大肠杆菌基因工程菌在湖水中稳定性的初步研究

随着生物技术的发展，基因重组微生物产品越来越多，大量重组微生物施放到环境中，能否对大气生态平衡、人类健康造成危害，这成为世界上许多国家的科学家所关注的问题〔１－４〕。为此，选择我院研制和生产并获农业部生产文号的预防仔猪腹泻双价工程菌苗作为模式菌〔５〕...     

BALB/c小鼠多疫苗接种的安全性和有效性研究

【目的】研究小鼠多疫苗联合接种的安全性和有效性。【方法】研究要求6种（炭疽、鼠疫、出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗）疫苗进行联合接种，根据6种疫苗的联合接种方式、疫苗接种间隔和接种的先后顺序，设计3种疫苗快速接种方案（2～3W完成接种）。对研究对象连续观测了119d，以体重、免疫反应、生化指标及自发活动等指标对疫苗联合接种的安全性和有效性进行评价。【结果】研究过程中实验动物在疫苗联合接种中副反应发生比较明显.在某些时问点体重、白细胞计数、淋巴细胞百分比、AST、ALT和肌酐有变化。6种疫苗联合接种后，小鼠能够对各疫苗产生免疫反应。但是，不同方案疫苗免疫反应不同。其中以出血热疫苗的免疫反应受方案的影响更加明显。【结论】出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗等疫苗在采用恰当的接种顺序和接种间隔的情况下可以联合使用，但是可能存在一定的风险，尤其在此基础上加入炭疽和鼠疫疫苗。     

过滤式微生物采样器

过滤式微生物采样器军事医学科学院微生物流行病学研究所（北京１０００７１）张松乐用物理阻留的方法采集介质中的气溶胶粒子，称为过滤式采样。将过滤式采样用于细菌学检验，在本世纪初就开始研究。多年来由于科学工作者不断完善它在微生物采检方面的技术，至今已被广泛...     

肾综合征出血热病毒气溶胶的物理稳定性实验研究

本文采用荧光素钠正常鼠脑悬液做模拟示踪物质，对肾综合征出血热病毒气溶胶在空气中的物理稳定性进行了测定，并与其生物稳定性做了比较。结果表明：病毒气溶胶的粒子大小在１ｕｍ左右，它随气溶胶的胶龄增长而减少，且其分散度变窄。初始气溶胶的物理回收率及其各胶龄的物理存留率均明显地高于它的生物回收率和生物存活率。本文还就肾综合征出血热病毒气溶胶的物理稳定性和生物稳定性，对本病空气传播的影响进行了讨论。     

SARS-CoV抗原的纯化与鉴定

目的 纯化灭活SARS-CoV为研制马抗SARS-CoV免疫球蛋白提供抗原。方法将灭活的SARS-CoV悬液超滤浓缩，用Sepharose 4 Fast Flow分子筛和阴离子交换柱层析纯化，用高效液相色谱、SDS-PAGE和电镜观察测定抗原的纯度。结果将01、02和03三批SARS-CoV悬液分别进行11．2倍、12．5倍和25．0倍超滤浓缩，抗原的回收率依次为48．6％、46．3％和55．6％，凝胶过滤层析后抗原的回收率依次为81．6％、79．3％和86．0％。再经阴离子交换梯度层析进一步提高了抗原的纯度和浓度，蛋白的比活性由纯化前的0．11U/μg增加到1．44U／μg。电镜下观察到SARS-CoV抗原颗粒完整，呈圆形或椭圆形状，直径在80～120nm之间。SDS-PAGE显示主要条带位于Mr 43000～66000之间，经质谱扫描分析确定该成分为Mr 46000。高效液相层析法分析抗原纯度为97．0%。马抗SARS-CoV免疫球蛋白中和抗体效价在1：6400～1：12800之间。结论本研究为制备高效价的马抗SARS-CoV免疫球蛋白奠定了基础。     

国产六级安德森空气微生物采样器的简化使用效果观察

在室内外自然空气环境条件下，我们取６级安德森采样器的第２级和第６级组装成２级采样器．并和标准的６级采佯器进行捕获效果的比较、结果表明，两种采样器对空气细菌（５８９～５０００ｃｆｕ／ｍ３）和真菌（２２４～９８９ｃｆｕ／ｍ３）颗粒的捕获效果无明显差别（Ｐ＞０．０５）且呈显著的相关。     

布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究

目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果。方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒。转染COS7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达。BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射免疫BALB/c小鼠,观察特异性体液免疫和细胞免疫效果。进一步用1.25×104布氏杆菌A544强毒株腹腔攻毒,观察BCSP31/pVAX1重组表达质粒的免疫保护效果。结果扩增的BCSP31保护性抗原基因片断在牛、羊和猪布氏杆菌株中具有高度保守性,构建的BCSP31/pVAX1重组表达质粒在COS7细胞有目的蛋白抗原的表达。制备的BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉免疫BALB/c小鼠4次,ELISA检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒产生了较高水平的特异性IgG抗体,并随免疫次数增加抗体的滴度也递增,且抗体亚型以IgG2a为主,表明主要引起Th1型的免疫应答。FCM检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒的CD4+/CD8+比值明显下降,说明激发了显著的CTL效应。MTT测定BCSP31/pVAX1重组表达质粒的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异显著。布氏杆菌A544强毒株攻毒后,动物存活及脾组织细菌数与对照组比较有显著性差异,说明BCSP31/pVAX1重组表达质粒能够产生有效的保护效果。结论研制的BCSP31/pVAX1重组表达质粒免疫BALB/c小鼠能产生高水平的特异性体液免疫和细胞免疫,以细胞免疫为主,并产生有效的免疫保护效果,为布氏杆菌病新型疫苗的研究奠定了基础。     

产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究

目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ）、白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１,ＩＬ－１）的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应（ＳＰＤ５０）。结果产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素可显著地诱导ＴＮＦ、ＣＳＦ和ＩＬ－１的产生,在一定剂量范围内呈剂量依赖型。并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应。结论产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖在动物模型中具有显著的炎症性细胞因子诱导活性     

人用禽流感裂解疫苗生产工艺的研究

禽流感（avian influenza）是A型禽流感病毒（avian innuenzavirus，AIV）引起的一种急性高度致死性禽类传染病。禽流感病毒的感染谱很广，其感染人类的事件最先发生于中国香港，而近来印尼发生禽流感人传播人事件，给人们带来了极大恐慌。因此，做好人禽流感的防控工作是当今世界重大的科学问题。疫苗是防控新发传染病最有效的手段，而传统疫苗至今仍然发挥着重要的作用。对于流感病毒来说，传统疫苗主要包括灭活全病毒疫苗、裂解疫苗等。裂解疫苗因具有副作用少、使用人群广的优势，成为全世界疫苗生产商开发的重点。     

FA—Ⅰ型多级撞击式空气微生物采样器的简化使用效果观察

空气微生物对环境的污染及其危害,特别是对人群健康带来的危害日益严重并受到各方的关注。准确地监测室内外环境空气中的微生物污染,对制定环境标准,消除危害和保障人民健康都是十分重要的。空气微生物采样技术虽有100多年的历史,但是直到现在仍在不断的发展,不断的进步。我们参考文献报道研制的FA—Ⅰ型多级撞击式空气微生物采样器,能同时测定空气微生物污染的浓度分布和粒子大小分布。该采样器无论是它的生物采样性能还是物理结构性能都达到国外同类产品的水平。为了使该采样器一机多用,以适用各方面的需要,现将FA—Ⅰ单级采样器和FA—Ⅰ多级采样器捕获室内外自然空气细菌的比较结果报告如下。