大鼠血管平滑肌Caveolin-1 与TRPC1 相互作用及其在肺动脉高压中的变化

【立论依据】 业已证明,经典瞬时感受器电位1(TRPC1)通道蛋白编码的钙池操纵性钙通道(SOCC)表达上调和功能增强与肺血管增生、重构,以及肺高压密切相关,TRPC1/SOCC 存在于胞膜窖上。Caveolin-1(Cav1)是胞膜窖的主要结构蛋白,野百合碱肺高压模型大鼠和原发性肺动脉高压患者的肺血管平滑肌细胞胞膜窖分布密度和Cav1 表达都显著增加。 【设计思路与实验内容】 在对照(CON)组和慢性低氧肺高压(CH)组大鼠,采用透射电镜、定量RT-PCR 等技术和蛋白质印迹技术,观察主动脉和肺动脉主动脉上观察胞膜窖分布密度及Cav1 表达变化;此外观察胞膜窖结构被破坏后、环匹阿尼酸(CPA)、苯肾上腺素(PHEN)、内皮素-1(ET-1)和KCl 所引起的肺动脉和主动脉张力的不同变化,以明确胞膜窖的结构完整与血管平滑肌张力变化之间的关系,进一步分析这种关系在肺循环和体循环之间的异同。 【材料】 SD 大鼠、8 通道信号采集系统、定量PCR 仪、透射电镜,以及CPA、PHEN、ET-1 和MCD 等试剂。 【可行性】 已掌握完成本实验所需的技术、本项目2013 年获得国家级大学生创新训练项目资助。血管环张力实验获得初步结果:(1)两组MCD 预处理均抑制PHEN 引起主动脉张力,但是对KCl 引起的主动脉张力无抑制作用,与CON 组比较,在CH 组MCD 预处理抑制作用无进一步增强。(2)两组MCD 预处理均抑制对PHEN 引起的肺动脉张力,但对KCl 引起的肺动脉张力也无抑制作用,与CON 组比较,在CH 组MCD 预处理抑制作用也无进一步增强。提示,电压依赖性钙通道不依赖于胞膜窖的完整性,PHEN 介导的血管收缩可能依赖于胞膜窖的完整性,但慢性低氧预处理对这一过程没有影响。 【创新性】 本课题预期结果:(1)在正常大鼠上,肺动脉与主动脉上均存在胞膜窖分布密度和Cav1 表达,并对血管张力产生影响。(2)在CH 大鼠上,肺动脉胞膜窖分布密度和Cav1表达,以及血管张力的变化,可能与主动脉存在不同。本课题试图阐明肺循环与体循环血管TRPC1/SOCC 与胞膜窖(Cav1)的关系,探索慢性低氧肺高压发病过程中,肺循环与体循环血管张力变化和TRPC1/SOCC 调控的不同特点,为寻找治疗肺高压的新靶点提供理论依据。     

PBL教学法在研究生心血管生理学实验中的应用

总结医学研究生心血管生理学实验课运用PBL教学中问题设计、分组策略、教师角色定位等方面需要注意的问题;针对研究生特点与需求合理设置教学内容;借助多媒体互联网、整合导师资源、促进自主学习,扩展教学空间。     

慢性低氧左移5-HT诱发大鼠肺内动脉环收缩反应的浓度-依赖性曲线

目的探讨慢性低氧对大鼠肺内动脉血管重构以及5-HT诱发肺内动脉血管环收缩效应的影响。方法常压慢性低氧诱导慢性肺动脉高压大鼠模型。比较正常组（NOR组）和慢性低氧组（CH组）大鼠血流动力学参数平均右心室收缩压（mRVSP）,平均右心室压（mRVP）及右心室压最大上升速率（dp／dtmax）及右心室肥厚指数以鉴定模型;光学显微镜下观察肺血管的病理改变;记录肺内动脉血管张力,观察5-羟色胺（5-HT）收缩效应;比较不同Ca^2＋通道阻断剂对5-HT引起的收缩效应的阻断作用。结果与NOR组比较,低氧3～4周后CH组的mRVSP、mRVP、dp／dtmax和右心室肥厚指数均明显增高（P〈0．01）;CH组大鼠肺内动脉中膜显著增生;CH组的5-HT引起的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线左移;30μmol／L氯化镧对30μmol／L 5-HT预收缩肺内动脉血管环效应的阻断作用在CH组显著增高（P〈0．01）,但30μmol／L SKF96365的阻断作用无显著性意义。结论慢性低氧3～4周可稳定引起大鼠肺动脉高压,并左移5-HT诱发的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线;Ca^2＋池操纵性Ca^2＋通道功能的上调可能是CH组5-HT高反应性的一种机制。     

非医学专业基础医学概论教学改革的探索

结合基础医学概论课程的改革背景,以公共事业管理专业的学生为研究对象,通过优化教学内容、运用多元化教学方式和评价体系,帮助学生构建系统性知识体系,提高学习热情和自主学习能力,提升教学质量。     

延髓腹面降压区与肾血管阻抗的关系（Ⅰ）

实验用３００～３５０ｇ雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，氨基甲酸乙酯腹腔麻醉。电刺激（０．２ｍｓ４０μＡ１００Ｈｚ８ｓ）并经兴奋性氨基酸Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）检测性验证，提示大鼠延髓尾端Ⅻ对脑神经丛第三支根部１ｍｍ×１ｍｍ区域为降压区（ｄｅｐｒｅｓｓｏｒａｒｅａｉｎｖｅｎｔｒａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｍｅｄｕｌｌａｏｂｌｏｎｇａｔａ，ＶＳＭｄ）。电刺激该区可见平均动脉血压（ＭＡＰ）以１６．９９的斜率下降，最大百分数为２６．８２±８．９３（Ｐ＜０．０１　。ｎ＝１０）．其下降率与刺激时间呈对数式关系。Ｌ－Ｇｌｕ微量注射后。在降压的同时心率（ＨＲ）减慢，分别为２．６７±０．４７ｋＰａ（Ｐ＜０．０１）和３０．３３±４．２３ｍｉｎ￣（－１）（Ｐ＜０．００１，ｎ＝６）。切断双侧迷走神经后降压和减心率反应减弱，分别为１．４６±０．４５ｋＰａ和５．６±４．８ｍｉｎ￣（－１）（Ｐ＜０．０１；ｎ＝５）；双侧损毁肾交感神经，基础ＭＡＰ下降，同时降压反应被削弱，为１．８１±０．４９ｋＰａ（Ｐ＜０．０１）但对减心率反应无影响（Ｐ＞０．０５，ｎ＝５）。     

延髓腹面升压区提升大鼠肾灌流压作用依赖血管内皮

实验在３４只乌拉坦麻醉的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠上进行，以肾灌流压（ＰＰｋ）指标，观察皂角苷和酚妥拉明灌肾动脉对延髓腹面升压区（ＶＳＭｐ）兴奋诱发的肾血流阻抗增加效应的影响，结果表明：（１）皂角苷灌流肾动脉几乎完全消了电刺激ＶＳＭｐ诱发的ＰＰｋ增加效应；（２）在电刺激ＶＳＭｐ诱发的ＰＰｋ升高期间，肾静脉收集液回灌同体肾动脉可提升ＰＰｋ，（３）酚妥拉明灌流肾动脉后，可明显抑制电刺激ＶＳＭｐ及肾上腺素灌流     

医学研究实验室管理及研究生培养之我见

研究生的科研工作主要在实验室完成,就如何加强实验室的管理以提高实验室的综合效益,满足高质量研究生培养的需要,总结实际工作经验如下:加强领导,完善制度,建立实验室资源共享机制;强化研究生综合素质的培养;提高实验技术人员科研素质等,供有志于医学研究实验室管理和研究生培养的同仁交流和参考。     

硝苯地平和SK&F 96365对cyclopiazonic acid触发的大鼠主动脉血管环收缩效应的影响

目的探讨介导Ca2+池操纵性Ca2+内流的Ca2+通道特性.方法取大鼠胸主动脉环,每个动脉环长约2.5 mm,用张力换能器记录主动脉环收缩反应.结果 (1)cyclopiazonic acid(CPA,1～100 μmol.L-1)以浓度依赖性触发大鼠主动脉环的双相收缩反应(收缩峰和平台),10 μmol.L-1为最大效应浓度.(2)SK&F 96365(1～60 μmol.L-1)以浓度依赖性抑制CPA触发血管环收缩平台.(3)硝苯地平1 μmol.L-1阻断电压依赖性Ca2+通道后,SK&F 96365 30 μmol.L-1仍能抑制CPA触发血管环收缩平台.结论电压依赖性Ca2+通道和Ca2+池操纵性Ca2+通道介导了CPA触发的大鼠主动脉环平滑肌的收缩反应.     

巯亚硝基卡托普利的抗高血压效应

目的观察巯亚硝基卡托普利（ＣａｐＮＯ）对不同类型高血压大鼠血压的影响并与卡托普利（Ｃａｐ）相比较。方法记录麻醉和清醒大鼠颈动脉血压。结果ＣａｐＮＯ对正常大鼠、急性二肾一夹高血压大鼠；自发性高血压大鼠均表现明显的剂量依赖性的降压效应，且强于同剂量Ｃａｐ。其特点表现早、快、强而持久，加速降压速率，延长降压时程、增大降压曲线面积，尤其对舒张压的降压影响更显著于对收缩压的影响，上述作用在高血压动物的表现均较正常血压动物更明显。结论ＣａｐＮＯ抗高血压作用优于Ｃａｐ，其对舒张压的作用强于对收缩压的影响。