Ghrelin对兔激素性股骨头缺血性坏死中VEGF的影响

目的：观察Ghrelin对兔激素性股骨头缺血性坏死（sANFH）中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法选择24周龄以上雄性新西兰兔34只,随机分为正常组（n＝8）和造模组（n＝26）。造模采用马血清联合甲基强的松龙的方法,每组各取4只行股骨头磁共振及病理组织学检查,明确造模是否成功。将造模组造模成功的20只随机分为对照组（n＝10）和Ghrelin干预组（n＝10）,正常组剩余4只纳入空白组。Ghrelin干预组连续2周耳缘静脉注射Ghrelin[25μg/（kg·d）],对照组连续2周耳缘静脉注射相同剂量生理盐水;2周后空气栓塞法处死动物,收集标本,行股骨头组织形态学观察、RT-PCR法检测股骨头组织中VEGF的表达。结果对照组股骨头病理组织学检查可见骨小梁广泛稀疏、大部分断裂,脂肪细胞可见融合现象;Ghrelin干预组可见骨小梁稀疏,偶见断裂;脂肪细胞较多并轻度肥大,在骨髓中所占比例多于正常组,未见融合现象。RT-PCR法检测结果显示,对照组和Ghrelin干预组VEGF表达均高于空白组（P＜0．05）;同时Ghrelin干预组VEGF表达明显高于对照组（P＜0．05）。结论 Ghrelin可促进激素性缺血性股骨头坏死组织中VEGF mRNA的表达,从而改善坏死股骨头组织微循环,进一步改善激素性缺血性股骨头坏死的进程。     

自噬相关基因及蛋白在急性脊髓损伤后大鼠膀胱表达的实验研究

目的 观察自噬相关基因、蛋白在急性期脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌组织中的表达。 方法 选取24只雄性Wistar大鼠并随机分为模型组（12只）及对照组（12只）。模型组采用改良Allen′s法建立脊髓损伤模型,对照组仅予以椎板切除处理。于术后6h对2组大鼠进行BBB运动评分,采用尼氏染色观察2组大鼠脊髓形态学变化,采用Western blotting和免疫荧光染色法检测膀胱平滑肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)及P62表达,采用RT-PCR检测膀胱平滑肌自噬相关基因LC3、P62、Beclin1 mRNA表达。 结果 模型组大鼠下肢运动功能BBB评分较对照组明显降低（P<0.05）。尼氏染色观察可见模型组神经元及尼氏小体数量减少;Western blotting染色提示模型组LC3-Ⅱ表达较对照组增高（P<0.05）,P62表达较对照组降低（P<0.05)。免疫荧光染色法提示模型组膀胱平滑肌LC3阳性细胞率较对照组增高（P<0.05),P62阳性细胞率较对照组降低（P<0.05）。RT-PCR检测发现模型组LC3及Beclin1 mRNA水平较对照组升高(P<0.05）,P62 mRNA水平较对照组降低(P<0.05）。 结论 自噬在急性脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌中表达活跃,可能与脊髓损伤后神经源性膀胱发病机制有关。     

不同时间点介入运动再学习对大脑中动脉闭塞大鼠神经功能恢复的影响

目的探讨不同时间点介入运动再学习对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠神经功能恢复的影响。 方法选取雄性SD大鼠90只,按照随机数字表法将其分为运动再学习组（54只）、对照组（18只）和假手术组（18只）,依据运动再学习的介入时间不同,将运动再学习组细分为造模后3d亚组（18只）、造模后7d亚组（18只）、造模后14d亚组（18只）。采用大脑中动脉闭塞法对所有大鼠进行造模,1.5h后,将运动再学习组和对照组大鼠所用造模线栓拉出1cm,造成再灌注损伤,假手术组不予以特殊处理。造模后3d、7d及14d,分别给予运动再学习各亚组大鼠运动再学习训练。造模后7d、14d及21d,采用神经行为学评分评定大鼠的神经功能恢复情况,采用荧光定量PCR技术检测大鼠可塑性相关基因15（CPG15）、核转录因子B（NF-кB）的表达水平。 结果造模后3d亚组神经功能评分、CPG15含量及NF-кB水平均优于造模后7d亚组和造模后14d亚组（P<0.05）,造模后7d亚组上述指标均优于造模后14d亚组（P<0.05）。与对照组同时间点比较,造模后3d亚组所有时间点的神经功能评分均较低（P<0.05）,造模后7d亚组在造模7d时［（10.477±0.163）分］的评分较低（P&rt;0.05）,造模后14d亚组在造模7d［（10.503±0.245）分］及14d时［（8.673±0.261）分］的神经功能评分亦较低（P&rt;0.05）。造模后3d亚组所有时间点的CPG15水平均高于对照组（P<0.05）,造模后7d亚组在造模7d时的CPG水平较高（P&rt;0.05）,造模后14d亚组所有时间点的CPG15水平亦较高（P&rt;0.05）。造模后3d亚组不同时间点的NF-кB水平均较对照组低（P<0.05）,造模后7d亚组在造模7d时的NF-кB水平较低（P&rt;0.05）,造模后14d亚组所有时间点的NF-кB水平亦较低（P&rt;0.05）。 结论运动再学习能显著改善MCAO大鼠的神经功能,MCAO后3d介入运动再学习训练对大鼠神经功能恢复的疗效最佳。     

高选择性脊神经后根切断对SD大鼠膀胱和阴茎勃起功能的影响

目的：探讨高选择性切断脊神经后根小束对SD大鼠膀胱和阴茎勃起功能的影响。方法：清洁级成年雄性SD大鼠40只,体重300~350 g,其中10只电刺激L6和S1后根,观察膀胱内压（intravesical pressure, IVP）和海绵体内压（intracavernous pressure, ICP）的变化以确定膀胱和海绵体的主要神经传导支;另外30只随机分成A、B两组,每组各15只,A组高选择性切断S1后根传导膀胱逼尿肌的小束,B组高选择性切断S1后根传导阴茎海绵体的小束,观察并记录切断前后IVP和ICP的变化情况。结果：分别电刺激L6和S1后根,IVP变化的差异不显著（P=0.972）,ICP变化的差异显著,电刺激L6后根的ICP升高值为（6.88±2.76）cmH₂O(1 cmH₂O=0.098 kPa),电刺激S1后根的ICP升高值为（13.05±8.41）cmH₂O(P<0.01)。分别电刺激S1左右两侧引起IVP和ICP的变化差异无统计学意义（P值分别为0.623和0.828）。A组S1后根小束切断前后电刺激下IVP的变化差异有统计学意义,切断前的IVP升高值为（14.37±4.89）cmH₂O,切断后的IVP升高值为（3.25±1.29）cmH₂O(P<0.001),而ICP的变化差异无统计学意义（P=0.153）;B组S1后根小束切断前后电刺激下ICP的变化差异有统计学意义,切断前的ICP升高值为（11.97±4.41）cmH₂O,切断后的ICP升高值为（2.68±1.01）cmH₂O(P<0.001),而IVP的变化差异无统计学意义（P=0.162）。结论：通过显微解剖及电刺激可以区别SD大鼠S1后根主要传导膀胱逼尿肌或阴茎海绵体的不同小束,高选择性切断后可以分别改变膀胱内压和海绵体内压,或可为临床治疗脊髓损伤后痉挛性膀胱同时最大限度保留反射性阴茎勃起功能提供实验基础。     

犬脊髓损伤痉挛性膀胱动物模型的建立及尿动力学分析

目的:探讨犬脊髓损伤后痉挛性膀胱模型的建立。方法:12只成熟雄性比格犬,在T10水平硬膜外夹闭脊髓,制作脊髓损伤模型。用尿动力学检测分析造模术前及术后每周的最大膀胱容量、膀胱压力、膀胱顺应性和尿道压力,直到模型成功。结果:12只犬死亡2只,其余10只造模成功,造模成功时尿动力学指标如下:与术前相比最大膀胱容量减少,膀胱顺应性下降,膀胱压力上升,其差异均有显著性意义(P<0.05);尿道压力与术前相比无显著性差异(P>0.05)。造模成功时间为2—5周,其中5只为2周,1只为3周,2只为4周,2只为5周。结论:犬痉挛性膀胱模型符合骶上脊髓损伤后的膀胱表现,适用于痉挛性膀胱的研究。