普通血透机加血泵进行血液透析滤过疗效分析

日前,血液透析滤过是公认的较为理想的一种透析模式。本中心利用普通血透机加血泵进行简易血液透析滤过（simplified hemodiatiltration,SHDF）治疗终末期肾病（endstage renal disease,ESRD）尿毒症7例,     

嘉兴地区类风湿关节炎患病现状及其危险因素分析

目的 探讨嘉兴地区类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患病现状及其危险因素分析,为该病的早期防治提供依据。 方法 2017年1—6月采用分层整群抽样方法,在嘉兴地区抽取10个社区或农村,采用问卷调查收集调查对象的一般人口学资料、工作强度、行为习惯、家族遗传史、关节畸形等信息。对RA可疑病例进行病史采集、体格检查以及实验室检查进行确诊,并采用logistic回归分析RA患病影响因素。 结果 共调查79 351人,发现RA患者770例,患病率为0.97%。其中男性为188例,占男性总人数的0.46%;女性为582例,占女性总人数的1.53%。单因素分析显示不同性别、年龄、居住地域、居住楼层、劳动强度的居民类风湿关节炎患病率差异均有统计学意义(均P<0.05),而是否吸烟、饮酒、住房类型、有无风湿性家族史,其居民类风湿关节炎患病差异均无统计学意义(P>0.05)。进一步多因素logistic回归分析结果表明,女性(OR=2.826, 95%CI:2.252~3.548)、年龄(40~<60岁) (OR=3.068, 95%CI:1.847~5.097)、居住楼层(1层)(OR=1.879, 95%CI:1.026~3.444)和重体力工作(OR=2.252, 95%CI:1.229~4.127)等因素是发生RA的独立危险因素(P<0.05)。 结论 嘉兴地区的RA患病率较高,性别、年龄、居住楼层和体力工作是RA的独立危险因素,各级医疗机构应加强RA的宣教,提高全民意识,积极防治RA。     

雷公藤多苷联合科素亚对老年IgA肾病患者的临床疗效及对TGF-β1、PAI-1及VEGF表达的影响

目的 观察雷公藤多苷联合科素亚治疗老年IgA肾病(IgAN)的临床疗效及其对转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 选取2011年4月至2016年1月武警浙江总队嘉兴医院收治的老年IgA患者80例,随机分为对照组与观察组,各40例.两组患者均常规治疗慢性基础病并口服科素亚,观察组在此基础上口服雷公藤多苷,连续 12个月.比较两组治疗前及治疗3、6、12个月尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血浆清蛋白(Alb)、尿TGF-β1、PAI-1及VEGF水平,记录患者不良反应发生情况.结果 治疗后3、6、12个月,两组24 h尿蛋白水平较治疗前均下降,且各时间点观察组24 h尿蛋白水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组Scr、BUN水平及尿TGF-β1、PAI-1、VEGF水平均较治疗前降低,Alb水平较治疗前升高,且观察组Scr、BUN水平及尿TGF-β1、PAI-1、VEGF水平均低于对照组,Alb水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).观察组出现2例白细胞减少,1例肝功能异常患者,未出现严重不良反应.结论 雷公藤多苷联合科素亚对老年IgA患者具有显著疗效,可明显降低患者尿蛋白,保护肾功能,且临床应用较安全,其可能通过降低TGF-β1、PAI-1及VEGF的表达而发挥作用.     

断裂内含肽在含有抗体铰链区氨基酸序列的非天然外显肽中的剪接

内含肽是一种能够介导蛋白质分子从前体分子中自我切除，同时将其双侧的外显肽蛋白通过肽键连接起来的功能性蛋白质，其中断裂型内含肽在抗体连接领域有着广泛应用。但由于天然断裂型内含肽C端可特异性识别外显肽的前3位氨基酸序列——半胱氨酸、苯丙氨酸和天冬酰胺(CFN)，因此在蛋白剪接反应后不可避免的会引入外源氨基酸。由于本课题组前期开发出的断裂内含肽介导的双特异性抗体药物装配平台也存在该缺陷，因此本研究尝试采用抗体铰链区的半胱氨酸、天冬氨酸和赖氨酸(CDK)取代“CFN”作为内含肽的识别位点，并构建突变型断裂内含肽Npu*_GEP DnaE。结果表明，突变体可以识别“CDK”并成功发生了内含肽剪接反应。进而对影响该内含肽剪接反应平台的各因素如NaCl浓度、DTT浓度、pH和温度等进行了考察，结果表明在所考察的范围内断裂内含肽的剪接反应均可很好的进行。该内含肽剪接反应平台的建立将有助于减少外源氨基酸的引入，进一步拓展了内含肽底物宽泛性，为内含肽应用于抗体药物特别是双特异性抗体药物的装配提供了技术支持。     

胃癌皮肤转移一例

患者,男,67岁。因腹壁肿块6个月于2013年12月15日收住我院。患者3年前曾行胃癌根治术。术后病理示中分化腺癌。术后静脉化疗1次。2013年5月患者自行发现左顶枕部肿块及腹中线小结节。当时该结节黄豆大,暗红色,质硬,无痛,似一增生疤痕。2013年7月患者无明显诱因下出现咳嗽、咯血。     

断裂内含肽C片段在大肠埃希菌表达系统中酶解稳定性的改良

断裂内含肽Npu DnaE介导的蛋白质剪接、剪切反应,可以应用于蛋白质工程领域诸多方面,但其C段重组蛋白在表达纯化过程中发生的降解,降低了重组蛋白的产率和纯度。为提高NpuC段稳定性,本研究构建了N端融合NpuN2片段的NpuC延长变体N2C。将N2C在BL21(DE3)中进行表达、用亲和色谱进行纯化,用ImageJ扫描计算表达纯化中降解情况,进而对影响内含肽C端剪切反应的各因素如温度、DTT浓度、N/C比例等进行了考察。结果表明,延长变体N2C使降解产物占比降低至2.7%～7.2%,在1 mmol/L DTT催化,N/C比例为5∶1,37 ℃反应条件下,30 min产物生成率达90%。N2C在提升Npu DnaE内含肽C段在大肠埃希菌表达系统中表达、纯化过程的稳定性的同时,保留了其C端剪切反应的活性,对其在蛋白纯化领域应用有重要意义。     

C端断裂型内含肽Npu DnaE介导的抗体片段及免疫毒素在大肠埃希菌中的可溶性表达与纯化

为实现免疫毒素在大肠杆菌内的可溶性表达,避免包涵体的形成带来的繁琐操作,本实验选用抗间皮素单克隆抗体SS1,以及其与毒素PE38KDEL连接的产物SS1P为实验对象;采用促溶标签结合低温诱导方式实现重组蛋白在大肠埃希菌(SHuffle T7)胞质内可溶性表达,其中促溶标签连接在NpuCD118G突变体的N端,SS1/SS1P连接在NpuCD118G突变体的C端;采用Dextrin Beads 6FF柱亲和色谱和镍柱亲和色谱方法实现目的蛋白纯化;采用分别表达纯化后混合的方法实现断裂内含肽Npu DnaE的自我断裂;采用镍柱亲和色谱除去未剪切的前体和断裂后促溶标签,其中,SS1进一步用Capto L捕获富集;采用Fortebio检测蛋白亲和力。本实验通过内含肽与促溶标签和纯化标签连用,实现了免疫毒素在大肠埃希菌中的可溶性表达,简化了纯化方式。该方法为开发基于大肠埃希菌表达系统的可溶性表达、纯化免疫毒素类药用重组蛋白方法提供了理论参考。