Ⅰ类整合子在多重耐药铜绿假单胞菌中的分布与结构分析

目的 了解分离于镇江地区的铜绿假单胞菌对13种常用抗生素的耐药率;明确Ⅰ类整合子基因盒结构及其在耐药基因播散中的作用.方法 采用K-B纸片法检测71株铜绿假单胞菌的耐药率;煮沸法提取71株铜绿假单胞菌基因组DNA;PCR扩增Ⅰ类整合子基因,并通过测序分析其所携带耐药基因盒.结果 71株铜绿假单胞菌对临床常用的13种抗生素的耐药率在18.3%～77.5%不等;Ⅰ类整合子检出率为38%,包括aadB、aac(6')-Ⅱ、PSE-Ⅰ、dfrA17和aadA5 5种基因盒,其中最常见者为dfrA17和aadA5.Ⅰ类整合子阳性菌株对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、左氧氟沙星、环丙沙星等10种抗生素的耐药率明显高于整合子阴性菌株.结论 不同铜绿假单胞菌临床株对13种常用抗生素的耐药率各不相同,整合子阳性菌株耐药率明显高于整合子阴性菌株,提示Ⅰ类整合子是铜绿假单胞菌多重耐药的重要因素.     

伤寒沙门菌OmpR缺陷变异株制备与分泌蛋白初析

目的观察伤寒沙门菌调节蛋白OmpR的调节作用，制备伤寒沙门菌OmpR缺陷变异株，并比较分析野生株和OmpR缺陷变异株在不同渗透压环境培养下的分泌蛋白。方法用自杀质粒pGMB151介导同源性重组方法制备伤寒沙门菌OmpR缺陷变异株，用PCR方法观察重组现象，变异株经测序和外膜蛋白的SDS—PAG电泳鉴定，用SDS—PAG电泳结合Western blot比较分析野生株和OmpR缺陷变异株在高、低渗透压环境培养下的SipC等分泌蛋白。结果成功制备伤寒沙门菌OmpR缺陷变异株，并发现变异株中，包括SipC、鞭毛素蛋白在内的多种蛋白的表达分泌有明显差异。结论伤寒沙门菌OmpR在不同的渗透压下分别影响SipC、鞭毛素蛋白等多种蛋白的表达分泌。     

针灸联合中西医治疗乳腺增生临床观察及护理

目的分析乳腺增生中西医治疗的临床效果以及临床护理措施。方法将该院在2016年10月—2018年10月期间诊治的150例乳腺增生患者纳入研究对象,按照随机原则将患者分成对照组和观察组,每组75例,对照组采用西药三苯氧胺进行治疗,观察组在对照组治疗的基础上增加中药制剂乳癖舒胶囊治疗,同时采用针灸方法治疗,对两组患者均采用综合性护理干预措施,对比两组治疗的临床效果。结果观察组治疗的有效率为96.0%,明显高于对照组的80.0%,差异有统计学意义(P0.05);经过不同治疗,两组患者的乳房肿块均明显缩小,乳房疼痛评分明显降低,且观察组改善更加明显,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论对乳腺增生患者采用中西医结合疗法治疗,并配合综合性护理措施,可以显著提高治疗效果,值得临床推广。     

HIV-1病毒载量测定技术的新进展

HIV-1病毒载量是指机体内游离病毒的含量.它是一个计数单位,表示每毫升血浆中含多少拷贝数的HIV-1RNA,是反映HIV-1患者疾病进展的关键指标之一[1].通过对HIV-1病毒载量的测定,不仅可以帮助判断HIV-1感染者的状况,还可以用于判断抗病毒治疗的效果,当患者出现耐药性时,也能很快地给出结果从而指导治疗的优化[2].相对于CD4的测定,病毒载量的测定能够提供较早的参考信息.     

与植物多糖硫酸酯结合的HIV-1ⅢB灭活病毒免疫小鼠的研究

目的:为了探讨植物多糖硫酸酯(M33A)与gp120结合后,能否诱导H IV-1ⅢB的gp120暴露出中和抗体的表位,用它作为灭活疫苗以便诱导产生中和抗体。方法:用M33A结合的灭活H IV-1ⅢB作为免疫原,与佐剂混和后,免疫BALB/c小鼠,制备出免疫血浆。用ELISA检测血浆内抗H IV-1特异性IgG抗体的滴度,用改良的活细胞染色法中和试验检测免疫血浆的抗H IV-1ⅢB的中和活性。结果:从与M33A结合的H IV-1ⅢB免疫组的动物获得的免疫血浆内抗H IV-1抗体的滴度(C组:1.5×106;D组:1.5×106)比未结合M33A的H IV-1ⅢB免疫组(4.9×105)高,雌性小鼠的免疫血浆的特异性抗体滴度比雄性的高3倍。所有免疫组获得的免疫血浆均没有抗H IV-1中和活性。结论:M33A与gp120相互作用不能诱导暴露出gp120的中和抗体表位,但M33A可以增强机体免疫原的抗体反应强度,提示它可以作为免疫增强剂用于疫苗研究。     

SARS-CoV由果子狸向人类跨种传播中S蛋白的适应性进化研究

目的：研究SARS-CoV表面S蛋白由动物向人类跨种传播过程中的适应性进化过程。方法：用系统进化树构建和群体遗传学方法，对100个S基因序列进行了分析。这些序列均从GenBank获得，并能反映整个SARS流行期。结果：依据系统进化树和流行病学资料，将SARS病毒分为三个流行群：02-04跨种传播群、03-早中期流行群和03-晚期流行群。它们分别代表SARS-CoV克服种间障碍实现跨种传播阶段、进入人类后的最初适应阶段以及在人类中建立感染后的阶段。在前两个流行群中，S蛋白受到了阳性选择压力，而在03晚期流行群中却遭受了很强的负选择压力。三个流行群选择压力的比较显示，SARS-CoVS从动物向人类跨种传播过程中，S蛋白受到的阳性选择压力依次减小。结论：从最初的阳性选择到最后的负选择，S蛋白经历了变化的自然选择压力。这种变化的选择压力不仅反映了SARS-CoV由动物向人类跨种传播的适应性进化过程，也为研究其他病毒的跨种传播机制提供重要线索。     

FORS-D分析软件"Random_fold_scan"和不同碱基随机打乱算法对FORS-D分析的影响

目的:开发FORS-D分析软件,并比较不同碱基随机打乱算法对FORS-D分析的影响.方法:根据单、双、三碱基及密码子随机打乱算法,用ActivePerl-5.8.8.820编写"Random_fold_scan"软件,它通过系统命令调用RNA-structure4.2来计算FORS-D值.用4种碱基随机打乱算法分别计算来自不同物种的12个mRNA序列,并且比较它们对FORS-D值的影响.结果:4种随机打乱策略不影响核酸序列的FORS-D分布趋势,但是单碱基打乱算法可以获得比其他3种算法更低的FORS-D值.比较4种打乱算法获得的FORS-D值的Z-score分布,发现单碱基打乱产生的FORS-D值显著小于0的比例最高,相反,FORS-D值显著大于0的比例最低.结论:单碱基随机打乱算法能够彻底破坏原始核酸的序列信息,在概念和理论上能够真正反映FORS-D的生物学涵义.这表明FORS-D分析中单碱基打乱足以给出准确、可靠的数据信息.此外,我们开发了软件"Random_fold_scan"用于FORS-D分析.     

乳腺癌患者术后睡眠障碍的影响因素及护理对策

目的:探究影响乳腺癌患者术后睡眠障碍的因素和临床护理措施。方法:选取2016年8月至2018年4月郑州大学附属洛阳中心医院收治的乳腺癌手术患者50例纳入研究。调查所有患者睡眠质量影响因素,并实施针对性的护理措施。结果:50例患者中有32例存在程度不同的睡眠障碍;采取针对性护理后,患者睡眠障碍情况得到明显好转,与护理前比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:乳腺癌患者术后出现睡眠障碍的原因较多,将针对性护理运用在此类患者中有利于改善睡眠质量,保障术后恢复效果。     

新一代焦磷酸测序平台在HIV／AIDS研究中的应用

Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（ human immunodefi-ciency virus type 1, HIV-1）是引起全世界范围艾滋病（ AIDS）流行的最主要病原体。 HIV-1属逆转录病毒科,其基因组由两条相同的正链RNA构成。要完成自身的复制（增殖）,必须经历由基因组RNA逆转录形成cDNA （ complementary DNA ）的过程,故每复制一代都会向基因组中引入一定频率的新的变异,从而导致了HIV-1在传播与进化过程中产生了众多亚型（ subtype ）及复杂的重组型（ circulating re-combinant form ,CRF）,而它们之间又可发生共感染（ coinfection ）与超感染（ superinfection ）。再加之抗逆转录治疗过程中产生的各种抗药性突变准种,最终为AIDS的诊断、治疗及疫苗的研发带来了极大的障碍。因此准确分析各HIV-1亚型、重组型及抗药性准种的基因组序列,对于深入了解HIV-1的传播、进化特点和AIDS的有效诊断、防控甚至攻克,具有极其重要的意义。但与此同时,也对基因测序技术的通量、速度、准确度等提出了更高的要求。     

HIV-1感染对T和B细胞核内UNG2 mRNA表达的影响

目的:探讨HIV-1感染是否影响细胞中UNG2的表达.方法:采用四步法SYBR green Ⅰ实时定量RT-PCR,对HIV-1感染者的T和B淋巴细胞,以及HIV-1感染的C8166细胞核内UNG2 mRNA的表达进行测定.结果:UNG2 mRNA的表达在HIV-1感染者的T细胞和HIV-1感染的C8166细胞中被明显上调,分别是对照的8.76倍和8.14倍,而在HIV-1感染者的B细胞中却没有被上调.结论:HIV-1感染导致的UNG2表达上调,可能通过减少TCR的多样性削弱Th的功能,另一方面可能有利于病毒对UNG2的包装.