原花青素上调let-7a抑制胰腺癌AsPC-1细胞生长及迁移

目的探讨原花青素是否通过上调let-7a表达而抑制胰腺癌细胞生长及迁移。方法体外培养人胰腺癌AsPC-1细胞,原花
青素处理细胞后,分别用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell迁移等实验检测细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞迁移能
力的改变;利用miRNA实时逆转录PCR检测细胞内let-7a表达变化。AsPC-1细胞转染let-7a mimics后,MTT法、Transwell迁
移实验分别检测细胞增殖率及细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,原花青素处理AsPC-1细胞后,细胞增殖率、细胞迁
移能力随着原花青素浓度升高而下降,而细胞凋亡率随着药物浓度升高而逐渐升高。与对照组相比,原花青素处理细胞后,
let-7a的表达升高。通过脂质体转染let-7a mimics后,细胞的增殖率及迁移能力均低于对照组,且let-7a mimics 与原花青素共
同作用后,细胞增殖及迁移明显低于let-7a mimics和原花青素单独作用组。结论原花青素具有抑制胰腺癌细胞生长、迁移,及
诱导细胞凋亡的作用。原花青素可能是通过上调let-7a表达,从而抑制胰腺癌细胞的生长及迁移。
     

中国芦荟离体培养和快速繁殖

目的 探讨用植物组织培养技术进行中国芦荟的快速繁殖,为工厂化育苗提供技术依据。方法 以中国芦荟地下茎发生的幼芽为外植体,诱导丛生芽的产生。结果 基本培养基选择MT（Murashige and Tucker)较好;培养基中附加6－苄基氨基嘌呤（6－Benzylaminopurine,BA)能提高成芽率,并能增加外植体出芽的数量;BA浓度为2mg.L^-1时,有利于芽的诱导与生长,出芽率达100％;根的诱导,以MT＋05mg.L^-1萘乙酸（Naphthalene acid,NAA）培养基较好,生根率为100％。结论 通过培养芦荟地下发生的幼芽,既可以迅速建立快速繁殖体系,又能使优良品种的种性得以保持。     

葡萄籽原花青素下调miR-27a 表达抑制胰腺癌细胞生长

目的：探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)抑制胰腺癌细胞生长的作用及其可 能机制。方法：体外培养人胰腺癌AsPC-1细胞,分别采用M ,Annexin V-FITC/PI双染,Transwell 迁移实验等方法检 测GSPE对AsPC-1细胞的增殖抑制、诱导凋亡及抑制细胞迁移的作用;miRNA real-time RT-PCR和Western印迹检测GSPE 对AsPC-1细胞miR-27a及其下游基因FOXO1表达的影响。转染miR-27a抑制剂,检测GSPE通过下调miR-27a调控AsPC-1 细胞生长、迁移的作用。结果：不同浓度(25,50,75,100 g/mL)GSPE对AsPC-1细胞的增殖抑制率分别为8.36%, 17.36%,50.42%和60.73%,GSPE≥50 g/mL时,增殖抑制率均显著高于对照组(P<0.05)。对照组及25,50,75 g/mL GSPE组的细胞早期凋亡率依次分别为2.5%,20.0%,42.3%,64.3%。75 g/mL GSPE组的细胞迁移率低于对照组,细胞 内miR-27a的表达亦显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,miR-27a抑制剂组、GSPE组、miR-27a抑制剂+GSPE组的 细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.01),细胞迁移能力均显著降低(P<0.01),FOXO1蛋白表达增加;且共同处理组上述 作用最明显,高于两者单独处理组。结论：GSPE可能通过下调miR-27a表达来抑制胰腺癌AsPC-1细胞生长和迁移。     

姜黄素对冈田酸损伤的HT⁃22细胞的保护作用

目的：探讨姜黄素（curcumin,Cur）对冈田酸（okadaic acid,OA）损伤的小鼠海马神经元细胞保护作用的机制,为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的治疗提供新的理论基础。方法：小鼠海马神经元HT?22细胞经OA处理,分为对照组、Cur组、OA组、OA+Cur组,MTT检测各组细胞活力;Annexin V?FITC/PI双染色荧光显微镜及流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;DCFH?DA探针荧光显微镜及流式细胞仪测定细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;免疫印迹法检测Cleaved?caspase?3、Bcl?2、总微管相关蛋白Tau（t?Tau）、磷酸化的微管相关蛋白Tau（p?Tau）蛋白的水平。结果：与对照组相比,不同浓度的OA作用HT?22细胞24 h后,细胞活力呈剂量依赖性下降,差异有统计学意义。OA损伤持续一定时间后细胞内ROS水平升高,OA损伤后细胞凋亡增加,抗凋亡蛋白Bcl?2表达量降低、凋亡蛋白Cleaved?caspase?3蛋白表达升高且t?Tau、p?Tau蛋白表达异常增加。姜黄素作用OA损伤的HT?22细胞后,与OA组相比,OA+Cur组细胞活性增加,凋亡率降低,细胞内ROS生成减少,同时Bcl?2表达增加、Cleaved?caspase?3蛋白和t?Tau、p?Tau蛋白表达减少。结论：姜黄素可以保护OA损伤的小鼠海马神经元细胞,为阿尔茨海默病相关神经元细胞的保护提供了新的理论依据。