采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究

目的：采用牙本质屏障法对4种常用的牙体充填材料和2种牙本质粘接剂进行细胞毒性试验,并与传统的滤膜扩散法进行比较,从而探讨牙本质屏障法的优势。方法：选取丁香油水门汀、磷酸锌水门汀、粘结用玻璃离子水门汀、复合树脂和两种自酸蚀粘接剂（REMI BOND与Adper Easy One）进行试验。牙本质屏障法中将L929细胞立体培养于聚苯乙烯网状支架上,切取人第三磨牙近髓牙本质片,用液压通透装置测量其通透性,选取试验区域内通透值相近的牙本质片进行试验。将长满细胞的网状支架置于细胞培养分隔灌注小室的“牙髓腔”,牙本质片（“牙髓面”）紧贴网状支架放置其上,试验材料和对照与牙本质片的“面”接触24 h后用MTT法测量细胞的光密度值（D_{540 nm}）,试验材料与阴性对照光密度值的百分比为材料的相对细胞存活率。使用非参数检验对结果进行统计学分析。滤膜扩散法中材料与有单层细胞生长的滤膜接触24 h后进行细胞染色、评级。结果：近髓牙本质片的平均通透值为0.293 μL/(min·cm²·cmH₂O)（1 cmH₂O=0.098 kPa）。牙本质屏障法中,丁香油水门汀降低细胞存活率至82%,REMI BOND与Adper Easy One分别降低细胞存活率至63%和54%,其余材料对细胞无损伤或损伤很低;滤膜扩散法中,光固化复合树脂为中度细胞毒性、牙科粘接用玻璃离子水门汀为轻度细胞毒性,其余材料均为重度细胞毒性;6种材料在牙本质屏障法中表现的细胞毒性明显低于滤膜扩散法的试验结果。结论：使用牙本质屏障法测得材料与三维培养的细胞接触后的细胞毒性比使用滤膜扩散法时的细胞毒性低,结果与临床实际相关性好。     

口内扫描和三维打印技术辅助下活动义齿修复张口受限患者牙列缺损一例

严重的张口受限患者在进行义齿修复时,存在制取印模困难的问题,本课题组利用口内扫描结合三维打印技术成功对1例张口受限患者的牙列缺损进行可摘局部义齿修复。     

氧化锆的表面粗化和改性

为提高氧化锆与粘接材料间的粘接强度,研究的着眼点主要集中在氧化锆的表面处理,包括表面粗化和表面改性.表面粗化包括表面喷砂、选择性渗透蚀刻和Nobelbond技术,旨在增加氧化锆表面粗糙度或使表面形成孔隙,从而增加其机械嵌合力.表面改性包括内涂层技术及各种途径的硅涂层技术(化学摩擦法、热分解法、溶胶凝胶法、四氯化硅蒸汽法),旨在增加氧化锆表面硅元素含量,通过硅烷偶联剂提高其与树脂粘接剂间化学结合力.本文就近年来氧化锆表面处理方法进行综述,旨在帮助口腔医师更好地将氧化锆材料应用于临床.     

药用大黄全长转录组测序分析及Ⅲ型聚酮合成酶家族基因鉴定

目的 利用全长转录组测序技术挖掘药用大黄蒽醌类成分合成中的关键酶Ⅲ型聚酮合成酶（PKS Ⅲ）家族基因。方法 利用PacBio Sequel Ⅱ平台进行药用大黄全长转录组测序，数据通过非冗余蛋白（NR）、Swiss-Prot、京都基因与基因组百科全书（KEGG）、真核生物相邻类的聚簇（KOG）、基因本体（GO）数据库进行功能注释。筛选PKS Ⅲ家族基因全长并进行编码蛋白生物信息特征分析，借助MEGA 6.0构建PKS Ⅲ家族基因系统发育进化树。结合RNA-Seq数据分析，运用TBtools计算PKS Ⅲ家族基因的相对表达量。结果 共获得原始数据55.50 GB，52 960条高质量转录本，平均长度1 712.56 bp；50 007条Isoforms在NR、Swiss-Prot、KEGG和KOG数据库中得到注释。GO分类注释到生物过程、细胞组分和分子功能3个类别的65个小组。KEGG代谢通路共有17 637条转录本被注释于137条通路中，其中标准次生代谢通路15条。筛选到16个含开放阅读框的Isoforms，编码8个PKS Ⅲ家族基因，包括RoALS1-3（芦荟松合酶）、RoCHS1-3（查耳酮合酶）、RoSTS（二苯乙烯合酶）和RoPKS（聚酮合成酶）等，编码蛋白长度为391~393 aa，无信号肽或跨膜结构域，均定位于细胞质中。编码蛋白序列保守，磷酸化及糖基化位点和数目各异。大多数PKS Ⅲ家族基因Isoforms在药用大黄根和根茎中表达量高。药用大黄PKS Ⅲ家族基因与掌叶大黄、虎杖、拟南芥基因汇于一支，亲缘关系近。结论 获得药用大黄全长转录组信息特征，鉴定了8个药用大黄PKS Ⅲ家族基因，明确了序列及表达特征，为药用大黄蒽醌类成分合成的分子机制研究提供参考。