Zn2+增强非洲爪蟾卵母细胞ATP-激活电流

目的研究Zn2 对非洲爪蟾卵母细胞ATP激活电流(IATP)的调制作用。方法用双电极电压钳技术记录不同浓度Zn2 对IATP的影响。结果Zn2 对IATP(尤其是D1部分)的影响有明显的浓度依赖性。3×10-5mol/L(30μmol/L)Zn2 可使IATP幅值增加(117.6±8.21)%,显著高于对照值(P<0.01);并使IATP量-效曲线左上移,但并不改变反应的最大幅值。结论Zn2 对ATP-激活电流调制效应可能是通过改变配体和受体的亲和力而实现的变构调制。     

P物质对大鼠三叉神经节神经元H+-门控电流的调制

目的 探讨P物质(SP)对大鼠三叉神经节(TG)神经元膜H+-门控电流的调制作用及其机制.方法 急性分离TG神经元,通过排管快速换液装置行胞外给药,电极内灌药行胞内透析后,采用全细胞膜片钳技术记录神经元膜H+-门控电流.结果 依照我们在背根神经节(DRG)神经元分类的方式,同样可将TG神经元H+-门控电流也分为四型,即T-型、S-型、B-型、O-型;共加SP和H+能浓度依赖性增强S-型H+-门控电流,SP受体拮抗剂GR82334不能阻断此作用;共加SP和H+能增强B-型H+-门控电流,GR82334和胞内透析GDP-β-S能阻断SP对B-型H+-门控电流的这一增强作用,而预加SP则抑制B-型H+-门控电流,并以短暂成分尤为明显,此抑制效应不能被GR82334阻断.结论 SP对H+-门控电流的调制依ASIC亚基组成不同,其作用机制有所不同:S-型H+-门控电流的ASIC分子膜外结构上可能存在SP的别构位点.     

离体背根神经节细胞膜电学特性的测量及其应用

本文介绍了蟾蜍及新生大鼠离体背根神经节神经细胞膜电位及诱发动作电位的细胞内记录方法以及膜电导,翻转电位等电学特性的测量。应用上述方法测得蟾蜍DRG细胞膜输入电阻为30～40MΩ,新生大鼠的输入膜电阻为45～70MΩ;α_1肾上腺素能受体激活引起DRG细胞膜去极化反应时,膜电导减小.而α_2-肾上腺素能受体激活引起细胞膜电位超极化反应时,膜电导增加。去甲肾上腺素引起DRG细胞膜去极化反应的平均翻转电位值为-88.5mV。这些方法为神经细胞的某些电学特性、神经递质及受体等方面的研究提供了基本的实验手段。     

多巴胺受体两个亚家族对大鼠背根神经节GABAA受体的影响

应用全细菌膜片钳技术在大鼠新鲜分离DRG神经元上观察多巴胺D1、D2受体选择性激动剂SKF38393和R（－）－NPA对GABA受体激活电流的影响。在60个对GABA反应的细胞,预加SKF3839 30s后观察到对GABA－激活电流值的影响：多数为抑制（53／60）,少数为增强（1／60）和无明显作用（6／60）。另外对GABA敏感的50个受检细胞,预加R（－）－NPA 30s后对GABA－激活电流幅值的影响也是多数为抑制（38／50）,少数为增强（1／50）和无明显作用（11／50）。SKF3839及R（－）－NPA对GABA（10^4mol／L)－激活电流的抑制作用为浓度依赖性的,上述抑制可为胞内透析蛋白激酶抑制剂H7所翻转。     

SP调制DRG分离细胞MDA-及GABA-激活电流

越来越多的资料表明；背根神经节(DRG)神经元膜存在有多种受体，而且这些受体彼此可以共存，如DRG细胞膜不仅有兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)受体亚型(NMDA，KA，QA／AMPA)，也有抑制性氨基酸GABAA和GABAB受体，而且还有肽类递质SP受体。这些受体既然可以共存，它们之间是否能相互作用?本文目的是研究SP对NMDA及GABA受体的调制。实验在大鼠新鲜分离的DRG神经元应用全细胞膜片钳技术进行记录，在预加SP后观察其对NMDA及GABA激活电流的影响。     

致痛致炎因子BK和ATP在外周伤害性反应中协同作用的电生理和行为学研究

目的采用电生理记录和行为学观察研究了外周初级传入神经元对单独和联合使用ATP及缓激肽（BK）的反应及其机制。方法在大鼠新鲜分离背根神经节（DRG）神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录ATP激活电流（IATP）以及BK对IATP的调制作用，并结合痛行为实验进行整体行为观察。结果在大鼠新鲜分离的DRG细胞上预加BK后再加ATP，则IATP明显增强，其增强程度依赖于BK的浓度（10^-6～10^-4mol／L）。预加BK后ATP的量-效曲线上移．其电流最大值与对照相比增加20．75％，而BK预加前后ATP量-效曲线的EC50值非常接近（1．65×10^-5 vs 2．0×10^-5mol／L）。在大鼠后肢掌底皮下分别注射BK和ATP均引起浓度依赖性的痛行为（抬腿）反应，当联合应用BK（10^-6mol／L）和ATP（10^-5，10^4and10^-3mol／L）时，后爪抬腿时间随ATP浓度的增大而急剧地增强。结论炎性介质BK、ATP等在外周感觉神经末梢疼痛信息的产生、传递和调制方面起着重要的作用。ATP和BK具有协同作用，这种作用是非竞争性的，BK能明显增强IATP=预加BK后，随着ATP浓度的增高所诱导的痛行为反应急剧增加。     

大鼠急性分离DRG神经元膜SP激活电流

有关背根神经节(DRG)神经元膜存在有P物质(SP)受体的报导极少且数据资料不全(Dray和Pinnock，1982)。最近我室应用细胞内记录确证了此一事实(司军强和李之望，1994)。本文应用全细胞膜片钳技术记录SP激活电流，并分析探讨了其离子机制。实验在大鼠76个新鲜分离的DRG细胞(直径l5～65μm)进行。大部分受捡细胞对外加SP敏感(68／76，89．5％)，只有少数细胞无反应(8／76，11．8％)。SP激活电流为一幅值较小，浓度依赖性(10^-8M～10^-4M)的内向电流。     

蟾蜍背根神经节胞体动作电位离子成份的分析

在蟾蜍离体背根神经节标本上，用标准微电极方法，通过改变胞外离子成份及浓度，结合应用离子通道阻滞剂，分析胞体动作电位各离子成份。结果表明：５μｍｏｌ／Ｌ河豚毒灌流６ｍｉｎ后，动作电位幅值及去极相斜率均明显减小；无Ｃａ（２＋）（０ｍｍｏｌ／Ｌ）和高Ｃａ（２＋）（１０、２０ｍｍｏｌ／Ｌ）液灌流１５ｍｉｎ后，动作电位时程（ＡＰＤ）分别较对照值减小和增大；无Ｋ＋（Ｏｍｍｏｌ／Ｌ）和高Ｋ＋（６ｍｍｏｌ／Ｌ）液灌流１５ｍｉｎ后，ＡＰＤ的改变与上述相同；２ｍｍｏｌ／ＬＭｎ（２＋）和１０ｍｍｏｌ／Ｌ四乙胺亦可分别使ＡＰＤ较对照值减小和增大。实验表明胞外Ｃａ（２＋）的改变与ＡＰＤ值的大小呈线性关系。     

海马及第三脑室内移植颈上神经节组织对老年大鼠学习记忆的改善作用

以回避反应为指标，检测了１９只２４月龄老年Ｗｉｓｔａｒ大鼠的学习记忆能力。于老年大鼠双侧海马或第三脑室移植新生大鼠颈上神经节后２周，观察到学习记忆能力显著改善，海马内移植后以避暗反应检查，进洞潜伏期自１７．５±１５．５ｓ延至３７６．７±２７０．８ｓ（ｐ＜０．０１）。同期非移植或假移植术大鼠的学习记忆能力仍处于较低水平。第三脑室内移植后以跳台法检测，大鼠为回避电击在平台停留５ｍｉｎ所需电击时间为１１．７±６．３ｓ，与移植前对照值６４．７±３２．３ｓ比较ｐ＜０．０１。行为实验后对移植区进行了荧光组织化学及电镜检查，结果表明，应用脑内移植技术改善老年大鼠的记忆损害可能与补充单胺类递质有关。     

大鼠DRG分离细胞膜谷氨酸受体亚型及其分布

近年来陆续有报导：背根神经节(DRG)神经元膜存在有谷氨酸(Glu)受体(周小萍等，1991)及其亚型NMDA(Lovinger ＆ Weight，1988；李之望，1994；司军强和李之望，1994；Satoetal，1994；Liuetal，1994)，KA(Wong et al．1993，1994)及QA／AMPA(Huetmer et al，1990;Wong et al，1993，1994；Sato et al 1994)。本文的目的是研究DRG神经元膜Clu受体亚型的分布及其共存。实验在酶(Trypsin，Collagenase，DNase)和机械分离的大鼠DRG神经元应用全细胞膜片钳技术记录NMDA-，KA-和QA／AMPA-激活电流。