99mTc标记c-erbB2反义寡脱氧核苷酸对乳腺癌显像的实验研究

用放射性核素标记癌基因反义寡脱氧核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）对肿瘤进行显像，可以探测只有癌基因激活、扩增和过度表达还没有形成实体的肿瘤组织，以实现对肿瘤的早期诊断。乳腺癌是妇女发病率和死亡率最高的主要恶性肿瘤，如果能在肿瘤早期鉴别其癌基因的表达类型及临床分期，施行“量体裁衣”式的治疗，可提高乳腺癌治疗的效果。c-erbB2是乳腺癌原癌基因，与乳腺癌的恶性转化和不良预后密切相关。     

环氧化酶抑制剂对人乳腺癌细胞株MCF-7的抑制作用研究

目的:研究环氧化酶抑制剂阿司匹林和选择性环氧化酶2抑制剂尼美舒利对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长抑制作用,并初步探讨其作用机理.方法:用阿司匹林和尼美舒利分别作用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法观察其生长抑制作用;免疫组化法检测阿司匹林和尼美舒利作用后MDA-MB-231细胞中COX-2和c-erbB-2的表达情况.结果:阿司匹林和尼美舒利能够抑制MDA-MB-231细胞的生长,并呈时间-剂量依赖型.COX-2在MDA-MB-231细胞中表达呈阳性,免疫组化发现细胞内c-erbB-2表达下降.结论:环氧化酶抑制剂能够有效的抑制肿瘤细胞的生长,其机制可能与下调c-erbB-2基因的表达有关.     

妊娠期尿潴留1例

1 临床资料 患者,29岁,G1P0.因停经3个月余,尿频、尿急伴下腹胀痛1个月余,于2008年2月19日来本院就诊.患者自诉月经规则.末次月经2007年11月8日,预产期2008年8月15日.停经35d测尿HCG阳性.     

RNA干扰bcl-2基因对人骨肉瘤细胞株MG63增殖影响的实验研究

目的 探讨RNA干扰bcl-2基因对人骨肉瘤细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法 选用人骨肉瘤细胞进行体外培养,以siRNA分别处理MG63细胞24～72h后,MTT法检测细胞增殖,SABC免疫组织化学法检测细胞内bcl-2、bcl-xl、bax、caspase-3和C-myc蛋白表达水平.结果 RNA干扰bcl-2基因对MG63细胞增殖有抑制作用.下调bcl-2的表达的同时,上调了caspase-3蛋白表达水平,并使C-myc蛋白表达水平下调.对bcl-xl、bax的蛋白表达无明显影响.结论 RNA干扰显著降低bcl-2蛋白的表达,对人骨肉瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.     

RNA干扰mdr1对尤文氏肉瘤细胞放射敏感性的影响

目的探讨利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术抑制多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,mdr1基因)对尤文氏肉瘤细胞放射敏感性的影响。方法设立空白组、脂质体组(仅加入等量脂质体)、mdr1RNA干扰组作对照,用RT-PCR检测尤文氏肉瘤细胞转染shRNA前后mdr1的表达水平变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人尤文氏肉瘤细胞株的集落形成率。AO/EB荧光检测法检测细胞凋亡率的变化。流式细胞仪测定P-gp的表达。结果mdr1基因的shRNA能够有效抑制mdr1基因的表达。经过RNAi的放射治疗组,其集落形成率较对照组明显下降,MGMT的表达也下调,差异有统计学统计学意义(P<0.05)。结论 RNAi技术抑制mdr1的表达,降低了尤文氏肉瘤细胞的放射抗性,其辐射增敏作用可能与抑制mdr1基因表达后P-gp的表达下调有关。     

FISH技术检测桂林地区妇女宫颈脱落细胞hTERC基因扩增及其临床意义

目的探讨妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况和临床意义。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)检测20例健康人及100例妇科疾病患者宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况,确定hTERC基因扩增阳性阈值,研究临床病理诊断与hTERC基因扩增的关系。结果 FISH检测hTERC基因扩增阳性阈值为3.4%,CIN1患者FISH检测阳性率为8.8%(3/34例),CIN2患者为35.7%(5/14例),CIN3患者为77.8%(7/9例)以及宫颈癌患者为83.7%(36/43例)。健康对照组及CIN1者hTERC扩增发生机率显著低于CIN2及以上者(P<0.01)。结论 FISH可以成功地应用于妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况的研究;hTERC基因扩增与临床病理诊断密切相关。     

免气腹腹腔镜术在妇科手术中的应用

目的：探讨无气腹腹腔镜手术在妇科领域中的应用价值。方法：采用无气腹腔镜行妇科手术组和气腹腹腔镜组进行对照分析,比较两组的手术时间、术中出血量、术后的并发症等。结果：两组手术差异无统计学意义（P〉0．05）。术后并发症发生率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：无气腹腔镜手术创伤小,术后恢复快,增加了腔镜手术的安全性,是理想的微创手术方法。     

~(99m)Tc-ASODN-EGF的小鼠体内分布和兔药动学

目的:研究c-erbB2反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针99mTc-ASODN-EGF的体内分布和药动学特性。方法:小鼠尾静脉注射99mTc-ASODN-EGF 370 kBq(10μC i).150μL-1,于0.5,1,2,4,8,24 h取血、肝、脾、肾等组织器官,测定每分钟放射性计数(cpm),并准确称重,计算每克组织百分注射剂量率(%ID.g-1)。兔经左侧耳缘静脉注射99mTc-ASODN-EGF 1110 kBq(30μC i).2 mL-1,于1,3,5,10,15,20,25,30,40,60,120,240,360 m in从右侧耳缘静脉采血约0.2 mL,测定cpm,准确称重,计算每克血液每分钟放射性计数,用3P97软件计算药动学参数。结果:99mTc-ASODN-EGF在小鼠肝、肾、脾和肺的放射性分布较高,1 h的%ID.g-1分别为22±8,7.4±2.0,46±28和13±7。在心、脑、骨和肌肉的放射性分布很低。兔药动学参数符合二室模型,t12α为(0.32±0.07)h,t12β为(9±3)h,Vc为(1.2±0.8)cpm.kg-1,Cl为(0.061±0.023)cpm.h-1。结论:99mTc-ASODN-EGF的组织器官分布和药动学特性能满足临床显像的要求,可用于肿瘤靶基因的显像。     

靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的构建和序列分析

[目的]利用RNA干扰技术,以Bcl-2为靶基因,设计构建重组体,并进行序列分析,探索肿瘤基因治疗的新途径。[方法]设计有小发夹结构的两条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体Pgenesil-1上构建重组体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。[结果]将合成的DNA片段退火后克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的序列,靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒构建成功。[结论]靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的成功构建,为下一步利用该重组体干扰肿瘤细胞中Bcl-2的mRNA转录,探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。