FOSL2蛋白在肺腺癌中调节 TGF-β1信号机制的研究

目的：研究FOSL2蛋白在TGF-β1信号传导通路中的作用及FOSL2在肺腺癌中的作用机制。方法利用质粒转染、免疫沉淀、蛋白印迹等方法验证FOSL2蛋白在TGF-β1信号传导通路中的作用及机制。结果 TGF-β1诱导细胞中FOSL2蛋白的表达水平显著增加,在72 h时表达水平最高,约为对照基线水平的4倍。 FOSL2的表达与p-Smad3的着色呈正相关（ r＝0.85,P＜0.001）。 FOSL2高表达的患者比低表达的患者生存期更短（ P＝0.005）。结论 FOSL2蛋白通过与Smad3蛋白的相互作用促进TGF-β1诱导的迁移,是肺腺癌治疗中的一个潜在靶点。     

NFATc1对人肺腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响

目的 探究NFATc1对肺腺癌NCI-H1299细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响,以及NFATc1发挥作用的生物学机制。方法 通过Realtime PCR检测NFATc1在三种肺腺癌细胞系中的相对表达水平,利用慢病毒载体构建稳定敲减NFATc1的NCI-H1299细胞系。MTT检测NFATc1对细胞增殖能力的影响,平板克隆形成实验检测NFATc1对克隆形成能力的影响,Transwell检测NFATc1对细胞迁移和侵袭能力的影响,流式细胞术检测NFATc1对细胞周期和凋亡的影响,Western blot检测NFATc1对凋亡、EMT相关蛋白和MAPK信号通路蛋白表达的影响。结果 肺腺癌NCI-H1299细胞系中NFATc1表达水平相对较高。沉默NFATc1表达可以显著抑制细胞增殖(P＜0.05)、克隆形成(P＜0.05)、迁移(P＜0.05)和侵袭(P＜0.05)能力,抑制细胞周期在G1期(P＜0.05),促进细胞凋亡(P＜0.05)。Bax、Cleaved caspase-3和E-Cadherin蛋白表达增加(P＜0.05),CDK4、c-Myc、ERK、p-ERK和N-Cadherin蛋白表达降低(P＜0.05)。结论 在人肺腺癌NCI-H1299细胞中抑制NFATc1表达,可以显著抑制细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制MAPK信号通路相关。     

C/EBP同源蛋白在紫檀芪抗人肺鳞癌Calu-1细胞中作用机制的研究

目的:探讨紫檀芪（PT）抗人肺鳞癌Calu-1细胞作用机制及内质网应激（ERS）相关蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）在其中的作用。方法:实验分为对照组、PT组（15、30、45 μmol/L）,分别检测各组Calu-1细胞活力值、凋亡率、ROS含量及Caspase-3活性,以及CHOP蛋白和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax）含量的变化。CHOP小干扰RNA（siRNA）特异性抑制CHOP蛋白表达后,PT（0、30 μmol/L）处理细胞24 h,重复上述检测。结果:PT有效抑制Calu-1细胞增殖,促进凋亡（P<0.05）,显著增加ROS含量及Caspase-3活性（P<0.05）,并呈浓度依赖效应;Western blot检测结果显示PT上调CHOP及Bax的表达（P<0.05）,抑制Bcl-2的表达（P<0.05）;CHOP siRNA转染显著抑制CHOP表达,同时抑制PT对Calu-1细胞的上调CHOP蛋白表达和促凋亡作用（P<0.05）。结论:紫檀芪可有效抑制肺鳞癌Calu-1细胞活力、促进细胞凋亡,此作用可能与激活内质网应激相关蛋白CHOP有关。     

双侧胆管支气管瘘

患者男,31岁,因交通意外,于当地医院行肝不规则切除术和胆囊切除术.术后2个月突发寒战高热并咳"脓性痰",诊断为左侧脓胸,行肺部病灶切除术、纤维板剥脱术、膈肌脓苔清除术.术后仍咳黄绿色黏液痰,诉味苦,每天量约200 ml,平卧时痰量增加以致不能入睡,无发热、偶有呕吐,为胃内容物,对症治疗无明显好转后人我院.体检:左肺呼吸活动度减小,下叶叩诊呈浊音,呼吸音减弱并闻及湿罗音.     

TAM通过PLGF/Flt-1和TGF-β1通路促进非小细胞肺癌生长和肿瘤血管异生的研究

目的 探讨胎盘生长因子(PLGF)介导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞和肿瘤相关巨噬细胞(TAM)之间相互作用的具体机制。方法 采用尾静脉注射法将转染腺病毒(AAV)的NSCLC A549细胞注入10周龄的雄性NOD/SCID小鼠体内,构建小鼠肺癌动物模型。流式细胞技术检测瘤体内各种巨噬细胞(MΦ)亚型,RT-qPCR检测肿瘤细胞和TAM中PLGF、血管内皮生长因子受体(Flt-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。根据A549细胞和MΦ细胞的培养条件不同,分为单纯A549组,单纯MΦ组,A549+MΦ组,A549+MΦ+sFlt-1组(加入10 μg/L sFlt-1),PLGF+MΦ组(加入100 ng PLGF)和PLGF+MΦ+sFlt-1组(加入100 ng PLGF和10 μg/L sFlt-1)。Transwell、MTT法分别检测不同共培养条件下A549细胞的增殖和迁移能力。根据HUVEC细胞的培养条件,分为对照组、条件培养基(CM)组、CM+SB431542组、TGF-β1组和TGF-β1+SB431542组,HUVEC细胞胶原凝胶测定法检测肿瘤血管异生情况。结果 与RFP-细胞相比,PLGF主要由肿瘤细胞表达(31.72±4.69 vs. 2.31±0.06,P＜0.001),而Flt-1主要由CD163+的巨噬细胞表达(P＜0.001)。A549+MΦ组A549细胞增殖能力显著强于单纯A549组和A549+MΦ+sFlt-1组(OD值:3.62±0.23 vs. 4.53±0.34 vs. 3.71±0.37,P＜0.05)。TAM/M2巨噬细胞中TGF-β1的表达量高于M1巨噬细胞(0.99±0.23 vs. 0.07±0.02,P＜0.05)。CM组和TGF-β1组中HUVEC细胞管状结构的形成最多(P＜0.05),TGF-β1抑制剂SB431542可抑制这一现象。结论 TAM和NSCLC细胞间通过PLGF/Flt-1和TGF-β1信号通路间的交互作用,促进NSCLC的生长和血管异生。     

靶肺段萎陷法在单孔胸腔镜联合肺段切除术中的应用

目的:探讨靶肺段萎陷法在单孔胸腔镜联合肺段切除术中的应用。方法:回顾性分析从2020年1月-2022年1月我院15例联合肺段切除的肺癌患者临床资料，术中均采用靶肺段萎陷法显示段间平面，即先游离夹闭保留肺段的动脉；再充分膨胀肺组织；然后等待肺组织自然萎陷至出现膨胀-萎陷界线，标记段间平面；最后松开夹闭的动脉，分离切断靶肺段的动脉、支气管、段内静脉和段间平面。结果:15例患者术后无持续性漏气发生，无术后并发症发生，手术时间、术后平均住院时间和胸腔引流管留置时间相较同期传统的肺段切除患者相比，均无明显差异（P＞0.05）。结论:靶肺段萎陷法是一种简单、安全而有效的段间平面确定方法，尤其适用于联合肺段切除的手术。