IL-7/IL-7R在非小细胞肺癌中的表达及与淋巴转移和预后的关系

背景与目的 已有的研究表明淋巴转移与肺癌的预后密切相关,白介素-7(interhuidn-7,IL-7)和IL-7受体(interleukin-7 receptor,IL-7R)可以通过血管内皮生长因子-D(vasculaf endothelial growth factor-D,VEGF.D)促进淋巴转移.本研究旨在探讨IL-7和IL-7R在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,分析它们与各临床病理因素、VEGF-D及预后之间的关系.方法 免疫组化方法检测95例原发性NSCLC组织标本中IL-7和IL-7R的表达情况,分析它们与各临床病理因素、VEGF-D及预后之间的关系.结果 95例原发性NSCLC组织中IL-7、IL-7R和VEGF-D高表达者分别占63.1696、61.05%和58.95%,IL-7和IL-7R的表达与临床分期和淋巴结转移均密切相关,而与患者的年龄、性别、组织分型、分化程度无明显关系;IL-7和IL-7R与VEGF-D高表达组的淋巴管密度(1ymphaticvessel density,LVD)明显高于低表达或无表达组的LVD,差异具有统计学意义(P=0.003,P=0.019和P<0.001);生存分析显示IL-7和IL-7R与VEGF-D高表达组的预后较差.结论 在NSCLC中IL-7/IL-7R高表达与分期、淋巴结转移、VEGF-D、LVD和预后不良呈正相关.     

缺氧对肺癌细胞CCR7表达及其侵袭力的影响

背景与目的缺氧可通过多种机制促进肿瘤的侵袭和转移,但缺氧与CCR7的关系目前未见报道。本研究探讨缺氧对人肺癌细胞趋化因子受体CCR7(Chemokine receptor7)表达及其侵袭能力的影响。方法将A549细胞分为常氧组和缺氧组,分别置于常氧(37℃,5%CO2,21%O2)和低氧(37℃,5%CO2,1%O2)条件下培养4h、12h、24h,应用RT-PCR和Westernblotting方法对CCR7mRNA和蛋白表达水平进行检测;同时采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果RT-PCR和Western blotting结果显示:人肺腺癌A549细胞有CCR7表达,随着培养时间的延长,常氧及缺氧状态下A549细胞CCR7相对表达量依次升高,此外,不同时间点的常氧组与缺氧组CCR7mRNA和蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.01);Transwell侵袭实验结果表明,缺氧组侵袭细胞数与常氧组相比明显增加,差异有统计学意义(t=0.006,P<0.01),加入CCR7抗体后细胞侵袭力降低(t=0.09,P<0.01)。结论缺氧可显著上调A549细胞CCR7表达及其侵袭能力,其侵袭力的增加可能与CCR7表达水平增高有密切关系。     

HIF-1α和HIF-2α上调非小细胞肺癌中CCR7的表达

背景与目的CCR7与非小细胞肺癌的淋巴结转移密切相关,但CCR7的上调机制却不是很清楚。本研究通过观察趋化因子受体CCR7和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在非小细胞肺癌组织中的表达及相互关系,探讨非小细胞肺癌CCR7上调机制。方法应用免疫组织化学染色(SP法)检测94例非小细胞肺癌组织中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达,并联合运用RNAi技术沉默人肺腺癌A549细胞中HIF-1α、HIF-2α表达,采用RT-PCR和免疫荧光方法观察CCR7的变化情况,分析CCR7表达与HIF-1α、HIF-2α之间的关系。结果免疫组织化学结果显示:CCR7主要表达于癌细胞质和(或)胞膜,HIF-1α、HIF-2α主要表达于癌细胞核和(或)细胞质,非小细胞肺癌中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达率分别为75.53%(71/94)、54.25%(51/94)和70.21%(66/94),χ2检验显示CCR7表达与非小细胞肺癌的临床病理分期(P<0.001)和淋巴结转移(P=0.001)有密切关系,而与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05)。此外,CCR7和HIF-1α、HIF-2α表达正相关(r=0.272,P<0.01)(r=0.225,P<0.05)。向A549细胞中转染HIF-1α、HIF-2α特异性siRNA,分别抑制HIF-1α、HIF-2α表达后发现CCR7的mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05)。结论CCR7表达与非小细胞肺癌侵袭转移密切相关,CCR7在NSCLC中过表达受HIF-1α和HIF-2α调控。     

p53负向调控肺癌A549细胞Wnt通路活性并抑制其增殖和侵袭

目的:探讨野生型p53对Wnt通路的调节以及对肺癌细胞生物学行为的影响。方法:分别利用野生型p53质粒及siRNA,分别转染和干扰A549细胞中的野生型p53,而后用Western blot检测A549细胞中β-catenin和cyclin D1的表达,用荧光素酶报告基因法检测Wnt通路活性,用MTT和Transwell实验检测A549细胞的增殖和侵袭能力。结果:转染野生型p53后能够明显下调A549细胞中β-catenin和cyclin D1表达(P<0.01),抑制肺癌细胞的增殖和侵袭(P<0.05),而干扰p53可以明显地上调β-catenin和cyclin D1表达(P<0.01),增强肺癌细胞的增殖力和侵袭力(P<0.05)。结论:野生型p53负向调控A549细胞中的Wnt信号转导通路,抑制其增殖和侵袭能力。     

18例垂体细胞瘤的临床病理特点分析

目的 提高对垂体细胞瘤的病理形态学、免疫表型、分子病理、临床治疗的认识.方法 回顾性分析位于鞍内或鞍上的18例垂体细胞瘤患者临床病理资料并复习相关文献,其中男女各9例,年龄11～69岁,中位年龄44岁.免疫组化观察CK、EMA、Vim、S-100、GFAP、TTF-1、CD56、Syn、CgA、Ki-67表达情况.结果 肿瘤细胞呈双极性梭形或纺锤状,弥漫性纤维束状、漩涡状或席纹状排列,肿瘤细胞界限不清,小核仁或未见核仁,未见核分裂.肿瘤细胞核弥漫性强阳性表达TTF-1、Vim、S-100,灶状胞浆表达EMA,弱表达GFAP,阴性表达CK、CD56、Syn、CgA;Ki-67增殖指数1％～5％.结论 垂体细胞瘤是鞍区低级别胶质细胞瘤,发病年龄广泛,病理组织形态学包括梭形和上皮样两种亚型,双极性梭形为主,瘤细胞核弥漫性强表达基底前脑相关肿瘤标记TTF-1,首选手术治疗,不完全切除有复发可能.     

hsa-miR-125a-5p促进非小细胞肺癌细胞侵袭

背景与目的 microRNAs(miRNAs)是小的非编码RNA,它们通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达.尽管一些失常的miRNA调节机制在人许多恶性肿瘤中被发现,但是,has-miR-125a-5p在肺癌细胞中的表达及功能还尚不清楚.本研究探讨了has-miR-125a-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达及其与肺癌细胞侵袭的关系.方法 应用real-time PCR的方法检测了has-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中的表达情况,并在EAS49细胞中分别转染正义的has-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸24 h、36 h、48 h、60 h和72 h后检测has-miR-125a-5p的表达情况.同时应用transwell小室观察上调has-miR-125a-5p后,A549细胞侵袭能力的变化.结果 has-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中低表达,以LH7、NCI-H460、SPC-A-1和A549细胞最为明显.在A549细胞中,转染正义的has-miR-125a-5p 2'O-甲基寡核苷酸36h后,has-miR-125a-5p表达最高,并进一步发现.上调has-miR-125a-5p后A549和NCI,H460细胞侵袭能力增强.结论 has-miR-125a-5p在肺癌细胞中低表达,但上调has-mig-125a-5p能够促进A549和NCI-H460细胞侵袭.     

有氧运动对二甲基苯蒽诱导大鼠乳腺癌发生及其机制探讨

目的：研究中等强度有氧运动对二甲基苯蒽（7,12-dimethyl-benz{a}anthracene,DMBA）诱导大鼠乳腺癌发生的影响。方法：120只7周龄无特定病原体级（SPF）雌性Sprague—Dawley（sD）大鼠按2×2析因设计随机数字表法分为空白对照组（CON）、运动对照组（ECON）、药物诱导组（DD和运动＋药物诱导组（EDI）,每组30只。ECON组和EDI组进行有氧运动训练,每周5d,25mL／min,30min／d。药物诱导组和运动＋药物诱导组给予1mL的10mg／mLDMBA麻油溶液灌胃2次。每2周观察1次大鼠的体质量、乳腺肿瘤体积和荷瘤数。18周后处死所有大鼠,对所有乳房肿瘤进行病理诊断,并测定脂肪湿重、脂肪指数、Lee’S指数、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）和血清雌二醇（E2）水平。结果：实验终末CON组、ECON组、DI组和EDI组的体质量分别为（352．67±32．93）、（322．30±29．18）、（296．50±28．60）和（289．30±27．05）g。析因分析显示,有氧运动（F=12．149,P=0．001）和DMBA（F=68．442,P〈0．001）都显著影响大鼠的体质量增长,两者有交互作用,F=4．620,P=0．034。DI组和EDI组的潜伏期分别为（13．86士2．88）和（15．65土2．23）d,差异有统计学意义,t=～2．456,P=0．018;荷瘤数分别为（3．24±1．12）和（2．30土1．02）个,差异有统计学意义,t=3．111,P=0．003;肿瘤体积为（2107．07±526．76）和（1793．78±541．08）差异有统计学意义,t=2．105,P=0．040。有氧运动和DMBA可以显著影响大鼠的脂肪湿重、脂肪指数和Lee’S指数,P〈0．01,且两者之间无明显交互作用,P〉0．05。有氧运动可以显著影响大鼠血清TG、TC、HDL—c和LDc和雌激素水平,P〈O．01,且与DMBA无明显交互作用,P〉0．05。结论：有氧运动可以抑制二甲基苯蒽诱导的大鼠乳腺癌的发生,其机制可能与有氧运动通过影响大鼠体脂水平而降低体内E2水平有关。     

转移相关蛋白1与非小细胞肺癌转移及预后关系研究

背景与目的转移是导致临床肺癌患者死亡的主要原因,因此对肺癌转移研究一直是医学科研关注的热点。转移相关蛋白1(metastasis-associated protein1,MTA1)是转移相关蛋白家族成员之一,其表达增高与乳腺癌及食管癌的侵袭转移能力呈正相关。但其表达的普遍性及对判定肿瘤生物学特性和评估预后的意义仍有待于进一步研究。本研究旨在探讨MTA1在非小细胞肺癌组织中表达及与患者临床病理特征之间的关系,明确其对判断肺癌患者转移潜能和预后的意义。方法采用免疫组织化学染色(SP法)检测101例具有完整随访资料的非小细胞肺癌石蜡包埋组织标本中MTA1的表达,并联合应用Western blot方法对35例新鲜非小细胞肺癌组织及相应癌旁正常组织中MTA1的表达进行研究。结果免疫组织化学结果显示:MTA1主要表达在癌细胞核中,阳性表达率为55.4%(56/101);癌旁正常支气管上皮或肺泡上皮阴性表达。Western blot结果证实:MTA1在35例肺癌组织中的表达较相应癌旁正常肺组织明显增高(t=3.953,P=0.000),有淋巴结转移的MTA1表达较无淋巴结转移的增高(t=4.057,P=0.000)。χ2检验显示MTA1表达与细胞分化程度(χ2=10.131,P=0.006)、淋巴结转移(χ2=8.535,P=0.003)和临床分期(χ2=17.419,P=0.000)有密切关系。生存曲线分析表明MTA1阴性表达的非小细胞肺癌患者术后生存期为44.866月±12.946月,阳性表达者为23.714月±7.498月(χ2=10.006,P=0.002)。Cox多因素分析显示仅淋巴结转移和临床分期是影响患者预后的独立风险因素。结论MTA1在非小细胞肺癌组织中表达较正常肺组织明显增高,有淋巴结转移肺癌组织中的表达较无淋巴结转移肺癌组织明显增高。MTA1与非小细胞肺癌的分化程度、淋巴结转移、临床分期和患者的预后有关,但不能作为患者预后评估的独立指标。     

盆腔器官脱垂患者阴道前壁组织中弹性蛋白和细胞外基质蛋白fibulin-5的表达及意义

目的 探讨盆腔器官脱垂(POP)患者阴道前壁组织中弹性蛋白和细胞外基质蛋白fibulin-5的表达变化及其临床意义.方法 选择中国医科大学附属盛京医院妇产科2006年11月至2008年6月诊断为POP并行手术治疗的68例患者的膨出阴道前壁组织(POP组).POP组患者依据POP定量分度(POP-Q)法,分为Ⅰ度10例、Ⅱ度21例、Ⅲ度25例、Ⅳ度12例.选择同期因宫颈鳞癌Ⅰ b期行子宫伞切除+双侧附件切除术的18例患者的阴道前壁切除组织石蜡标本作为对照组.免疫组化染色法检测两组阴道前壁组织中fibulin-5和弹性蛋白的表达.结果 (1)弹性蛋白和fibulin-5在阴道前壁组织中的表达主要定位于细胞外基质.(2)POP组患者阴道前壁组织中fibulin-5的阳性表达率为15%(10/68),低于对照组的44%(8/18),差异有统计学意义(P=0.010).POP组患者阴道前壁组织中fibulin-5的阳性表达率,POP-Q分度为Ⅲ、Ⅳ度者[5%(2/37)]低于Ⅰ、Ⅱ度者[26%(8/31)],差异有统计学意义(P=0.035);已绝经者[13%(8/60)]与未绝经者(2/8)比较,阴道分娩≤2次者[19%(5/27)]与＞2次者[12%(5/41)]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)POP组患者阴道前壁组织中弹性蛋白的阳性表达率为31%(21/68),低于对照组的72%(13/18),差异有统计学意义(P=0.002).POP组患者阴道前壁组织中弹性蛋白的阳性表达率,POP-Q分度为Ⅲ、Ⅳ度者[19%(7/37)]低于Ⅰ、Ⅱ度者[45%(14/31)],差异有统计学意义(P=0. 034);已绝经者[30%(18/60)]与未绝经者(3/8)比较,阴道分娩≤2次者[26%(7/27)]与＞2次者[34%(14/41)]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(4)POP组68例患者阴道前壁组织中,fibulin-5与弹性蛋白表达均为阳性者6例,均为阴性者43例,fibulin-5与弹件蛋白在POP组患者阴道前壁组织中的表达呈正相关关系(P=0.031).结论 POP患者盆底结缔组织中弹性蛋白和fibulin-5表达下降,并与POP严重程度相关.