外可能通过增加ROS、提高促凋亡蛋白Bax并激活caspase-3表达抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

血管腔内介入治疗下肢严重缺血后急性肾损伤危险因素

目的探讨血管腔内介入治疗下肢严重肢体缺血(CLI)后急性肾损伤(AKI)危险因素。方法回顾性分析168例接受血管腔内介入治疗的下肢CLI患者,对比剂均为低渗型碘克沙醇,统计发生术后AKI例数,以单因素及多因素Logistic分析筛选AKI危险因素。结果168例CLI患者中,42例(42/168,25.00%)术后发生AKI,其中1级AKI 31例,2级6例,3级5例;AKI与无AKI患者间年龄、合并糖尿病及慢性肾衰竭、术前糖化血红蛋白、血肌酐及肾小球滤过率(eGFR)差异均有统计学意义(P均<0.05)。多元Logistic回归分析结果显示,年龄及合并慢性心力衰竭、慢性肾衰竭、糖尿病均与AKI独立相关(P均<0.05)。结论血管腔内介入治疗CLI后发生AKI与患者年龄及术前并发慢性心力衰竭、慢性肾衰竭、糖尿病均有关。