自噬标志物LC3的节律表达破坏参与β1-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞死亡

目的:探讨β₁-肾上腺素受体(β₁-AR)自身抗体(β₁-AA)对大鼠心肌细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)节律表达的影响及其在心肌细胞死亡中的作用。方法:实验材料为Sprague-Dawley(SD)大鼠和H9c2大鼠心肌细胞。将SD大鼠随机分为免疫组(β₁-AR组)和对照(control)组,每组6只;将H9c2细胞随机分为control组、β₁-AA组、慢病毒(LV)-NC组和LV-shPer2组(n=6);合成β₁-AR细胞外第二环抗原肽段,用于主动免疫大鼠,并使用亲和层析法从大鼠血清中提纯β₁-AA;β₁-AA处理H9c2细胞24 h后使用CCK-8法检测细胞活力;用地塞米松同步化细胞后,再给予β₁-AA处理,采用real-time PCR及Western blot法检测LC3的表达情况,采用Western blot法检测生物钟蛋白Per2的表达情况,使用JTK_CYCLE算法分析昼夜节律参数;用LV-shPer2感染H9c2细胞以破坏LC3的节律表达,进而采用CCK-8法检测细胞活力。结果:β₁-AR组大鼠血清中β₁-AA的A值与control组相比显著升高(P<0.05)。β₁-AA组H9c2细胞的活力显著低于control组(P<0.05)。β₁-AA可破坏H9c2细胞LC3和Per2的节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)。通过LV-shPer2干扰Per2基因而破坏H9c2细胞LC3节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)后,细胞活力显著降低(P<0.05)。结论:β₁-AA破坏H9c2大鼠心肌细胞自噬标志物LC3的节律表达,从而促进细胞死亡。