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细胞膜表面糖识别芯片的制备及其初步应用 总被引:4,自引:0,他引:4
目的制备可以对细胞膜表面糖链进行识别的凝集素芯片并进行初步应用。方法在芯片上制备 22 种凝集素点阵,提取组织和体液细胞进行荧光标记,利用凝集素与细胞膜表面糖链特异亲和性对细胞进行自动捕获,激光扫描仪和光镜检测。结果根据芯片上各个凝集素位点捕获细胞情况和该点凝集素的特异性获得细胞膜表面糖谱,并在光镜下对细胞数量形态进行观察。芯片的重复性和稳定性较好。结论该凝集素芯片可以对细胞进行自动捕获,对细胞膜表面糖链进行总体、即时的观察,对细胞膜糖链特征有一个总体的认识,建立各种细胞膜表面糖谱,为细胞膜表面糖链特征检测提供一个新的分析方法。 相似文献
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目的:研究以小鼠结肠癌细胞CT-26RNA作为抗原体外转染经mIL-12基因修饰的树突状细胞(dendriticcells,DC),观察其诱导特异性抗肿瘤的效应。方法:小鼠骨髓细胞体外以rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取树突状细胞,流式细胞术检测纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染树突状细胞;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用Trans-Messenger体外转染mIL-12基因修饰的树突状细胞,免疫接种小鼠。ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12水平,LDH释放法检测小鼠体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的树突状细胞,流式细胞术检测CD11c 的树突状细胞>90%;提取的CT-26细胞总RNA体外经TransMessenger介导,转染mIL-12基因修饰的树突状细胞后,回输小鼠,可以诱导体内生成较高水平的特异性CTL活性,亲本肿瘤接种后小鼠100%长期存活,而以该RNA转染Ad-LacZ修饰DC后的对照组及RNA转染DC的对照组,诱导机体生成的特异性CTL活性显著低于实验组(P<0.01),亲本肿瘤接种后小鼠60%长期存活,DC、PBS对照组则均未诱导机体生成特异性CTL活性,小鼠无长期存活。结论:树突状细胞经小鼠结肠癌CT26细胞RNA转染和mIL-12基因修饰后免疫接种小鼠,可在体内有效提呈肿瘤抗原,诱导机体产生高水平的CTL,更有效地诱发特异性抗肿瘤效应。 相似文献
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目的:研究Caveolin-1对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体KDR、p42/44MAPK的作用。方法:以腺病毒为载体介导在内皮细胞中表达外源Caveolin-1,应用Western-blotting检测KDR、p42/44MAPK的磷酸化水平。结果:与对照组相比,感染腺病毒表达外源Caveolin-1蛋白的内皮细胞中KDR1054酪氨酸残基和p42/44MAPK磷酸化水平分别降低了42.3%和43.5%。结论:Caveolin-1蛋白抑制KDR信号通路,对内皮细胞增殖可能具有抑制作用。 相似文献
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房凯 《世界核心医学期刊文摘》2018,(56)
目的分析右美托咪定联合舒芬太尼和丙泊酚对喉罩置入的影响。方法将2017年10月至2018年3月我院骨科接受小型手术的患者150例作为研究对象,随机分为对照组和研究组,每组75例。研究组采用丙泊酚联合右美托咪定麻醉,对照组采用丙泊酚联合舒芬太尼麻醉,后两组均行喉罩置入,对比两组患者心率、呼吸频率、喉罩置入条件评分的情况以及呼吸暂停发生率、不良反应发生率。结果研究组喉罩置入评分优于对照组,心率和呼吸频率的变化以及呼吸暂停发生率均小于研究组,两组对比有明显差异,具有统计学意义(P0.05)。研究组不良反应发生率和对照组对比无显著差异,不具统计学意义。结论右美托咪定联合丙泊酚麻醉的喉罩置入效果优于丙泊酚联合舒芬太尼。 相似文献
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目的:制备SARS冠状病毒S蛋白串联表位重组蛋白,为SARS的防治提供新型抗原蛋白。方法:应用抗原表位分析软件分析S蛋白的表位。选取其中16个表位,设计并合成表位串联重组蛋白编码基因Z,构建其原核细胞表达重组体,在大肠杆菌BL21(DE3)表达该重组表位蛋白Z,应用Ni离子亲合层析法纯化重组蛋白Z做抗原,采用皮下注射法免疫新西兰白兔。斑点杂交法测定抗Z-血清中S蛋白的抗体,ELISA法检测Z蛋白的抗原性。结果:构建了S蛋白重组表位蛋白Z的原核表达体,在BL21菌中表达了Z蛋白,Z蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗Z血清。斑点杂交分析显示,抗Z血清识别哺乳动物细胞中表达的S蛋白。ELISA检测结果显示,抗Z血清识别SARS冠状病毒抗原。结论:建立了制备SARS冠状病毒S蛋白重组表位蛋白的方法,为防治SARS提供了新型抗原蛋白Z。 相似文献
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目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型检测基因所需的模板DNA。 相似文献
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目的 探讨雾化吸入联合孟鲁司特钠治疗小儿感染后咳嗽的疗效.方法 选取本院144例感染后咳嗽患儿分成治疗组和对照组.治疗组采用雾化吸入联合孟鲁司特钠的治疗方法,对照组采用孟鲁司特钠的治疗方法,比较两组患儿的临床疗效和不良反应发生率.结果 治疗组患儿的总有效率显著高于对照组,P<0.05,两组患儿之间的不良反应发生率差异无统计学意义.结论 雾化吸入联合孟鲁司特钠治疗小儿感染后咳嗽临床疗效好,安全可靠,值得临床上推广应用. 相似文献
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目的:分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法:应用RT-PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段,克隆于pGEM-T载体上,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果:获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段长度为289bp,该片段与其他种蝮蛇类凝血酶DNA片段有同源性。结论:本实验克隆了长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因片段,根据不同种属蛋白质家族成员的保守性和同源性设计引物可以有效地克隆家族成同的DNA片段。 相似文献