Atg2基因敲除对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨自噬相关基因2(Autophagy-related gene 2,Atg2)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响。方法 蛋白质免疫印迹法鉴定两组细胞，即腺病毒介导CRISPR/Cas9系统靶向剪切AAVS1位点的基因未敲除组(AAVS1细胞)和Atg2ab基因双敲除组(Atg2ab DKO细胞);细胞划痕实验和Transwell小室法检测两组细胞的迁移能力；CCK-8法和细胞平板克隆形成实验检测两组细胞的增殖能力。结果 Atg2ab DKO细胞在24、48及72 h的光密度值(OD值)均较对照AAVS1细胞有所降低，但在72 h时，两种细胞的OD值差异有统计学意义(P<0.01)。Atg2ab DKO细胞形成的克隆数量少于对照组AAVS1细胞(6.33±2.31 vs15.00±1.00),差异有统计学意义(P<0.01)。Atg2ab DKO细胞创面愈合率(0.22±0.05)%显著低于对照组AAVS1细胞(0.82±0.05)%,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组AAVS1细胞相比，Atg2ab DKO细胞穿过Transwell小室的细胞数量显...     

双氢睾酮对小鼠毛囊外根鞘体外培养再生的影响

目的 筛选小鼠触须毛囊外根鞘(ORS)在体外培养再生的最适双氢睾酮(DHT)浓度,通过检测Dermo-1、CD11b探索其对毛囊外根鞘再生的影响。方法 利用冰冻切片技术HE染色观察毛囊外根鞘在不同DHT浓度培养条件下的再生程度,利用免疫荧光技术鉴定Dermo-1、CD11b在最适DHT浓度条件下在毛囊外根鞘中的表达情况。结果 浓度为10^-5mol/L、10^-6mol/L的DHT对毛囊外根鞘体外再生起抑制作用,但10^-9mol/L的DHT促进其体外再生。并且Dermo-1、CD11b在毛囊外根鞘再生过程中均有表达。结论 毛囊外根鞘在体外培养第5天时再生的结构最完整,10^-9mol/L的DHT与体内浓度最为接近,毛囊干细胞对创伤修复和组织结构再生都发挥着重要作用。