丹参酮ⅡA磺酸钠对骨髓间充质干细胞促增殖作用的研究

目的：研究丹参酮ⅡA磺酸钠（sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate,DS-201）对大鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow stromal cells,BMSCs）体外增殖的影响。方法：对大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养和纯化扩增,取第3代细胞鉴定后进行实验。观察细胞在培养传代过程中的形态学变化;用MTT法筛选24h内对BMSCs生长最适的DS-201浓度,并用此浓度继续干预BMSCs生长;检测对照组和DS-201最适浓度组连续4天的吸光光度值,计算增殖率。结果：1.5×103μmol/LDS-201对BMSCs增殖有明显的抑制作用,在1.5×10-4~1.5×102μmol/L浓度范围内DS-201对BMSCs有促进增殖作用。其中1.5×10-2μmol/L组促增殖作用最大,并且在作用24h后的增殖率最高。但随着时间的延长此浓度的增殖率逐渐下降。结论：适宜浓度以及一定的作用时间内,DS-201对BMSC具有促增殖作用。     

川芎嗪对大鼠骨髓间充质干细胞SDF-1表达的影响

目的:研究川芎嗪对大鼠骨髓间充质干细胞(MMSCs)表达趋化因子SDF-1的影响。方法:收集SD大鼠的股骨、胫骨骨髓内的细胞进行体外培养,取第3代细胞用于实验。用含不同浓度的川芎嗪低糖培养液培养MMSCs,用RT-PCR法检测培养1d、3d、5d、7d MMSCs的SDF-1mRNA的表达。结果:培养1d后,未诱导的MMSCs和5-氮胞苷诱导后SDF-1mRNA均未出现明显表达,但随着培养时间的延长,SDF-1的表达逐渐增强。0.08mmol/L和1.28mmol/L浓度的川芎嗪在干预1d后,MMSCs上的SDF-1已出现表达,干预3d后不同浓度的川芎嗪可明显加快SDF-1的表达,干预第5d和第7天后,0.08mmol/L川芎嗪组促SDF-1的表达作用要高于其他诱导组。结论:川芎嗪可促进大鼠骨髓间充质干细胞SDF-1mRNA表达,有助于促进MMSCs向心梗局部的归巢。     

不同浓度川芎嗪对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的观察不同浓度川芎嗪对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法取SD大鼠,无菌条件下收集股骨、胫骨骨髓内的细胞进行体外培养,选第3代细胞用于实验。川芎嗪培养液选用9个不同的浓度进行干预实验。骨髓间充质干细胞分别在不同浓度的川芎嗪培养液中培养24h后,倒置显微镜下观察细胞形态,采用MTT比色法检测骨髓间充质干细胞增殖的情况。结果在低浓度范围内,川芎嗪对细胞的增殖作用具有浓度依赖性,浓度越高越明显,但到达一定浓度后,随着川芎嗪浓度进一步增加,对细胞的增殖反而有抑制作用。0.08mmol/L的川芎嗪对骨髓间充质干细胞的增殖作用最强。结论川芎嗪对体外培养的骨髓间充质干细胞的增殖作用与剂量有关。