Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的:在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上,检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA)的影响,探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.方法:用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞;采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测,用激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3.1数据库资料(http://www.targetsean.org)探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响,预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.结果:Ad-14-3-3σ处理细胞以后,CNE-1与CNE-2相比较,有37个microRNA有明显差异,CNE-1中有17个上调,20个下调.其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、hsa-miR-203、hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-mjR-100.结论:Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA,miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式,缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异,而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关.     

弓形虫速殖子侵入宿主细胞机理的研究进展

弓形虫速殖子侵入宿主细胞机理的研究进展梁志慧综述徐麟鹤审校刚地弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）是专性细胞内寄生虫，入侵宿主细胞乃是弓形虫生存的必要条件［１］。弓形虫速殖子入侵宿主细胞的过程及机理极其复杂，可归纳为５个方面：１．细胞识别，２．...     

蒿甲醚,甘草对实验性弓形虫病的疗效

小鼠腹腔接种１万个速殖子，２ｈ后分别灌胃给予：甘草３２ｇ／ｋｇ、甘草１６ｇ／ｋｇ、蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ、蒿甲醚１００ｍｇ／ｋｇ、乙胺嘧啶５０ｍｇ／ｋｇ及５％淀粉溶液（对照组），连续１４ｄ。甘草各组与对照组小鼠死亡天数无差异。蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ组的疗效与乙胺嘧啶组接近。图象分析表明：蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ组的虫体，其周长、面积、体积均数大于对照组。说明虫体有肿胀。在透射电镜下，速殖子的核膜消失     

小鼠T-bet基因重组腺病毒载体的构建

【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体，为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet／GFP-RV中切获约1．7kb的小鼠T-betcDNA片段，与穿梭质粒pShuttle连接，再通过稀有酶切位点将含T-betcDNA的表达盒与Adeno-X腺病毒载体骨架连接，构建重组载体pAdeno-T-bet，测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变，并转染HEK293细胞，出现CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒DNA行PCR鉴定。【结果】PCR及酶切证实：T-betcDNA正确克隆到穿梭质粒pShuttle中，带T-betcDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区，并在HEK293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒pAdeno-T-bet。【结论】本实验成功构建了小鼠T-bet基因重组腺病毒载体，并在HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒。     

相同遗传背景不同辐射抗拒鼻咽癌细胞miRNA差异表达的研究

目的:在验证相同遗传背景鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2R和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-2R和CNE-2中的表达差异与肿瘤辐射抗拒的关系。方法:通过观察X线照射对CNE-2R和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件进行分析及线性二次模型拟合存活曲线,比较CNE-2R和CNE-2细胞剂量存活曲线及其生物学参数;采用μParafloTM微流体芯片检测,用激光扫描仪(GenePix 4000B, Molecular Device)采集杂交图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan311数据库资料(http://www.targetscan.org),预测CNE-2R和CNE-2细胞miRNA差异表达与NPC不同辐射抗拒的关系。结果:发现在CNE-2R和CNE-2细胞中存在miRNA的差异表达,即与CNE-2细胞比,在检测到的719个miRNA中,CNE-2R细胞中有37个上调,29个下调,其中检测量的绝对值≥2 000 且两者相差≥2倍的miRNA共12个：hsa-miR-200b、hsa-miR-224、hsa-miR-26b、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-205、hsa-let-7e、hsa-let-7g、hsa-miR-19b、hsa-miR-24、hsa-miR-103、hsa-miR-106b和hsa-miR-93。分析结果表明显著差异表达的miRNA与辐射抗拒密切相关。结论:相同遗传背景不同辐射抗拒NPC细胞株CNE-2R和CNE-2细胞的miRNA表达存在差异;差异表达的miRNA与辐射抗拒相关。     

Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的： 在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌（nasopharygycarcinoma, NPC）细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上，检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA, miRNA)的影响，探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。方法: 用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞；采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测，用激光扫描器收集杂交的图像，经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异，根据Targetscan3.1数据库资料（http://www.targetscan.org）探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响，预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。结果: Ad-14-3-3σ处理细胞以后，CNE-1与CNE-2相比较，有37个microRNA有明显差异，CNE-1中有17个上调，20个下调。其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1 000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、 hsa-miR-203、 hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-miR-100。结论: Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA, miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式，缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异，而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关。     

在检验专科教育中加强实验教学培养学生能力

本文着重从提高医学专科教育质量着手,试图从每门课的改革试验做起,培养实用型的医学检验人才。通过加强实验教学与技术操作等措施,对学生的知识、能力、智力进行综合培养。考试成绩总评分析与实验成绩、分析判断能力成绩、阅读综合归纳成绩进行直线相关分析呈正相关(P<0.005)。     

弓形虫的酶细胞化学及蒿甲醚对其影响的研究

小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子1万个，2h后分别灌服5％淀粉溶液及蒿甲醚200mg／kg，连续8d，取腹腔液沉淀作电镜酶细胞化学。测定弓形虫虫体胞嘧啶单核苷酸酶（CMP酶）和葡萄糖-6-磷酸酶（G－6－P酶）的定位及用药后2种酶超微结构水平上的变化。结果表明，CMP酶定位于虫体的溶酶体，药物对其无明显影响。G－6－P酶定位于虫体的质膜外及围虫泡内，用药后酶反应减弱，说明药物对该酶的活性有一定影响，这可能是药物抗弓形虫的作用机制之一。     

慢性弓形虫感染小鼠接种鼠白血病病毒诱发免疫缺陷后弓形虫脑炎的发生

世界上感染弓形虫者比例很高,但大多数并无明显症状。相反,至少30%的艾滋病患者,体内有抗弓形虫抗体,有慢性隐性感染,他们有感染的复发并发生弓形虫脑炎。因而,免疫应答对防止慢性弓形虫感染者发生     

小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体的构建

[目的] 构建小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体,为 T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的 T-bet生物表达系统.[方法] 采用内切酶从质粒 T-bet/GFP-RV中切获约 1.7 kb的小鼠 T-betcDNA片段,与穿梭质粒 pShuttle连接,再通过稀有酶切位点将含 T-betcDNA的表达盒与 Adeno-X腺病毒载体骨架连接,构建重组载体 pAdeno-T-bet,测序鉴定无错配及插入移位等 DNA顺序改变,并转染 HEK293细胞,出现 CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒 DNA行 PCR鉴定.[结果] PCR及酶切证实: T-betcDNA正确克隆到穿梭质粒 pShuttle中,带 T-betcDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组 E1A缺失区,并在 HEK293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒 pAdeno-T-bet.[结论]本实验成功构建了小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体,并在 HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒.